徐志凯
- 作品数：436 被引量：1,162H指数：15
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划高等学校骨干教师资助计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 重链可变区基因随机CDR3 ScFv噬菌体抗体库的构建及筛选被引量：3
- 2000年
- 目的构建VH 基因随机CDR3ScFv噬菌体抗体库 ,并筛选抗HFRS病毒NP抗原的噬菌体抗体。方法采用随机引物PCR法扩增抗HFRS病毒mAb1A8的VH 基因 ,并与1A8VL 基因共同克隆入噬菌粒表达载体 pHEN1后 ,构建VH 基因随机CDR3ScFv基因库。继用辅噬菌体VCSM13超感染后得到噬菌体抗体库 ,然后用HFRS病毒抗原进行筛选。随机挑取筛选的菌落超感染 ,用夹心ELISA检测超感染上清。结果获得库容量约为107 噬菌体抗体库。夹心ELISA的结果表明 ,筛选出的噬菌体抗体可与HFRS病毒NP抗原特异性结合。结论成功地构建了库容量较高的ScFv噬菌体抗体库 ,并获得可与HFRS病毒NP抗原结合的噬菌体抗体。
- 阎岩白文涛徐志凯罗雯张芳琳吴兴安刘勇王海涛
- 关键词：单链抗体噬菌体抗体库HFRSV
- 单纯疱疹病毒1型药物敏感性测定及其阿昔洛韦耐药株的建立被引量：1
- 2009年
- 目的建立单纯疱疹病毒1型(HSV-1)药物敏感性的测定方法,并建立体外耐药病毒株。方法将HSV-1接种于乳兔肾细胞中,加入不同浓度的阿昔洛韦(ACV),培养72 h后固定、染色、清点空斑数并计算药物的半数抑制浓度(IC50),通过IC50来判断HSV-1的药物敏感性。将HSV-1在含ACV环境中连续培养9代,分别在第3、6和9代测定其IC50。结果ACV对HSV-1标准株SM44毒株的IC50为0.7μg/ml。HSV-1在含ACV的环境中连续培养3代后即产生了耐药性,第3、6和9代的IC50分别为7.2、34.2μg/ml和85.3μg/ml。结论空斑抑制试验是测定病毒药物敏感性的有效、实用的方法,建立的体外耐药病毒株可用于HSV-1的耐药性研究。
- 刘军连徐志凯喻启桂
- 关键词：单纯疱疹病毒1型耐药性
- 案例教学法在全科医学教学中的应用及其探讨被引量：11
- 2016年
- 案例教学法(CTM)是教学方法改革的方向之一。构建案例教学和传统讲授式结合的教学形式,并在全科医学专业医学基础教育中进行了实践。对学员的调查结果显示,CTM可显著提高学习兴趣,促进学员的学习。对案例教学法的实施对象、范围、实施条件及与其他教学方法的比较和结合等问题进行了总结,为案例教学法在医学基础教育中的推广和应用提供了实践经验。
- 柏银兰柴春雨徐志凯张芳琳吴兴安
- 关键词：教学方法案例教学法全科医学
- 结核分枝杆菌MPT64-ESAT6融合蛋白在小鼠体内诱导的免疫应答及其保护力被引量：11
- 2006年
- 目的:测定MPT64与ESAT6融合蛋白在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力.方法:将MPT64与ESAT6的融合蛋白皮下免疫小鼠3次,每次间隔2wk,ELISA测定免疫小鼠血清特异性抗体的滴度.最后一次免疫完成后4wk,分离部分免疫小鼠脾淋巴细胞,MTT法检测淋巴细胞刺激指数,ELISA检测悬液中IFNγ水平.另一部分免疫的BALB/c小鼠经尾静脉感染MTB毒株H37Rv,4wk后计数脾脏细菌负荷数.结果:MPT64ESAT6融合蛋白免疫小鼠血清特异性抗体滴度1∶1500,免疫小鼠后淋巴细胞刺激增殖指数为2.23,而生理盐水免疫组只有0.88;脾淋巴细胞悬液中诱发的IFNγ为(4.28±0.27)μg/L,显著高于生理盐水免疫组[(0.48±0.17)μg/L,P<0.05],但不及BCG免疫组[(5.18±0.31)μg/L].与生理盐水免疫组(细菌负荷6.45±0.17)相比较,融合蛋白免疫的小鼠,对攻击感染后抗MTB在脾脏中增殖有显著作用,细菌负荷为5.04±0.11,但与BCG免疫组相比脾脏细菌负荷减少甚微(细菌负荷4.38±0.22).结论:MPT64与ESAT6融合蛋白可作为新型结核疫苗的候选组分.
