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王志永
作品数:
25
被引量:134
H指数:8
供职机构:
北京协和医院
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相关领域:
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刘彤华
北京协和医院
崔全才
北京协和医院
陈杰
北京协和医院
张雷
北京协和医院
李和伟
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3篇
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5篇
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8篇
1995
6篇
1994
1篇
1993
共
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肺癌中Ki-ras癌基因突变的检测及其临床意义
被引量:3
1996年
肺癌中Ki-ras癌基因突变的检测及其临床意义张雷刘鸿瑞王志永张淑华我们用多聚酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测肺癌及邻近正常肺组织中Ki-ras基因第12密码子突变,以探讨Ki-ras基因突变在肺癌发生中的作用及其临...
张雷
刘鸿瑞
王志永
张淑华
关键词:
肺肿瘤
癌基因
基因突变
表达反义c-myc RNA的重组逆转录病毒载体对人胰腺癌细胞恶性表型的逆转作用
被引量:3
1996年
为研究表达反义c-myc RNA的逆转录病毒载体抑制靶基因的表达和翻译,使胰腺癌细胞恶性表型逆转的机理,利用pXT1逆转录病毒载体构建了一个能表达反义c-mycRNA的质粒,经病毒包装细胞PA317包装后,使之成为具有感染力的重组病毒。用该病毒感染人胰腺癌细胞系PC-2细胞,经G418筛选得到稳定的转化细胞系。Northern
李和伟
刘彤华
王志永
陈杰
崔全才
高洁
关键词:
反义RNA
逆转录病毒载体
一种提高重组逆转录病毒滴度的收集法
被引量:2
1995年
一种提高重组逆转录病毒滴度的收集法李和伟,王志永,刘彤华(北京协和医院病理科北京100730) 为提高逆转录病毒介导的基因转移效率,高滴度的重组病毒是必要条件之一。影响包装细胞分泌产生重组病毒的因素很多,本文就提高病毒滴度方面进行了研究。培养基IMD...
李和伟
王志永
刘彤华
关键词:
逆转录病毒
滴度
实验室
重组病毒
用于PCR检测的病理标本处理方法
被引量:8
1994年
用于PCR检测的病理标本处理方法王志永,张雷,张淑华,刘彤华(北京协和医院病理科100730)目前在国内,聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR)技术已逐步应用于病理诊断和辅助诊断中,并显示出良好的应用前景。病理标本中核...
王志永
张雷
张淑华
刘彤华
关键词:
病理标本
PCR
人肺癌、胃癌及肝癌c-Ki-ras第12密码子点突变的研究
1996年
以30例肺癌、40例胃癌及22例肝癌石蜡包埋组织提取的DNA为模板,经两轮PCR扩增一限制性内切酶酶切,用限制性酶切片段长度多态性方法(RFLP)检测c-Ki-ras第12密码子点突变。结果发现,肺癌组织中20%(6/30)有突变,其中40%(4/10)鳞癌和20%(2/10)腺癌有突变,小细胞肺癌(0/10)无突变;40例胃癌中仅1例(2.5%)有突变,22例肝癌无1例突变。PCR-RFLP是一种很敏感及快速检测基因突变的方法。
崔全才
王志永
陈杰
刘彤华
关键词:
肺肿瘤
胃肿瘤
肝脏肿瘤
癌基因
点突变
石蜡包埋组织DNA的提取
被引量:4
1993年
多年存档的常规福尔马林固定石蜡包埋的病理标本,可用聚合酶链反应(PCR)技术进行回顾性研究或检测,但模板DNA的质量直接影响PCR的效果。
李德春
王志永
刘彤华
王德田
关键词:
DNA
胰腺肿瘤和正常胰腺组织中c-Ki-ras第12密码子点突变
被引量:5
1994年
对2例正常人胰腺组织、7例人胰腺内分泌肿瘤、5例胰腺癌手术标本、3例胰腺癌细胞系、7例胰腺癌裸鼠移植瘤标本的DNA进行PCR扩增后,分别用斑点杂交和单链构象多态性技术对c-Ki-ras第12密码子.点突变进行检测。结果发现,仅胰腺癌标本存在高频率的c-Ki-ras第12密码子的突变(斑点杂交阳性率11/15,单链构象多态性为12/15)。单链构象多态性技术与斑点杂交技术相比具有方便快速的特点。
崔全才
王志永
陈杰
王德田
刘彤华
关键词:
胰腺肿瘤
癌基因
点突变
斑点杂交
用原位杂交技术检测舍格伦综合征唇涎腺组织内EB病毒DAN
被引量:3
1994年
应用原位杂交技术对石蜡包埋的28例舍格伦综合征和7例对照病例的唇涎腺组织中EB病毒的DNA进行了检测。EB病毒基因W片段核酸探针由同位素掺入的聚合酶链反应扩增产生。原位杂交结果发现,17例舍格伦综合征及2例对照的唇涎腺腺泡上皮内均有EB病毒DNA存在,而且舍格伦综合征病例唇涎腺的导管上皮及浸润的淋巴细胞内亦能检出EB病毒DNA。本研究结果进一步证明,EB病毒在舍格伦综合征的发病机理中起着重要作用。
王志永
李德春
王德田
刘彤华
关键词:
E-B病毒
原位杂交
干燥综合征
单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶基因对人胰腺癌细胞的杀伤作用
被引量:3
1995年
构建了能表达单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶(herpessimplexvirusthymidinekinase,HSV-TK)的逆转录病毒质粒pNTK,经病毒包装细胞PA317包装后成为具有感染力的重组病毒,用该病毒感染人胰腺癌细胞系PC-2细胞,经G418筛选得到稳定的转化细胞系。Northernblot杂交证实转化PA317细胞及转化的PC-2细胞中均有重组病毒的表达。pNTK转化的PC-2细胞能使无毒性前身药物acyclovir(无环鸟苷,ACV)或ganciclovir(GCV)具有明显的细胞毒性,细胞杀伤率>90%,而对照组PC-2细胞杀伤率<10%。同时还观察到“旁观者效应”现象。
李和伟
刘彤华
王志永
陈杰
崔全才
高洁
关键词:
胰腺肿瘤
单纯疱疹病毒
杀伤作用
肺癌中EB病毒的原位杂交检测
被引量:13
1996年
为观察EB病毒在肺癌组织中的分布并探讨EB病毒感染与肺癌的关系,对87例肺癌组织中经多聚酶链反应(PCR)检测52例EB病毒阳性的石蜡包埋组织,用原位杂交技术进行定位检测。癌组织及癌旁肺组织原位杂交EB病毒阳性率分别为37.9%(33/87)和11.5%(IO/87);中、低分化癌与高分化癌EB病毒阳性率有显著差异,强阳性病例均为分化较差的肿瘤;累及胸膜、肋骨、隔肌的肺癌,其EB病毒阳性率明显高于未侵及者;随着EB病毒感染的加重,淋巴细胞浸润增多。结果表明:EB病毒感染与肺癌细胞的生物学特性及肺癌的发展有关。
张雷
刘鸿瑞
王志永
张淑华
关键词:
肺肿瘤
原位杂交
E-B病毒
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