王平 作品数:98 被引量:310 H指数:11 供职机构: 贵阳中医学院 更多>> 发文基金: 贵州省优秀科技教育人才省长资金项目 贵州省科学技术基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 文化科学 更多>>
马鞭草醇提物免疫活性的初步研究 被引量:12 2008年 目的:研究马鞭草醇提物对小鼠免疫功能的影响,探讨马鞭草抗感染的免疫活性机制。方法:用马鞭草醇提物20mg/kg对小鼠进行腹腔注射10天后,分别测定对照组给药组小鼠T淋巴细胞增殖能力、抗体形成细胞分泌抗体的能力、吞噬细胞的吞噬能力。结果:马鞭草醇提物对小鼠T淋巴细胞增殖能力、抗体形成细胞分泌抗体的能力具有明显的增强效应(P<0.05或P<0.01),对小鼠吞噬细胞功能则具有明显抑制效应(P<0.05)。结论:马鞭草醇提物能增强小鼠T、B细胞免疫功能和抑制小鼠吞噬细胞功能。 王文佳 王平 俞琦 韩洁 田维毅关键词:免疫活性 竹叶青蛇毒L-氨基酸氧化酶的表达载体的构建及重组蛋白抗肿瘤的研究 被引量:1 2012年 将经BamHⅠ和HindⅢ酶切的pMD18-T-LAAO和Pet28a(+)质粒的纯化回收产物进行连接,将产物Pet28a(+)-LAAO表达载体转化BL21(DE3)进行诱导表达,表达产物经Western-blot分析表明,重组蛋白能被兔抗竹叶青蛇毒L-氨基酸氧化酶(LAAO)阳性血清所识别.将鼻咽癌CNE-2Z、人宫颈癌LYA01021和卵巢癌A2780MSC细胞悬液接种小鼠建立小鼠实体瘤模型,分别用不同浓度重组蛋白接种荷瘤小鼠,根据瘤重和小鼠存活时间计算抑瘤率和对荷瘤小鼠生命延长率.结果表明:重组蛋白对低、中和高剂量组荷瘤小鼠抑瘤率和生命延长率与阴性对照组均存在极显著差异(P<0.01).本研究为开发利用竹叶青蛇毒L-氨基酸氧化酶提供依据,为进一步研制新型的抗肿瘤药物打基础. 何光志 田维毅 王安宇 王平 曹峰 黄高 王文佳关键词:重组蛋白 抗肿瘤 微生物激发子对竹黄产竹红菌素的影响 被引量:4 2014年 用竹黄(Shiraia bambusicola)寄生的竹枝、叶、根为材料分离内生菌,再通过竹红菌素的抑菌效果和发酵试验初筛发现获得的4个内生细菌和2个内生真菌的粗多糖激发子都能一定程度提高竹黄菌丝中竹红菌素的含量,其中最有效的为TT1(Trametes sp.)栓菌属真菌的激发子。在竹黄培养液中加入50μg/mL的TT1激发子可明显提高竹黄菌丝生物量和菌丝中竹红菌素含量,与对照相比竹红菌素增产约80%。 杜文 田维毅 王平 王文佳 韩洁 高小娇 曾茜 郁建平 韩燕峰 梁宗琦关键词:竹红菌素 竹黄 激发子 贵州黄花蒿内生真菌多样性及其产抗病活性物质菌株的筛选 被引量:7 2015年 为了解贵州黄花蒿植株内生真菌多样性,挖掘农作物病害生物防治新资源,采集贵州生物多样性丰富地区的黄花蒿(Artemisia annua.Linn.)植物13株,分离获得内生真菌;通过形态学和5.8S-ITS rDNA分子系统发育分析得出分类;以小麦赤霉、水稻纹枯、番茄黑斑等9种农作物病原真菌作为靶标菌,采用平板对峙法对产抗病活性物质的菌株进行筛选。结果表明:分离获得内生真菌122株,鉴定得到子囊菌门真菌共10目8科12属,担子菌门2目2科2属,接合菌门1目1科1属。共计18株(14.8%)黄花蒿内生真菌对病原菌具有较强的拮抗作用,其中以青霉属GZUCCZY0012菌株的抗病活性最为广谱,对6种病原真菌菌丝生长均具有较强的抑制作用,抑制效果为72.60%~94.86%。 