石丽媛 作品数:81 被引量:214 H指数:9 供职机构: 云南省地方病防治所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 云南省应用基础研究基金 云南省科技厅科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 文化科学 更多>>
SDS-PAGE制备凝胶纯化鼠疫菌Pla蛋白 被引量:3 2008年 目的用制备电泳分离纯化鼠疫菌纤溶酶原激活因子(Plasminogen activator,Pla)。方法用距离测量的方式来定位Pla三条带的位置。结果制备电泳纯化的Pla主要由相对分子质量约31×103、35×103、37×103的三条带组成,未检测到活性。结论Pla经制备电泳分离可以达到基本纯化。 石丽媛 杨光璨 董珊珊 于国林关键词:纤溶酶原激活因子 2017年云南省剑川县鼠形动物中巴尔通体感染状况调查 被引量:3 2019年 目的调查2017年云南省剑川县鼠形动物中巴尔通体的自然感染情况。方法2017年3-7月在剑川县用笼捕法捕获鼠形动物,无菌采集其股动脉血并提取DNA,应用荧光定量PCR技术进行巴尔通体检测,对检测阳性的血液样本进行巴尔通体分离培养。结果从剑川县沙溪镇石龙村及金华镇西门社区共捕获鼠形动物372只;经荧光定量PCR检测,阳性208份,阳性率为55.91%;11种鼠形动物中有10种检出阳性,其中大绒鼠的阳性率为38.73%,齐氏姬鼠为72.49%,贝氏树鼩为7.14%,中华姬鼠为77.78%,赤腹松鼠、社鼠、褐家鼠为50.00%,大足鼠、巢鼠为100.00%;阳性样本经分离培养后获得19株巴尔通体。结论TaqMan探针荧光PCR技术是巴尔通体感染的快速诊断方法。剑川县鼠形动物中感染较高的为巴尔通体,受感染的鼠种较多,其中以齐氏姬鼠与大绒鼠较高,人群与外环境的鼠类接触存在感染发病的风险。 董珊珊 李艳苹 段存娟 郭英 石丽媛 钟佑宏 栗冬梅 王鹏关键词:巴尔通体 鼠形动物 荧光定量PCR 云南省昭通市鼠疫噬菌体分离结果分析 被引量:1 2024年 目的 调查昭通市宿主动物中鼠疫噬菌体的携带情况,对部分噬菌体进行初步鉴定。方法 2019年5月在昭通市永善、水富、绥江3个县采用鼠笼法及5 m夹线法捕获宿主动物,经鉴定采集肠道样本,采用双层琼脂平板法分离鼠疫噬菌体,对分离结果进行统计描述和分析。结果 本次调查共捕获宿主动物449只,分离到15株鼠疫噬菌体,总分离率为3.34%。有8个乡(镇)分离到鼠疫噬菌体,其中青胜乡分离率最高为16%(4/25)。不同生境、性别和年龄鼠疫噬菌体的分离率差异无统计学意义;不同种属宿主动物鼠疫噬菌体的分离率差异具有统计学意义。所分离噬菌体噬菌斑表现为3种类型,电镜下观察为肌尾病毒科噬菌体。结论 云南省昭通市存在鼠疫噬菌体,所分噬菌体为肌尾病毒科噬菌体且具有多态性。 彭海燕 钟佑宏 张海鹏 石丽媛 樊荣 刘正祥 杨丰义 邵宗体检测鼠疫抗体胶体金免疫层析试纸条的研制 被引量:5 2006年 目的建立快速、简易的检测鼠疫F1抗体的胶体金免疫层析法(G ICA)。方法(1)采用胶体金颗粒标记纯化F1抗原,并将标记物喷于玻璃纤维;同时将纯化F1抗原喷线固定于硝酸纤维素膜上,用于F1抗体的捕捉;按常规组装成检测鼠疫抗体免疫层析试纸条。