杜柳涛
- 作品数：25 被引量：183H指数：8
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程农业科学更多>>
- 线粒体DNA氧化损伤热点的形成及其修复速率的比较
- 2001年
- 本研究旨在探讨线粒体DNA氧化损伤热点的形成是否与该点DNA修复速率慢有关 .BRL 3A细胞暴露于 5 0mmol·L- 1过氧化氢 (H2 O2 ) 30min后 ,分别于 0 ,1,4及 2 4h收获细胞 ,应用连接介导聚合酶链反应分析线粒体DNA氧化损伤热点的修复百分率并与线粒体DNA氧化损伤的总修复百分率比较 ,通过狭缝印迹法 ,比较了各时间点细胞内p5 3/线粒体DNA比率来验证其修复的可靠性 .结果表明 :在 4及2 4h ,热点的修复速率分别为 5 .2 %和 4 2 .1% .而线粒体DNA的总修复百分率分别为 76 .9%和 84 .1% ,后者与前者相比 ,其修复速率快 1～ 14倍左右 .应用狭缝印迹发现各时间点细胞内p5 3/线粒体DNA比率无明显变化 .因此 ,线粒体DNA氧化损伤热点的形成与其修复速率较慢有关 .
- 刘力庄志雄陈雯杨杏芬张桥杜柳涛魏青邓丽霞
- 关键词：线粒体DNA修复
- 高浓度锌对雄性大鼠生殖系统的影响被引量：4
- 2002年
- 目的:探讨高浓度锌对雄性大鼠生殖系统的影响.方法:分别以12、120、240mg/kg三个剂量的硫酸锌,给大鼠灌胃染毒60天,观察大鼠生殖系统的变化.结果:各剂量组锌对雄性大鼠的生殖系统产生不同程度的影响,低、中、高各剂量组大鼠精子数目和活动度分别为(93.35±23.62)×109/L、(61.92±10.01)%;(75.20±20.26)×109/L、(56.62±11.46)%和(46.45±18.84)×109/L、(42.85±10.49)%,与阴性对照组(72.60±22.72)×109/L、(58.85±8.85)%比较,低剂量组精子活动数目和活动度显著提高,高剂量组显著降低,且有统计学意义(P＜0.05).高剂量组大鼠睾丸有较明显的病理学损伤.结论:高浓度锌对雄性大鼠生殖有损伤作用.
- 魏青杨杏芬范瑞泉杜柳涛陈铁江朱伟
- 关键词：锌精子数精子活动率生精小管
- 人DNA聚合酶β全长cDNA的克隆、鉴定及真核表达载体的构建被引量：2
- 2002年
- 【目的】克隆人类DNA聚合酶 (pol β)基因全长cDNA ,构建该基因的真核高效表达载体。【方法】抽提人胚肺纤维细胞HLF总RNA进行RT PCR扩增 ,用pGEM T载体经T/A克隆、DNA测序确定后 ,用双酶切将 pol β全长cDNA定向克隆到绿色荧光蛋白表达载体 pEGFP C1,转染大肠杆菌DH5α ,筛选阳性克隆 ,双酶切鉴定重组质粒。【结果】经RT PCR获得 1 0 3kb的产物 ,经DNA测序 ,确定所扩增片段为人类 pol β基因全长cDNA ,进而成功筛选出真核表达载体 pEGFP C1 β。【结论】成功构建人 pol β基因全长cDNA真核表达载体 。
- 杜柳涛庄志雄高昆杨杏芬何云徐雷魏青
- 关键词：DNA聚合酶Β聚合酶链反应DNA
- 重金属的肾上腺皮质毒性与机制研究 Ⅱ.氯化镉影响肾上腺皮质激素合成分泌机制的整体实验研究被引量：8
- 1999年
