朱分禄 作品数:26 被引量:49 H指数:5 供职机构: 第二军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家杰出青年科学基金 上海市科学技术发展基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
HGV RNA转录体感染恒河猴的血清学及组织学改变 被引量:3 2002年 目的:观察接种HGV实验猴的血清学和组织病理改变,以探讨HGV对恒河猴的致病性。 方法:将庚型肝炎病毒(HGV)全长RNA转录体肝内注射感染恒河猴,检测血清HGV RNA、ALT变化和抗HGV,定期取实验猴肝组织,观察肝组织病理改变,免疫组化对HGV E2蛋白的表达进行定位分析,尸检取猴的各种脏器进行常规病理检查,并分析HGV E2蛋白在心、肝、胰、脾和肾脏的表达,PCP检测心、肝、胰、脾和肾脏中HGV正负链RNA的存在,透射电镜分析肝组织超微结构的变化。 结果:感染后1wk HGV RNA即阳转,最长持续达27wk,实验恒河猴血清ALT间歇性升高,最高达2106nkat·L^(-1),肝组织学活检呈现轻度炎性病变,尸检结果表明实验猴死于间质性肺炎,除肝组织炎症改变外,其他组织正常,免疫组化显示HGVE2蛋白主要在肝细胞质内表达,在心脏和脾脏亦有不同程度的表达,HGV基因组RNA和负链RNA的检测表明HGV在肝脏以外的其他脏器如心和脾脏中亦有复制,电镜结果表明肝细胞超微结构改变较大,肝窦内发现直径约25nm~30nm的病毒样颗粒呈晶格状排列。 结论:HGV RNA转录体有感染性并能形成病毒血症,恒河猴对HGV感染敏感,可作为研究HGV复制及致病性的动物模型。任浩,朱分禄,朱诗应,王路,戚中田,HGV RNA转录体感染恒河猴的血清学及组织学改变,世界华人消化杂志2002; 任浩 朱分禄 朱诗应 王路 戚中田关键词:恒河猴 血清学 组织学改变 庚型肝炎病毒 病理 HGV RNA基因组感染HepG2细胞的研究 被引量:2 2002年 为了观察HGV RNA基因组在HepG2细胞中的复制和表达并建立HGV感染的细胞模型,体外转录制备HGV RNA基因组,Lipofectamin介导转染HepG2细胞。取HGV RNA阳性培养上清液传代感染HepG2细胞,采用RT-PCR、免疫组化和Western blot等技术检测HGV在HepG2细胞中的复制和表达。HepG2细胞在转染后24h便可在培养上清液中检测到HGV负链RNA,传代感染的细胞及培养上清液中可检测到HGV正、负链RNA。在90d内传代20余次,均能检测到HGV的复制。免疫组化和Western blot可检测到HGV E2蛋白在感染细胞中的表达。HGV感染细胞经冻存后复苏,仍能检测到 HGV RNA。故 HGV RNA基因组能够在HepG2细胞中复制和表达,此细胞模型有可能用于HGV的复制与感染防治的研究。 任浩 朱分禄 戚中田关键词:庚型肝炎病毒 HGV HEPG2细胞 庚型肝炎病毒NS5非结构蛋白在昆虫细胞中的表达 1999年 任浩 朱分禄 朱诗应 宋燕斌 戚中田关键词:庚型肝炎病毒 RT-PCR 昆虫细胞 庚型肝炎病毒NS5非结构蛋白在昆虫细胞中的表达 2000年 目的: 研制特异的抗GBV-C/HGV抗体诊断试剂。方法: PCR扩增GBV-C/HGV NS5 基因片段并定向克隆至转座载体pFastBacHTa,转化DH10Bac感受态细胞,37℃振荡培养4 h 使发生转座,于三抗选择平皿筛选重组bacm id。脂质体介导转染sf9 细胞,将转染上清再次感染sf9 细胞,以批量表达NS5重组蛋白。利用SDS-PAGE和Western blot方法分析、检测重组蛋白。结果: 序列测定证实克隆的基因片段是GBV-C/HGV 的NS5 基因片段,且阅读框架正确。SDS-PAGE分析显示在相对分子质量4.15×104 处有重组蛋白的表达条带,薄层扫描占总蛋白量的11.7% 。Western blot 发现重组蛋白可与GBV-C/HGV RNA阳性患者混合血清发生较强的免疫反应。