(2)采用该试纸条与血凝法对同一份兔抗F1抗体进行检测,以评价该试纸条的敏感性。(3)采用该试纸条对44株非鼠疫菌的免疫鼠血清进行检测,以评价该试纸条的特异性。(4)采用该试纸条、血凝法及ELISA对607份血清标本进行检测,以评价该试纸条对现场材料的检测效果。结果(1)该试纸条可在15 m in之内完成检测;(2)在敏感性上,该试纸条对同一份免疫兔血清的检测较血凝法高一个滴度;(3)对被试的44株所选菌株的免疫鼠血清的检测均为阴性;(4)在对607份血清标本的检测中,免疫层析试纸条、血凝及ELISA三种方法的符合率中度,而免疫层析试纸条的敏感性分别比血凝与ELISA高111%和90%。结论以纯化的鼠疫F1抗原为基础建立的G ICA检测鼠疫F1抗体的方法特异性强、灵敏度高、简便快速,无需特殊仪器设备,有较大的推广应用价值。 王鹏 石丽媛 郭英 杜春红 尹家祥 黄鹏 钟佑宏 董珊珊 吴明寿 于国林关键词:鼠疫 F1抗体 分子生物学方法鉴定由自毙鼠分离的细菌 2014年 目的对1株由自毙鼠分离的细菌(X175菌株)进行属、种及型的鉴定。方法 1采用16S rDNA对X175菌株进行种属鉴定;2应用荧光PCR检测X175菌株是否存在致泻性大肠埃希菌常见毒素基因(stx1/stx2/eae、lt/st、aggR/ipaH)及大肠埃希菌O104、H4基因;3应用PCR检测X175菌株是否存在肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O104∶H4的9个毒力基因。结果 1经16S rDNA鉴定,X175菌株与大肠埃希菌埃希菌属的一些菌株相似度达99%,进化树显示X175菌株与大肠埃希菌O104∶H4菌株的亲缘关系较近;2大肠埃希菌O104基因和ipaH基因检测结果均为阳性,stx1/stx2/eae、lt/st、aggR、志贺菌/沙门菌、H4等基因检测结果均为阴性;3肠出血性大肠埃希菌O104∶H4九个毒力因子检测结果均为阴性。结论X175菌株为大肠埃希菌O104弱毒型菌株,H抗原和其他一些特性还需进一步研究。 郭英 陈双艳 石丽媛 董珊珊 王鹏关键词:大肠埃希菌 RDNA 毒力基因 鼠疫菌纤溶酶原激活因子的分离纯化 2009年 目的建立从人工培养的鼠疫菌中分离和纯化纤溶酶原激活因子(Plasminogen activator,Pla)的方法。方法分别用超声破碎、尿素提取与硫酸铵盐析相结合的方法(简称超声法、尿素法)提取Pla,并分别用离子交换、凝胶过滤两步层析相结合的高效液相色谱和制备电泳纯化Pla,对提取、纯化的Pla进行纤溶酶原激活剂活性检测。结果鼠疫菌超声破碎上清50%~60%饱和硫酸铵沉淀和尿素浸渍菌粉上清0~10%饱和硫酸铵沉淀,均获得了3条蛋白带[相对分子质量(Mr)约31×10^3、35×10^3、37×10^3]。纤溶酶原激活剂活性检测两种方法获得蛋白的溶圈直径分别为6.5、7.2mm。用高效液相色谱纯化的Pla主要由Mr约31×10^3、35×10^3、37×10^3的3条蛋白带组成,纤溶酶原激活剂活性检测溶圈直径为5.0mm。制备电泳纯化的Pla主要由Mr约31×10^3、35×10^3、37×10^3的3条蛋白带组成,条带所在位置还有其他一些低浓度蛋白存在,纤溶酶原激活剂活性检测无溶圈出现。