- 目的 研究镉对豚鼠肾上腺皮质细胞形态与功能影响的毒作用特点及可能的机制。方法选用健康雄性豚鼠以４５ μｇ／ｋｇ 和９０ μｇ／ｋｇ 氯化镉腹腔注射染毒，测定血皮质醇、醛固酮及促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ，放免法） 、血清胆固醇（ 酶联法） 、血和组织镉含量（ 原子吸收法） 和一氧化氮（ 硝酸还原酶法） 。结果 两个染镉组豚鼠血及肾上腺镉含量增加，ＡＣＴＨ 降低，呈剂量效应关系，高剂量组皮质醇略呈增高，其余波动在正常范围。肾上腺组织ＮＯ 水平降低，亦呈剂量依赖方式。结论 镉直接作用于垂体的同时可能引发肾上腺皮质应激反应，且肾上腺皮质ＮＯ 合成减低。
- 魏青杨杏芬陈铁江王充杜柳涛陈颖
- 关键词：氯化镉肾上腺皮质激素毒理学
- 几种重要DNA修复基因对化学毒性的保护机制及多态性研究
- 庄志雄唐焕文胡大林江高峰杨淋清黄海燕刘建军袁建辉胡恭华庾蕾刘起展何云朱志良陈雯任泽舫沙焱杜柳涛刘汝青王军彩杨晓华蒋友胜杨建平涂晓志叶小明
- 本研究是申请者在自己多年来主持多项国家级、省级、市级课题的基础上，总结提炼的自选项目，属于预防医学领域。 研究系列结合分子生物学实验研究与流行病学调查的方法，建立了研究DNA 修复基因功能的技术平台，构建了人类错配修复...
- 关键词：
- 关键词：DNA修复基因基因多态性
- 密闭空调环境对机体免疫功能的影响被引量：5
- 2002年
- 目的 通过作业场所职业卫生调查 ,研究密闭工作环境对人体健康的影响。方法 对 90名空调环境暴露工人和 5 4名非空调环境对照工人进行一般情况调查 ,检测血清IgG、IgM、IgA ,补体C3 、C4和溶菌酶等免疫指标 ,同时对比两组车间空气质量状况。结果 观察组空调环境中 ,甲醛、CO2 浓度及噪声强度均显著高于对照组 (P <0 0 5 ) ,负离子显著低于对照组 (P <0 0 5 )。观察组血清IgG、IgM、IgA ,补体C3 、C4均低于对照组 (P <0 0 1) ,溶菌酶差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 空调环境中负离子浓度低 ,空气质量恶化 ,可能对作业人群的免疫功能造成一定影响 ,使其有降低的趋势。
- 徐雷何云赖洪飘艾宝民杜柳涛甘德秀周炯亮
- 关键词：免疫功能负离子空气质量
- 氯化镉影响肾上腺皮质细胞分泌功能的实验研究被引量：6
- 1999年
- 目的 探讨ＣｄＣｌ２ 对肾上腺皮质细胞分泌功能、细胞［Ｃａ２ ＋ ］ｉ 调控和能量代谢的毒作用，为深入了解金属内分泌毒性机制提供依据。方法 体外分离培养原代豚鼠肾上腺皮质细胞，采用Ｆｌｕｏ － ３／ＡＭ 和Ｆｕｒａ－ ｒｅｄ／ＡＭ 联合标记、流式细胞术测定细胞［Ｃａ２＋ ］ｉ 变化，化学发光法测定ＡＴＰ 水平，ＲＩＡ 法测定培养细胞皮质醇分泌水平。结果 ①ＣｄＣｌ２ 可浓度依赖性地抑制肾上腺皮质细胞分泌皮质醇的功能，且随时间延长抑制效应愈趋明显，呈现明显的剂量效应和时间效应关系，剂量和时间对抑制效应存在交互作用；②细胞［Ｃａ２ ＋ ］ｉ 随ＣｄＣｌ２ 浓度增加而持续上升，表现出剂量效应关系。③细胞ＡＴＰ 水平随ＣｄＣｌ２ 浓度增加而降低，有明显的剂量效应和时间效应关系，而且存在交互作用。结论 一定浓度ＣｄＣｌ２ 对肾上腺皮质细胞［Ｃａ２＋ ］ｉ 调控、能量代谢和肾上腺皮质激素合成分泌具有直接毒作用。
- 杨杏芬庄志雄魏青杜柳涛赵敏陈铁江HM Shen CN Ong
- 关键词：氯化镉肾上腺皮质激素
