上海市结核重点实验室
- 作品数：13 被引量：47H指数：4
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- 两种方法诊断梅花鹿结核病
- 2007年
- 钟志军彭广能白永平胡忠义
- 关键词：鹿结核病梅花抗生素治疗病原分离细菌培养
- 结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6融合基因的表达及其多克隆抗体的制备被引量：13
- 2006年
- 以结核分枝杆菌标准株H37Rv的基因组DNA为模板,经重叠PCR扩增获得CFP10-ESAT-6融合基因片段,克隆于pET21a表达载体中,获得了重组质粒pET21a-CFP10-ESAT-6,将其转化大肠杆菌BL21细胞,经IPTG诱导表达,得到了25 ku的目的蛋白。表达产物经纯化和定量分析后免疫新西兰大白兔,收集兔血清进行抗体ELISA检测。结果显示,成功构建了CFP10-ESAT-6融合基因的原核表达质粒,获得了CFP10-ESAT-6融合蛋白,以此蛋白免疫动物可产生高效价的抗体。
- 唐宇龙刘湘新杨华丁元生胡忠义
- 关键词：结核分枝杆菌多克隆抗体
- 检测牛分枝杆菌的噬菌体生物扩增法的建立及初步应用
- 建立噬菌体生物扩增法检测牛分枝杆菌的检测技术，将建立的方法用于22株牛分枝杆菌临床分离株及20种常见分枝杆菌及5种非分枝杆菌，同时对203头疑患牛结核病奶牛的奶样进行检测，其结果与皮内变态试验、涂片法、罗氏培养进行比较。...
- 钟志军秦莲花杨华彭广能唐明霞白永平石梅马晓平胡忠义王洁
- 关键词：分枝杆菌噬菌体牛乳噬菌体生物扩增法
- 互花米草内生真菌Fusarium sp.F4中的活性代谢物被引量：13
- 2007年
- 目的:研究海草Spartina alterniflora中内生真菌Fusarium sp.F4中的活性代谢物。方法:经硅胶、Sephadex LH-20反复柱层析分离纯化并通过波谱分析鉴定了6个化合物。结果:6个化合物分别被鉴定为麦角甾醇(Ⅰ)、过氧化麦角甾醇(Ⅱ)、白僵菌素(Ⅲ),T-2毒素(Ⅳ),ilicicolin H(Ⅴ),alcaligin(Ⅵ)。结论:化合物Ⅴ、Ⅵ为首次从该属真菌中发现。全归属了化合物V的氢谱数据。药理实验表明化合物III对结核分枝杆菌毒株(Mycorbacterium tuberculosis H37RV)有显著抑制。
- 邵志宇冯永红邓云霞徐德强洪枫
- 关键词：FUSARIUM代谢物药理活性
- 检测牛分枝杆菌的噬菌体生物扩增法的建立及初步应用
- 2007年
- 建立噬菌体生物扩增法（PhaB）检测牛分枝杆菌,将建立的方法用于22株牛分枝杆菌临床分离株及20种常见非结核分枝杆菌（NTM）及5种非分枝杆菌,同时对203头疑患牛结核病奶牛的奶样进行检测,其结果与皮内变态试验、涂片法、罗氏培养进行比较。结果表明,噬菌体工作浓度为1×10^9 PFU/mL、37℃感染2 h为最佳检测条件;杀毒剂浓度为100 mmol/L,室温作用10 min即可完全杀灭受试噬菌体;加热灭活的细菌和指示细菌不被噬菌体感染;牛分枝杆菌、耻垢分枝杆菌和22株牛分枝杆菌临床分离株检测结果均为阳性,16种NTM和5种非分枝杆菌为阴性,4种NTM（偶然、胞内、金色、草分枝杆菌）在高浓度时（〉10^5CFU/mL）检测结果为阳性;该法可检测出60-120 CFU/mL牛分枝杆菌;批内、批间变异系数均小于15%,重复性良好;203头检测奶牛中,PhaB法、涂片法、皮内变态试验和罗氏培养结果分别有14头（6.9%）、17头（8.4%）、21头（10.3%）和12头（6.0%）为阳性,PhaB法与其他3种方法比较,阳性准确性、特异性都在96%以上,敏感性在71%-100%。该法检测牛分枝杆菌具有快速、简便、灵敏、特异性高等特点。
- 钟志军彭广能唐明霞白永平石梅马晓平胡忠义王洁秦莲花杨华
- 关键词：分枝杆菌噬菌体牛分枝杆菌牛乳
- 利用焦磷酸测序技术检测结核分枝杆菌利福平耐药性研究
- 目的利用焦磷酸测序技术,建立一种高通量、快速、准确的结核分枝杆菌利福平耐药性基因检测新方法。方法应用生物素标记的引物扩增含利福平耐药突变区的 rpoB 基因片段,用链亲和素包被的磁珠分离,制备焦磷酸测序的单链 DNA 模...