结论超声法和尿素法可以提取到Pla,后者经高效液相色谱和制备电泳可以达到基本纯化。 石丽媛 于国林 白丽 杨光璨 董珊珊关键词:耶尔森菌 鼠疫 纤溶酶原激活剂 玉溪市家鼠鼠疫疫源地鼠疫耶尔森菌噬菌体的分离及鉴定 2024年 目的调查云南省玉溪市家鼠鼠疫疫源地宿主动物中是否携带鼠疫耶尔森菌噬菌体,并进行分离鉴定。方法2018年8月—2019年8月在新平县、峨山县、元江县和红塔区捕鼠。以鼠疫耶尔森菌(简称“鼠疫菌”)EV 76疫苗株为宿主菌,使用双层琼脂平板法进行鼠疫菌噬菌体的分离,对分离而得的部分噬菌体进行初步鉴定。并用PCR法检测鼠疫菌特异基因caf1。结果本次调查共捕获452只鼠类标本,分离到31株鼠疫菌噬菌体,总分离率为6.86%;10株分离自褐家鼠,分离率为5.56%;8株分离自黄胸鼠,分离率为6.61%;6株分离自小家鼠,分离率为10.34%;3株分离自斯氏家鼠,分离率为10.34%;3株分离自大足鼠,分离率为15.79%,1株分离自松鼠,分离率为25.00%。不同宿主动物鼠疫菌噬菌体分离率差异无统计学意义(χ^(2)=10.813,P>0.05)。4个县(区)均分离出鼠疫菌噬菌体,13个采样点中11个采样点分离出鼠疫菌噬菌体,分离率为84.62%。各采样点分离率差异有统计学意义(χ^(2)=27.505,P<0.05)。噬菌体在平板上表现出大(d≥1.8mm)、中(0.8mm≤d<1.8 mm)和小(d<0.8mm)噬菌斑;未检测到caf1基因。结论玉溪市家鼠鼠疫疫源地内存在鼠疫菌噬菌体,噬菌斑呈多态性。3株噬菌体形态符合肌尾噬菌体科特征。 彭海燕 钟佑宏 张海鹏 段存娟 苏超 石丽媛 吴鹤松一种生物安全柜实验操作专用垫 本实用新型涉及一种生物安全柜实验操作专用垫,其特征在于:包括垫子,所述垫子分三层,最上层是亲水层,中间层是吸水层,底层是防水层。本实用新型的垫子用于生物安全柜实验操作,能够接住生物安全柜中微生物溢出、泼洒有毒有害微生物,... 王鹏 钟佑宏 石丽媛 董珊珊 段存娟 张海鹏一种高通量筛选噬菌体宿主谱的方法 本发明公开一种高通量筛选噬菌体宿主谱的方法,属于噬菌体宿主谱筛选技术领域。本发明所述方法为经纯化后的噬菌体进行复壮,使效价达10<Sup>6</Sup>以上;宿主菌经适宜温度气浴振荡培养至对数生长期备用;在96孔微量培养... 钟佑宏 王鹏 杨丽华 石丽媛 董珊珊 张海鹏 谭红丽鼠疫菌pMT1质粒的序列分析研究进展 2019年 鼠疫是由鼠疫耶尔森菌(简称鼠疫菌)引起的烈性传染病。鼠疫菌质粒是鼠疫菌染色体外的遗传物质,3种常规质粒中,p MT1质粒序列变化最大,结构组成最复杂,目前对其研究相对较少。应用BLAST和Mauve软件对已有36株菌株的pMT1质粒序列比对,对鼠疫菌pMT1质粒的序列特征、基因及其功能研究分析。结果显示基因模块存在较大重排,模块排列存在较大差异,同一生物型有可能差异较大,不同生物型也有模块相似,但同一生物型较不同生物型差异相对较小;插入序列数及位置不同,部分菌株pMT1质粒序列上的毒力基因存在基因突变;一些菌株的pMT1质粒序列中含有其他菌株没有的特殊基因,以及其他功能尚不清楚的基因。对鼠疫菌pMT1质粒的序列分析研究,可以增进对鼠疫流行的认识,对疫苗开发及制定合理的防治对策具有重要意义。 安森玲 石丽媛 宋志忠关键词:鼠疫菌 基因差异