- 中国广东汉族人群核苷酸修复基因hMTH1遗传多态性研究被引量：1
- 2005年
- 为研究中国南方汉族人群核苷酸修复基因hMTH1遗传多态性,应用聚合酶链反应 单链构象多态性技术检测172名健康人外周血白细胞hMTH1基因启动子及全部5个外显子多态性,并进行DNA测序。结果发现hMTH1基因启动子及外显子1序列保守,未见突变;外显子2第73位碱基存在T→C杂合型突变,基因型TT和TC频率分别为93 02%、6 98%,等位基因T和C频率分别为96 51%、3 49%;外显子3第45位遗传密码存在T→C杂合型突变,基因型TT和TC频率分别为95 35%、4 65%,等位基因T和C频率分别为97 67%、2 33%,该多态性为首次发现;外显子4第83位遗传密码存在G→A杂合型突变,基因型GG和GA频率分别为89 53%、10 47%,等位基因G和A频率分别为94 77%、5 23%;外显子5第119位氨基酸遗传密码存在C→T杂合型突变,基因型CC和CT频率分别为95 93%、4 07%,等位基因C和T频率分别为97 97%、2 03%。
- 江高峰庄志雄刘起展徐雷何云杜柳涛
- 关键词：基因遗传多态性聚合酶链反应单链构象多态性
- DSB修复基因hKu70反义RNA真核表达载体构建被引量：1
- 2002年
- 目的 构建人DNA双链断裂 (DSB)修复基因hKu70反义RNA真核表达载体pEGFP C1 K ,为以后的hKu70基因功能和毒理学研究提供实验材料。方法 提取人胚肺成纤维细胞 (HLF)总RNA ,逆转录酶 多聚酶链式反应 (RT PCR)扩增hKu70基因cDNA保守序列 ,经与pGEM T载体连接、筛选、克隆、抽提质粒和双酶切后 ,将纯化的hKu70基因cDNA保守序列反向插入绿色荧光蛋白表达载体pEGFP C1中 ,筛选、克隆、抽提质粒 ,从而构建hKu70基因反义RNA真核表达载体pEGFP C1 K。结果 经RT PCR获得 467bp含限制性内切酶位点的DNA片段 ,T载体克隆后经双酶切、测序 ,确定该片段为hKu70基因cDNA ,进而构建反义RNA真核表达载体pEGFP C1 K ,并双酶切 ,测序确证。结论 成功构建hKu70基因反义RNA真核表达载体pEGFP C1 K ,为建立该基因低表达细胞株。
- 刘起展庄志雄江高峰何云杜柳涛
- 关键词：DNA双链断裂修复基因真核表达载体反义RNA卫生毒理学
- hMTH1缺陷细胞株建立及生物学特性研究被引量：2
- 2003年
- 目的 建立hMTH1缺陷细胞株 ,观察该缺陷所引起的生物学效应。方法 用hMTH1基因反义RNA绿色荧光蛋白真核表达载体 (pEGFP C1 T)转染人胚肺成纤维细胞 (HLF) ,半定量RT PCR鉴定其对hMTH1基因mRNA表达的抑制效果。同时观察转染细胞生长形态 ,绘制生长曲线 ,用流式细胞术观察细胞周期 ,软琼脂培养法鉴定恶性程度。结果 pEGFP C1 T载体在转染细胞内可较稳定表达 ,缺陷细胞株hMTH1mRNA表达水平比HLF细胞下降了 47%。hMTH1缺陷细胞生长形态无明显变化 ,细胞倍增时间为 0 89d ,与HLF细胞 0 93d接近 ,细胞周期各时相未受影响 ,软琼脂培养未见细胞集落。结论 hMTH1缺陷细胞株成功建立 ,该缺陷不足以单独引起可观察的生物学效应。
- 江高峰庄志雄刘起展何云杜柳涛
- 关键词：反义RNA基因转染流式细胞术生物学特性