结论: GBV-C/HGV NS5 重组蛋白可以用于GBV-C/HGV感染的检测。 任浩 朱分禄 朱诗应 宋燕斌 戚中田关键词:庚型肝炎 GBV-C/HGV 基因表达 HCV核心区与NS3区抗原表位分析及融合基因表达 被引量:1 1997年 HCV核心区与NS3区抗原表位分析及融合基因表达逯好英徐东刚朱分禄孟文华孟庆华军事医学科学院基础医学研究所北京100850丙型肝炎病毒(HCV)核心(C)区及NS3区抗原是第二代抗-HCV抗体诊断试剂的主要组分。核心蛋白(C22)含有191个氨基酸,... 逯好英 徐东刚 朱分禄 孟文华 孟庆华关键词:丙型肝炎病毒 核心蛋白 NS3蛋白 抗原 丙型肝炎病毒的变异、分型及意义 被引量:2 1997年 丙型肝炎病毒为一单股正链RNA病毒,基因组高变异且贯穿整个基因组,表现出许多特点。根据变异可将HCV分为不同的型及亚型。丙型肝炎病毒的变异、分型对HCV的感染预防和丙肝患者的诊断与治疗均有意义。 朱分禄关键词:丙型肝炎病毒 庚型肝炎病毒的分子生物学研究进展 被引量:3 1998年 庚型肝炎病毒(GBV-C/HGV)为单股正链RNA病毒,属黄病毒家族成员。GBV-C/HGV与丙型肝炎病毒(HCV)有许多相似之处,但又有其自身特点。本文对GBV-C/HGV的基因组结构及变异、病毒多蛋白前体的加工、感染途径与致病性及检测方法等进行了综述。 任浩 朱分禄关键词:庚型肝炎病毒 分子生物学 基因组结构 庚型肝炎病毒NS3蛋白在昆虫细胞中的表达 被引量:3 2000年 The recombinant GBV-C/HGV NS3 protein was expressed in Sf9 insect cells and analyzed by SDS-PAGE. A protein band about Mr 43810 was demonstrated on polyacrylamide gel electrophoresis and this protein amounted to more than 30% of the total cell proteins. Recombinant NS3 protein was purified by Ni-NTA column. Western blot showed that this recombinant protein could react with GBV-C/HGV RNA positive mixed sera. The recombinant GBV-C/HGV NS3 protein could be used to detect GBV-C/HGV infection and will supply material for study of structure and function of this protein. 朱分禄 任浩 朱诗应 宋燕斌 戚中田关键词:GBV-C/HGV NS3蛋白 庚型肝炎 庚型肝炎病毒基因组全长cDNA克隆及其构建方法 本发明涉及生物技术领域,是庚型肝炎病毒基因组全长cDNA的克隆及其构建方法。以覆盖GBV-C/HGV基因组全长cDNA的5个较小的基因片段为起始材料,经过重叠延伸PCR、酶切、连接和转化等,完成GBV-C/HGV基因组全... 戚中田 朱分禄 邵力 何建文 潘卫 崔晓红 朱诗应 宋燕斌庚型肝炎病毒转基因小鼠的建立 被引量:1 2000年 利用受精卵原核显微注射的方法 ,产生了含有HGV结构蛋白C、E1、E2及部分非结构蛋白NS2、NS3的转基因小鼠。得到 10只founder小鼠 ,其中有 3只founder小鼠与正常小鼠交配后得到了整合有外源基因的F1代阳性小鼠。RT PCR的结果显示 ,外源基因可在founder小鼠及F1代小鼠的血液有核细胞及肝细胞内转录 ;组织病理学检查显示 ,某些转基因小鼠的肝细胞出现了水样变、脂肪变性及轻微炎性反应等病理学改变 ,但与同一品系的正常小鼠相比 。 胡卫江 戚中田 胡以平 朱分禄 李建秀 陈景山关键词:庚型肝炎病毒 转基因小鼠