周明
- 作品数：4 被引量：9H指数：1
- 供职机构：石河子大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- As_2O_3联合γ分泌酶抑制剂对HepG_2细胞凋亡的诱导作用及其机制被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨As2O3通过Notch信号通路对HepG2细胞凋亡的影响,阐明其作用机制。方法:体外培养的HepG2细胞分为空白组、As2O3组、MW167组和联合组;采用不同浓度As2O3和MW167处理HepG2细胞24、48和72h,MTT法检测细胞增殖抑制率。根据MTT结果选取无细胞毒剂量As2O3和MW167(As2O30.25mg·L-1、MW167 10μmol·L-1)分组干预HepG2细胞48h;流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-PCR和Western blotting法检测Notch-1、Bcl-2和Caspase-3mRNA和蛋白表达水平。结果:不同浓度As2O3和MW167处理HepG2细胞均可抑制细胞增殖,呈剂量效应关系;无细胞毒剂量As2O3和MW167处理不同分组HepG2细胞48h后,与空白组比较,As2O3组、MW167组和联合组细胞凋亡率升高(P<0.05),其中以联合组升高最为明显;与空白组比较,As2O3组、MW167组和联合组细胞中Bcl-2、Notch-1mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),其中以联合组降低最为明显;与空白组比较,As2O3组、MW167组和联合组细胞中Caspase-3mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05),其中以联合组升高最为明显。结论:As2O3可诱导肝癌HepG2细胞凋亡,其作用机制可能与通过Notch信号通路下调细胞中Bcl-2、Notch-1基因和蛋白表达水平以及上调细胞中Caspase-3基因和蛋白表达水平有关联。
- 周明王雪雯杨莉宋海林段晶晶
- 关键词：HEPG2细胞三氧化二砷细胞凋亡
- 重组腺病毒Canstatin对人肝癌HepG2细胞增殖影响的研究
- 2014年
- 为研究重组腺病毒Canstatin感染人肝癌HepG2细胞及细胞转染后Canstatin在HepG2细胞中的表达,探讨Canstatin基因对人肝癌HepG2细胞生长增殖的影响。采用不同感染复数(MOI=10、40、80)的腺病毒Ad-Canstatin-GFP感染HepG2细胞,倒置荧光显微镜下观察细胞形态,流式检测感染效率,Real-Time PCR和Western blot法检测HepG2细胞中Canstatin mRNA和蛋白表达。CCK-8法检测细胞增殖能力的变化,Western blot法检测细胞中PCNA蛋白的表达。结果显示MOI为40时,72 h感染率可达到98.9%,HepG2细胞中Canstatin mRNA和蛋白表达均高于对照组和空载体组(P<0.05)。HepG2细胞感染Ad-Canstatin腺病毒后生长增殖受到抑制(P<0.05),且PCNA的表达低于对照组(P<0.05)。由此可知,Canstatin抑制人肝癌HepG2细胞的生长增殖有作用可能与影响PCNA的表达有关。
- 段晶晶王雪雯宋海林周明杨莉
- 关键词：CANSTATIN人肝癌HEPG2细胞增殖腺病毒
- 三氧化二砷对肝癌HepG2细胞形成血管生成拟态的影响及其机制被引量：7
- 2014年
- 目的:探讨三氧化二砷(AS2O3)对肝癌HepG2细胞血管生成拟态(VM)形成的影响,初步阐明AS2O3对VM抑制的可能作用机制。方法:应用CCK-8法测定AS2O3对HepG2细胞作用72h的半数抑制浓度(IC50);以Matrigel胶体外三维培养HepG2细胞,将其分为空白对照组、1/2IC50AS2O3组和IC50AS2O3组,IPP软件计算VM的数量、长度和面积,Western blotting法检测VM相关蛋白VE-cadherin、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、凋亡相关蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase-3)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果:AS2O3作用HepG2细胞72h后IC50为10μmol·L-1。与对照组比较,1/2IC50AS2O3组和IC50 AS2O3组VM数量、长度和面积明显减少(P<0.01);与1/2IC50AS2O3组比较,IC50AS2O3组VM数量、长度和面积亦明显减少(P<0.05);与对照组比较,1/2IC50AS2O3组和IC50AS2O3组VE-cadherin和MMP-2蛋白表达水平降低(P<0.05),而caspase-3和PCNA蛋白表达水平无明显变化(P>0.05)。结论:AS2O3抑制HepG2细胞形成VM,其作用机制可能与抑制拟态通路相关蛋白VE-cadherin和MMP-2的表达有关。
- 宋海林王雪雯段晶晶周明杨莉
- 关键词：血管生成拟态三氧化二砷HEPG2细胞肝肿瘤
- As_2O_3联合γ分泌酶抑制剂MW167对人肝癌HepG_2/ADM细胞耐药性的影响被引量：1
- 2018年
- 目的:探讨三氧化二砷(As_2O_3)和γ分泌酶抑制剂MW167单独及联合作用对HepG_2/ADM细胞耐药性的影响,并阐明其作用机制。方法:MTT法检测不同浓度As_2O_3(0.25、0.50、1.00、2.00、4.00和8.00mg·L-1)和MW167(10、20和40μmol·L-1)处理HepG_2/ADM细胞24、48和72h后细胞的吸光度(A)值,计算细胞增殖抑制率,确定药物作用浓度和时间;将HepG_2/ADM细胞分为空白组、As_2O_3组、MW167组、As_2O_3和MW167联合组;根据MTT结果选取无细胞毒剂量的As_2O_3、MW167干预各组细胞48h后,FCM法检测细胞凋亡率;RT-PCR和Western blotting法分别检测各组细胞中Notch-1、Hes-1、MDR-1(P-gp)、Bcl-2和Bax mRNA及蛋白表达水平。结果:在同一浓度时,As_2O_3和MW167对HepG_2/ADM细胞的增殖抑制率随着作用时间的延长而升高(P<0.05或P<0.01);在同一时间点,As_2O_3和MW167对HepG_2/ADM细胞的增殖抑制率随药物浓度的增加而升高(P<0.05);确定As_2O_3和MW167的无毒剂量分别为0.25mg·L-1和10μmol·L-1,干预时间为48h。药物干预48h后,与空白组比较,各干预组细胞凋亡率均升高(P<0.05),其中以联合组升高最为明显(P<0.01)。与空白组比较,各干预组细胞中Notch-1、Hes-1、MDR-1(P-gp)和Bcl-2mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05),其中以联合组降低最为明显(P<0.01);与空白组比较,各干预组Bax mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),其中以联合组升高最为明显(P<0.01)。结论:As_2O_3可逆转HepG_2/ADM细胞的耐药性,其作用机制可能与抑制细胞增殖、促进细胞凋亡、下调细胞中Notch-1、Hes-1、MDR-1(P-gp)和Bcl-2基因及蛋白表达水平及上调Bax基因和蛋白表达水平有关。
- 杨莉王雪雯周明张帆
- 关键词：三氧化二砷NOTCH信号通路多药耐药
