李晓艳 作品数:46 被引量:173 H指数:6 供职机构: 军事医学科学院军事兽医研究所 更多>> 发文基金: 吉林省科技厅科技发展计划项目 国家自然科学基金 吉林省科技发展计划基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
RNA干扰的作用机制及应用前景 被引量:3 2006年 RNA干扰是将双链RNA导入细胞引起特异基因mRNA降解的一种细胞反应过程,涉及多种蛋白质共同参与。此干扰机制可在转录、转录后和翻译水平上实现。转录水平上的干扰机制是通过对靶基因染色质结构的改变,使其基因转录受限,导致表达系统的关闭。翻译水平上的干扰机制,是通过抑制相应mRNA的翻译,使相应的蛋白质表达受阻。转录后水平则包括siRNA形成阶段和扩增循环阶段。siRNA形成阶段即外源性或内源性dsRNA通过Argonaute家族基因编码的蛋白质的识别,进一步诱导双链RNA与Dicer结合。扩增循环阶段即特异性siRNA与靶mR-NA结合后,没有被活性酶切割、降解;而是以siRNA中的一条链为引物,以靶mRNA为模板,在RNA依赖的RNA聚合酶的作用下,延伸形成新的双链RNA,被Dicer内切酶或相关酶切割为新的21 nt^23 nt siRNA。随着RNA干扰技术的不断进步,RNA干扰可广泛地应用到抗病毒,肿瘤治疗,药物靶点筛选以及免疫性疾病治疗等方面。 唐景峰 李晓艳 王兴龙关键词:RNA干扰 环丙沙星单克隆抗体制备、纯化及鉴定 被引量:6 2008年 目的:制备抗环丙沙星单克隆抗体。方法:用碳二亚胺(EDC)法合成的环丙沙星-牛血清白蛋白完全抗原(CPFX-BSA)免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术筛选分泌抗环丙沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞株。结果:筛选出3株分泌抗环丙沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞株1D10、3C6和3G7,其抗体类型分别为IgM、IgG1和IgG1。其中3C6腹水抗体纯度、抗体浓度、亲和常数分别为80.04%、3.96 g/L和1.01×108L/mol。该单抗与恩诺沙星、诺氟沙星的交叉反应率分别为125.89%、19.50%,与青霉素、卡那霉素和庆大霉素等无交叉反应。结论:该单抗可用于动物性食品中CPFX残留ELISA检测方法的建立。 李岩松 周玉 万忠海 李晓艳 谭建华关键词:单克隆抗体 羊布氏菌SOD基因重组酿酒酵母菌株的构建及鉴定 2011年 目的构建羊布氏菌超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)基因重组酿酒酵母菌株,并进行鉴定。方法 PCR扩增羊布氏菌16M株SOD基因,与psos载体连接,构建重组表达质粒psos-SOD,转化酿酒酵母菌cdc25H,并进行PCR鉴定、表型验证、自激活及定位情况检验。结果重组真核表达质粒psos-SOD经双酶切和测序证明构建正确;重组酵母菌经PCR可扩增出525 bp的SOD基因条带,其表型正常,无自激活宿主菌的作用,表达蛋白定位正确。结论已成功构建了羊布氏菌SOD基因重组酿酒酵母菌株,为研究布氏菌致病的分子机制奠定了基础。 王景龙 屈海龙 杨延玲 孙春辉 王秀然 郎需龙 李晓艳 卜昭阳 王兴龙关键词:超氧化物歧化酶 新城疫病毒TL1株P基因的克隆及序列分析 2007年 根据GenBank登陆的新城疫病毒P基因序列,设计了一对引物,用RT-PCR技术对新城疫病毒内蒙古分离株TL1的P基因进行了扩增。将扩增产物提纯后克隆入pGEM-Teasy载体,通过酶切、PCR和测序验证克隆正确。测序拼接得出P基因的序列长度为1248bp,该基因的ORF总长为1188bp,编码395个氨基酸。