- 师长宏安家泽唐小凤王晓武张海柏银兰徐志凯
- 关键词：结核分枝杆菌疫苗MPT64ESAT6
- 表皮葡萄球菌生物被膜对红霉素渗透性的研究被引量：6
- 2008年
- 为探讨表皮葡萄球菌生物被膜对红霉素的渗透性,我们采用生物被膜抗生素渗透模型检测Staphylcoccus epidermidis1457、1457-msrA和临床分离株S68生物被膜不同时间点红霉素的渗透率,并用吖啶橙染色激光共聚焦显微镜观察生物被膜内细菌RNA/DNA的相对含量;扫描电子显微镜观察膜内细菌的密度。红霉素作用36h后,1457、1457-msrA、S68的渗透率分别为0.93,0.55和0.4;1457渗透地较快,8h后渗透率即达到0.58,而1457msrA和S68相对较为缓慢,24h后分别为0.499和0.31;吖啶橙染色可见红霉素作用下膜内菌RNA和DNA的相对比例减小,生长速率下降;扫描电子显微镜观察可见生物被膜红霉素作用后空气面的细菌数与琼脂面相比均较少,细胞碎片相对较多,而对照组(无抗生素作用)琼脂面和空气面的细菌密度和分布较均匀。可见红霉素可渗透入表葡菌生物被膜,但不能完全杀死膜内细菌;膜内细菌在生物被膜环境中生长速率下降,有助于降低细菌对红霉素的敏感性。
- 贾宁安群星徐志凯袁云娥索继江邢玉斌
- 关键词：表皮葡萄球菌生物被膜渗透性
- HCV NS3丝氨酸蛋白酶及以其为靶位的抗感染研究进展被引量：1
- 2005年
- 丙型肝炎病毒感染最显著的特征是慢性化,已经成为严重的社会公共卫生问题。目前治疗方法仅限于干扰素-利巴韦林联合使用,持续疗效有限而且副作用大,因此迫切需要寻找特异有效的抗病毒药物。HCVNS3基因编码的NS3蛋白具有丝氨酸蛋白水解酶、解旋酶和磷酸核苷酶活性,在病毒RNA复制和多聚蛋白前体的加工成熟中有着重要作用。因此,NS3丝氨酸蛋白酶的抑制剂是抗病毒的理想药物。本文就HCVNS3丝氨酸蛋白酶及以其为靶位的抗感染研究综述如下。
- 杨敬尹文徐志凯
- 关键词：HCVNS3丝氨酸蛋白酶靶位
- 抗变形链球菌SA Ⅰ／Ⅱ单克隆抗体的制备被引量：1
- 1996年
- 抗变形链球菌ＳＡ Ⅰ／Ⅱ单克隆抗体的制备文立亚，姜绍谆，马文煜，徐志凯（第四军医大学微生物学教研室，西安７１００３２）蔡美英，张传彬，魏大鹏，陈健康（华西医科大学免疫学教研室，成都６１００４１）二十多年来，防龋免疫学的研究在不断深人，变形链球菌（Ｓｔ...
- 文立亚姜绍谆马文煜徐志凯蔡美英张传彬魏大鹏陈健康
- 关键词：变形链球菌单克隆抗体龋齿
- 宫颈糜烂患者单纯疱疹病毒感染的检测
- 目的了解宫颈糜烂患者单纯疱疹病毒（HSV）感染状况。方法用抗原捕获聚合酶链反应（AC PCR）对450份妇女宫颈棉拭标本进行HSV检测与分型。结果 HSV的检出率为25.5%（115//450）,其中HSV-1和HSV-...
- 刘军连徐志凯喻启桂王红英
- 关键词：宫颈糜烂单纯疱疹病毒感染检出率
- 文献传递
- 单克隆抗体3D8可溶性单链抗体的表达被引量：3
- 1995年
- 单克隆抗体３Ｄ８可溶性单链抗体的表达闫岩，汪美先，徐志凯，尹文，汪力亚，王海涛，祝道成，张劲翼（第四军医大学微生物学教研室，西安７１００３２）３Ｄ８是本室研制的具有高血凝抑制活性、高中和活性和高保护性的抗肾综合征出血热病毒血凝素小鼠单克隆抗体。作者已...
- 闫岩汪美先徐志凯尹文汪力亚王海涛祝道成张劲翼
- 关键词：单克隆抗体
- 汉滩病毒囊膜糖蛋白G1基因重组腺病毒载体的构建及其在Vero E6细胞中的表达
- 本文采用PCR法从含汉滩病毒-76118株M基因的M56质粒扩增糖蛋白G1基因片段,利用穿梭质粒pShuttle,将其克隆入Adeno-XviralDNA,获得重组腺病毒DNA,转染HEK293细胞,包装、扩增后得到汉滩...
- 吴兴安张芳琳于澜史梦远白文涛胡刚刘勇王海涛徐志凯
- 关键词：汉滩病毒囊膜糖蛋白基因重组腺病毒载体
- 文献传递