曾茜 陈旭 田维毅 王平 雷帮星关键词:黄花蒿 内生真菌 抗蛔虫人源单链抗体库的构建及鉴定 2011年 目的:构建抗蛔虫人源单链抗体库,从中筛选建抗蛔虫人源特异性单链抗体.方法:分离10个患蛔虫病人的淋巴细胞,提取总RNA反转录为cDNA,PCR扩增人抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,采用SOE-PCR法将VH和VL片段随机拼接成scFv片段,并克隆入噬菌粒载体pCANTAB5E中,构建噬菌体单链抗体库.结果:初级库库容量为1.8×106,在大肠杆菌TG1中重组后得到1.6×106的次级抗体库.结论:本研究成功构建抗蛔虫人源单链抗体库,拟在为蛔虫病的预防、诊断、治疗奠定基础. 何光志 田维毅 高英 王平 王文佳 奚锦 俞琦 王乾宇 黄高关键词:蛔虫 单链抗体 葛根芩连汤对抗生素相关腹泻肠道乳酸杆菌属的影响研究 被引量:13 2016年 为了探讨葛根芩连汤对抗生素相关腹泻模型肠道中乳酸杆菌属的调理作用,运用氨苄青霉素灌胃建立巴马猪抗生素性腹泻动物模型,用葛根芩连汤进行治疗,处死巴马猪并收集不同位置的肠道内容物(包括十二指肠、空肠、回肠、盲肠和结肠)作为检测样品;通过建立定量检测乳酸杆菌属的荧光定量PCR方法,对葛根芩连汤治疗前后肠道内乳酸杆菌的动态变化进行检测。结果显示,与正常对照组相比,模型组肠道内乳酸杆菌属含量显著降低(P<0.01);与模型组相比,葛根芩连汤治疗组乳酸杆菌在各个肠段中数量明显上升(P<0.05)。长期使用抗生素会引起肠道内优势杆菌乳酸杆菌属数量明显减少;葛根芩连汤对抗生素相关腹泻模型肠道乳酸杆菌属具有调理作用。 刘茜明 杨光勇 何光志 田维毅 蔡琨 王平 黄高 梁建东 王文佳关键词:葛根芩连汤 抗生素相关腹泻 荧光定量PCR 贵州野生天麻抗真菌肽基因表达载体的构建 被引量:1 2011年 为了构建凤冈野生天麻的抗真菌肽基因(gaf)的表达载体,经BamHI和HindIII酶切的pMD18-T-gaf和pET32a(+)质粒的纯化回收产物并进行连接,连接产物pET32a(+)-gaf转化大肠杆菌感受态细胞DH5α后,采用菌落PCR、酶切鉴定和阳性质粒测序分析。结果表明:构建的凤冈野生天麻抗真菌肽基因表达载体通过菌落PCR、酶切鉴定和阳性质粒测序分析,目的片段成功插入载体,目的片段与预期的gaf基因大小(545 bp)相符。试验成功构建了贵州野生天麻抗真菌肽基因表达载体,pET32a(+)-gaf可以用来制备抗真菌蛋白。 何光志 田维毅 王平 王文佳 奚锦 愈奇 刘蕾 黄高 蔡琨 韩洁 王乾宇 刘安胜 安传伟 查高武 张鹏关键词:野生天麻 抗真菌肽基因 抗乙肝病毒人源噬菌体单链抗体库的构建及筛选 2012年 为了构建抗乙肝病毒人源噬菌体特异性单链抗体库,从中筛选抗乙肝病毒人源噬菌体单链抗体库特异性单链抗体,试验提取患者外周淋巴细胞总RNA,以总RNA为模板,通过RT-PCR技术分别扩增出H链和L链可变区基因,采用SOE-PCR方法将VH和VL片段随机拼接成ScFv片段,然后将ScFv片段克隆至pCANTAB5E载体,电转E.coil TG1,构建抗乙肝病毒人源单链抗体库,并从中筛选阳性克隆抗体。结果表明:经过5轮筛选,获得2株能与乙肝病毒抗原特异性结合的阳性克隆。说明利用噬菌体抗体技术可不经免疫制备抗乙肝病毒人源噬菌体特异性单链抗体。 