与GenBank下载的12株参考毒株比较P基因编码区全核苷酸序列和氨基酸序列,发现TL1株与鹅源新城疫NA-1株核苷酸的同源性为99.8%,氨基酸的同源性为99.2%;与鹅源新城疫ZJ1株核苷酸的同源性为96.1%,氨基酸的同源性为95.5%,说明TL1株和与鹅源新城疫NA-1株、ZJ1株的同源性极高,它们三者亲缘关系较近,同属于基因VII型新城疫病毒。而与传统疫苗株LaSota核苷酸的同源性为83.4%,氨基酸的同源性81.8%,说明该毒株相对于经典的NDV在P基因上已发生了较大的变异。 王学理 王兴龙 李晓艳 任林柱 张辉 闫广谋关键词:新城疫病毒 P基因 淫羊藿苷对成年雌性大鼠血清中雌二醇的影响 目的:观察淫羊藿苷(icariin ICA)对成年雌性大鼠不同发情阶段血清中雌二醇的影响,探讨淫羊藿苷促进雌性动物生殖的机理;方法:不同剂量药物组大鼠注射相应剂量的淫羊藿苷,阴道涂片法确定大鼠的发情周期,分别在大鼠的发情... 张森 于海峰 李晓艳 韦旭斌 谭建华关键词:淫羊藿苷 雌二醇 雌性大鼠 动物布鲁氏菌抗原胶体金试纸膜检测试剂盒 本发明公开一种动物布鲁氏菌抗原胶体金试纸膜检测试剂盒,根据抗原抗体能特异结合的免疫学基本原理,利用胶体金免疫层析技术和银染加强技术,以重组的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)作为金标抗体,以高纯度的布鲁氏菌LPS作为包被抗原... 王兴龙 李晓艳 唐景峰 梅建军动物布鲁氏菌抗体胶体金试纸膜检测试剂盒 本发明公开一种动物布鲁氏菌抗体胶体金试纸膜检测试剂盒,根据抗原抗体能特异结合的免疫学基本原理,利用胶体金免疫层析技术和银染加强技术,以重组的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)作为金标抗体,以高纯度的布鲁氏菌LPS作为包被抗原... 王兴龙 李晓艳 唐景峰 梅建军布鲁氏菌胞内寄生的研究进展 被引量:2 2012年 布鲁氏菌是一种能够在哺乳动物巨噬细胞内生存和增殖的兼性厌氧菌。近年来,布鲁氏菌的研究主要集中在参与细胞内寄生过程中的毒力因子及其对宿主细胞的影响。主要论述布鲁氏菌如何逃避巨噬细胞的防御及其在细胞内寄生状况。 张瑞 王秀然 李晓艳 王景龙 钱晶 冉会玲 王兴龙关键词:布鲁氏菌 巨噬细胞 寄生 防御机制 卵泡液中总蛋白含量与卵泡直径的关系 被引量:1 2009年 通过检测不同直径卵泡的卵泡液中总蛋白含量的变化,从而进一步阐明卵泡液中蛋白成分在卵泡发育过程中的作用。将直径为3-5、5-8、8—10mm的卵泡和囊肿卵泡(〉21mm)分为4组(n=10),分别抽取卵泡液。通过TCA/丙酮方法进行样品处理;根据Bradford法检测原理,利用分光光度计对其进行蛋白定量研究。结果表明:3-5mm为4440μg/mL,5-8mm/11为976μg/mL,8~10mm为686μg/mL,囊肿卵泡(〉21mm)为537.2μg/mL。经SPSS13.0软件分析,3—5mm卵泡液中蛋白平均浓度高于其他组(p〈0.01);其他3组间差异均不显著(P〉0.05);囊肿卵泡中蛋白含量最低。由此可得出,卵泡液中总蛋白浓度随着卵泡直径的增加而降低,表明卵泡液中的蛋白含量与卵泡发育的成熟度呈负相关。而囊肿卵泡的发生很可能和蛋白含量降低有关,为卵泡囊肿发病机制的研究提供新的理论参考。 孙艳玲 李纯锦 陈璐 李晓艳 周虚关键词:卵泡液 蛋白 5株氟罗沙星单克隆抗体杂交瘤细胞株的品质评价 被引量:1 2009年 通过对5株杂交瘤细胞株分泌稳定性、抗体亚型、亲和力、特异性等方面的测定,表明其染色体众数为87~90条,具有众数的细胞所占比例为81%~84%,单抗亚型均为IgG1型,腹水单抗的亲和常数为108~109M-1,氟罗沙星单抗与诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、链霉素、庆大霉素、卡那霉素的交叉反应试验表明,所制备的抗氟罗沙星单抗对氟喹诺酮类药物有较高的交叉反应率,与链霉素、庆大霉素、卡那霉素无交叉反应。 谭成成 刘艳霞 李晓艳 万忠海关键词:氟罗沙星 单克隆抗体