- 郑瑞娟胡忠义
- 关键词：耐药基因利福平耐药结核分枝杆菌
- 噬菌体生物扩增法检测犬结核病
- 2007年
- 2006年4月12日．四川省崇州市张某将两只贵宾犬（价值80余万元）送四川农业大学兽医院就诊。病犬在成都某宠物医院按照肺炎医治16天．但效果不佳，且症状加剧。在我院经实验室检测．最后确诊为犬结核病。其中一条犬因病情严重．来我院后第3天死亡。另一疑患结核病犬采取治疗．40天后出院．3个月后随访基本恢复健康。现报告如下．
- 钟志军彭广能白永平唐明霞石梅胡忠义
- 关键词：结核病病犬噬菌体
- 检测结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6分泌蛋白双抗体夹心ELISA的建立被引量：2
- 2008年
- 用重组蛋白CFP10-ESAT-6免疫新西兰大白兔,通过ELISA方法检测抗体效价水平;高效价抗体用DEAE-32阴离子交换柱纯化后,一部分抗体为包被所用,另一部分抗体用辣根过氧化物酶标记后,作为检测用,建立双抗体夹心法,进行了初步鉴定,确定该方法的可行性。结果表明:抗CFP10-ESAT-6多克隆抗体的效价在1∶16000稀释后D450值基本都达到1.0左右,在纯化、酶标记后,分别以1∶5000为包被工作浓度,1∶3000为酶标工作浓度时,能较高特异性检测结核杆菌培养上清分泌的CFP10-ESAT-6抗原。
- 唐宇龙刘湘新杨华柳彬胡忠义
- 关键词：结核分枝杆菌ELISA
- 菌阴肺结核实验室诊断研究进展
- 菌阴肺结核由于诊断困难,极易发生漏诊、误诊。如何准确对菌阴者进行诊断和治疗是亟待解决的1个难题。近年来随着检测技术的改进和提高,部分常规检查为菌阴的患者可发现为菌阳
- 胡忠义
- 关键词：肺结核结核菌基因诊断技术
- SLC11A1基因多态性在新发和复发肺结核患者中的分布被引量：5
- 2008年
- 目的探讨SLC11A1基因多态性在中国汉族人群新发和复发肺结核患者中的分布。方法在中国汉族人群中,选择新发肺结核患者、复发肺结核患者和健康对照者各30例,应用SNaPshot SNP分型技术检测以上人群SLC11A1基因多态性位点INT4、D543N和3′UTR的基因型,采用Logistic回归分析和2χ检验进行统计学处理。结果病例组3′UTR位点TGTG+/del基因型频率显著高于对照组(P=0.038),病例组与对照组INT4和D543N位点各基因型频率无显著性差异,病例组D543N和3′UTR位点联合分析显示GG/+del及GA/+del基因型频率均显著高于对照组(P=0.048和P=0.034)。新发肺结核患者与复发肺结核患者3′UTR和D543N/3′UTR基因型频率无显著性差异。结论SLC11A1基因3′UTR位点多态性和D543N/3′UTR单倍体型可能是中国汉族人群肺结核发病的易感因素,但与肺结核复发的关系有待进一步研究。
- 刘轾彬肖和平沙巍郑瑞娟刘一典胡忠义
- 关键词：多态性结核复发