何光志 田维毅 高英 王平 王文佳 奚锦 俞琦 王乾宇 黄高 蔡琨 安传伟六君子汤对幽门螺杆菌相关性胃炎小鼠血清IL-2、IL-8的影响 被引量:3 2010年 目的:观察六君子汤对幽门螺杆菌感染小鼠血清细胞因子IL-2、IL-8的影响,探讨六君子汤治疗幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori,H.Py-lori)相关性胃炎的机制。方法:60只昆明种小鼠随机分为5组:正常对照组、模型组、六君子汤大、中、小剂量组,除正常对照组外,其余各组采用灌胃造模的方法建立H.Pylori相关性胃炎小鼠模型,六君子汤大、中、小剂量组分别给予相应六君子汤灌胃治疗,其余两组给予等体积的生理盐水灌胃。2周后,心脏采血处死小鼠,观察各组小鼠胃粘膜的形态学变化,参照悉尼分类系统进行评估。血液离心取上清,采用ELISA双抗体夹心法,检测血清中IL-2、IL-8的含量。结果:各组小鼠胃粘膜炎症评分比较:模型组与其余各组,尤其是正常组和六君子汤大剂量组比较差异显著,有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。模型组小鼠血清IL-2含量下降,IL-8水平增高,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。六君子汤大剂量组IL-2水平较模型组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。六君子汤大、中、小剂量组IL-8水平较模型组降低,其中六君子汤大、中剂量组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:六君子汤通过升高H.Pylori相关性胃炎小鼠血清IL-2含量,降低血清IL-8水平,调整细胞因子间的网络平衡,改善机体免疫功能,减轻胃粘膜的炎症反应,从而发挥对胃粘膜的保护作用。 王平 王文佳 韩洁 田维毅 蔡琨 俞琦关键词:六君子汤 幽门螺杆菌相关性胃炎 白细胞介素-2 白细胞介素-8 小鼠 黄芪含药血清对幽门螺杆菌空泡毒素活性的影响 被引量:17 2011年 目的:观察黄芪含药血清能否有效抑制体外幽门螺杆菌(hel i cobact er pyl ori,Hp)空泡毒素(VacA)的活性,从而探讨其抗菌机制。方法:将HP菌株培养上清液制成粗制VacA蛋白,经倍比稀释后(1∶32~1∶1),选择1∶2滴度与不同浓度黄芪含药血清共同作用于胃癌SGC-7901细胞,观察胃癌细胞形态变化,采用中性红摄入法(NRU)评价空泡活性。结果:黄芪含药血清对VacA活性有显著抑制作用,含药血清小剂量组NRU检测其空泡活性A550=0.228±0.029,显微镜下计数空泡形成率为78.75%±8.539%,与阴性对照组比较差异有显著性(P<0.05),随血清含药浓度的增加A550和空泡形成率逐渐降低;含药血清大剂量组A550=0.127±0.047,空泡形成率为32.25%±10.21%,与阴性对照组比较差异有极显著性(P<0.01),与阳性对照奥美拉唑组比较差异无显著性(P>0.05);含药血清大剂量组与中剂量组A550比较,差异无显著性(P>0.05),与小剂量组比较差异有显著性(P<0.05),可见黄芪含药血清对空泡毒素的抑制作用具有浓度依赖性。结论:黄芪对HP VacA活性具有明显的抑制作用,且该抑制作用具有一定的浓度依赖性。 王平 田维毅 王文佳 韩洁 何光志 蔡琨 俞琦关键词:幽门螺杆菌 含药血清 空泡毒素