王琴
- 作品数:272 被引量:1,184H指数:21
- 供职机构:中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技支撑计划“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 猪瘟的实验室诊断技术研究进展
- 王琴
- 利用可视化原位杂交技术研究CSFV在猪脾脏和肺脏的分布情况
- 猪瘟又称经典猪瘟(Classical Swine Fever,CSF),是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起猪的高度致死性、接触性传染病。CSFV是单股正链RNA病毒。RN...
- 孙骏翔孙永芳张玉杰徐璐张乾义赵启祖王琴
- 关键词:原位杂交肺脏脾脏
- 应用生物素标记DNA探针检测伪狂犬病病毒的研究被引量:22
- 1996年
- 应用生物素标记DNA探针检测伪狂犬病病毒的研究王琴,郭万柱,阴文奇(四川农业大学动物科技学院,四川雅安,6255014)关键词伪狂犬病毒,核酸,杂交,检测核酸杂交技术已广泛用于检测畜禽疱疹病毒和其它动物病毒,已报道PRV-DNA的探针方法有RNA-D...
- 王琴郭万柱阴文奇
- 关键词:伪狂犬病毒DNA探针家畜病毒学
- 对猪瘟野毒及其疫苗、非洲猪瘟病毒进行鉴别诊断的基因芯片以及检测方法
- 本发明涉及一种探针组合物,其是用于对猪瘟野毒及其疫苗、非洲猪瘟病毒进行鉴别诊断的探针组合物;还涉及相应的基因芯片和试剂盒。
- 张乾义夏应菊王琴赵启祖徐璐邹兴启万建青郎洪武李翠朱元源徐嫄王兆
- 猪瘟病毒载量在猪体内各器官动态分布规律的研究
- 本研究采用荧光PCR(FQ-PCR)方法对猪瘟病毒感染试验用猪进行了体内外的动态分布规律研究。参考GenBank中34条CSFV全基因组序列及多条BVDV、BDV全基因组序列,设计了一套CSFV特异的引物和探针;同时参考...
- 刘俊王琴徐璐范学政周远诚
- 关键词:猪瘟病毒病毒载量
- 猪瘟病毒抗体ELISA检测国家级能力验证结果与分析被引量:2
- 2020年
- 猪瘟疫苗免疫是我国猪瘟防控的核心,猪瘟病毒抗体ELISA检测是进行免疫效果评价的最常用手段。中国兽医药品监察所国家/OIE猪瘟参考实验室(以下简称:参考实验室)承担了国家认证认可监督管理委员会(以下简称“认监委”)组织的A类能力验证项目“猪瘟诊断检测技术”(CNCA-19-A01),全面考察和评价我国动物疫病检测机构对猪瘟病毒抗体的检测能力。参考实验室负责制备检测样品,并进行随机编号。向每个参试实验室发放4份待检盲样,由其采用ELISA方法对各盲样进行定性判断,并向参考实验室提供检验结果及原始检验报告。出现“不满意”结果的单位可参加补测1次,若补测结果仍为“不满意”,则表明该实验室暂不具备该参数的检测能力。参加本次能力验证猪瘟病毒抗体检测的实验室共有103家,初测满意率为92.23%,初测和补测的总体满意率为100%。此次能力验证结果表明,参加此次能力比对试验的猪瘟检测机构均能够提供正确的检测结果,可以满足猪瘟病毒抗体监测的需求。通过本次能力验证项目查找出了存在的问题,参试单位可以及时纠正错误,进一步提升猪瘟抗体的检测能力。
- 徐璐夏应菊张乾义张雯雯王震李翠邹兴启朱元源徐嫄王兆赵启祖王琴
- 关键词:猪瘟免疫抗体ELISA
- 猪瘟病毒C株表位突变毒株的构建及拯救
- 2024年
- 本研究旨在突变猪瘟病毒C株WH303位点,构建感染性克隆,为猪瘟病毒C株标记疫苗的研究提供候选毒株。本试验以猪瘟病毒C株为研究材料,经重叠PCR方法突变WH303位点,再分别连接至C株和C-flag株全长感染性克隆。体外转录RNA,转染PK15细胞,细胞连续传代完成病毒的拯救和增殖。结果显示,经特异性限制内切酶酶切反应验证,感染性克隆构建成功。经RT-PCR、过氧化物酶单层细胞试验检测,表明病毒成功拯救。病毒细胞传代至17代,检测到病毒,表明病毒可以稳定传代。综上,本研究成功构建了C株WH303突变感染性克隆MC和MC-flag,并成功拯救MC株,得到可以稳定传代的病毒株。
- 刘元杰徐璐朱元源徐嫄张乾义李翠李明夏应菊王琴刘业兵赵启祖邹兴启
- 关键词:猪瘟病毒C株感染性克隆
- 猪瘟病毒野毒株TaqMan-MGB荧光定量PCR鉴别方法的建立与应用被引量:23
- 2009年
- 【目的】建立一种快速、敏感、特异地检测猪瘟病毒野毒的一步TaqMan-MGB荧光定量PCR方法,为临床鉴别猪瘟野毒和HCLV疫苗毒提供了准确可靠的工具。【方法】在猪瘟病毒基因组5′端非编码保守区设计一对猪瘟病毒通用引物和一条特异性MGB探针,通过优化,得到最佳反应体系和反应条件,进行特异性、灵敏度和临床样本符合检验。【结果】该方法在100~10-7范围内线性相关系数为0.998,检测极限达5.3×10-2pg病毒核酸;对24个质控样本检测结果显示,该方法能检测除猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)以外的猪瘟流野毒株,其它猪相关致病病原检测阴性;对122份疑似猪瘟样本检测的结果与本实验室建立的RT-nPCR方法的符合率为94.3%(115/122),阳性和阴性符合率分别为86.4%(38/44)和98.7%(77/78),Kappa值为0.87>0.75【。结论】建立的一步TaqMan-MGB荧光定量PCR方法能鉴别猪瘟野毒和HCLV疫苗毒,且特异性好、灵敏度高、与笔者先前建立的RT-nPCR方法对临床样本的检测结果具有高度的一致性。
- 刘俊王琴范学政徐璐赵启祖黄伟汤波沙莎周远成陈蕾邹兴启
- 关键词:猪瘟荧光定量PCR兔化弱毒疫苗
- 9株猪瘟分离毒株致病特性的研究
- 为了研究我国目前流行的部分猪瘟分离株在致病性方面的差异以及在本动物体内的传代特性,本研究采用9株田间表现高、中、低致病特点的猪瘟野毒分离株第3代细胞毒作为种毒对实验猪进行肌肉接种,用上一代传代猪发病后的血毒作为下一代接毒...
- 王琴宁宜宝赵耘王在时张广川范学政宋立秦玉明沈青春丘惠深余兴龙吕宗吉徐兴然涂长春
- 关键词:猪瘟病毒致病特性
- 猪瘟兔化弱毒疫苗荧光定量RT-PCR检测试剂盒
- 本发明涉及猪瘟兔化弱毒疫苗荧光定量RT-PCR检测试剂盒。利用猪瘟兔化弱毒疫苗株(HCLV株)的基因序列,设计了特异性的HCLV荧光探针和引物。经过对反应条件的优化,研发了猪瘟兔化弱毒疫苗荧光定量RT-PCR检测试剂盒。...
- 王琴徐璐赵启祖范学政邹兴启朱元源陈锴