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国家自然科学基金(39730270)
国家自然科学基金(39730270)
- 作品数：49 被引量：381H指数：12
- 相关作者：龚建平汤雪明史桂英高飞石学耕更多>>
- 相关机构：华中科技大学上海第二医科大学军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金卫生部临床学科重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 三氧化二砷对转染表达两种早幼粒细胞性白血病融合蛋白的K562细胞的影响被引量：7
- 2000年
- 目的 探讨急性早幼粒细胞性白血病的特异融合蛋白PML RARα和PLZF RARα在三氧化二砷 (As2 O3 )效应中的可能作用。方法 应用逆病毒载体转染技术建立稳定表达PML RARα(KPML)、PLZF RARα(ΚPLZF)和空载体 (KV)的K5 6 2细胞克隆。通过活细胞计数、形态学观察、流式细胞仪检测细胞DNA含量和分化抗原。应用免疫荧光分析PML RARα蛋白的亚细胞分布。结果 1 0μmol/LAs2 O3 不诱导KV 细胞凋亡和分化 ,但明显抑制其生长。在KPML和KPLZF细胞 ,As2 O3 也产生相似的生长抑制效应 ,但其效应强度明显增加。经 1 0 μmol/LAs2 O3 处理 3d时 ,KV、KPML和KPLZF的生长抑制率分别为 32 %± 3%、5 7%± 4%和 5 4%± 6 %。 1 0 μmol/L的全反式维甲酸也显示对KV 细胞克隆的生长抑制 ,但其效应明显低于As2 O3 。同时 ,全反式维甲酸的生长抑制效应在KPML的表现较KV 明显(P <0 .0 5 ) ,但在KV 和KPLZF之间差异无显著意义。此外 ,在 1 0 μmol/LAs2 O3 作用 2d时 ,KV 和KPML细胞内PML/PML RARα蛋白颗粒明显减少甚至消失。结论 PML RARα和PLZF RARα蛋白明显加强As2 O3 对K5 6 2细胞的生长抑制效应。
- 周励陈国强潘玲贾培敏朱琦蔡循余韵沈玉雷陈赛娟王振义沈志祥陈竺
- 关键词：三氧化二砷维甲酸白血病APLK562细胞
- 主要细胞周期蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系被引量：4
- 2013年
- 目的研究主要细胞周期蛋白（cyclins）在胃癌细胞中非时相表达特征，探讨主要cyclins（cyclinD1、cyclinE、cyclinA和cyelinB1）表达与胃癌临床病理特征的关系。方法采用流式细胞术双参数法半定量检测68例胃癌组织中cyclinD1、cyclinE、eyclinA和cyclinB1的表达，并结合患者的临床病理特征进行分析。结果根据不同cyclins在细胞周期中的作用及其异常表达特征，胃癌细胞中主要cyelins表达可分为I型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型和V型。根据细胞周期内cyclinE、cyclinA和cyclinB1表达特征，Ⅱ型～Ⅳ型分为a亚型、b亚型、c亚型和d亚型。68例胃癌组织中，cyclinsI型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型和V型表达分别占10．3％（7／68）、22．1％（15／68）、25．0％（17／68）、29．4％（20／68）和13．2％（9／68）。cyclins表达类型与胃癌浸润深度、淋巴结转移程度和TNM分期有关（P〈0．01）。cyelinsI型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型和V型表达的胃癌淋巴结转移率分别为26．6％、43．8％、82．3％、95．0％和100．0％，1V期患者所占比例分别为0、6．7％、17．6％、25．0％和55．6％，差异有统计学意义（P〈0．01）。cyclins表达亚型与胃癌生长方式、细胞分化程度和Bormann分型相关（P〈0．01）。结论主要cyclins在胃癌的发生、发展及转移过程中有不同形式的异常表达，其不同表达形式与胃癌临床病理特征相关。
- 李伟华吴剑宏高纯龚建平
- 关键词：细胞周期细胞周期蛋白D1细胞周期蛋白E细胞周期蛋白A细胞周期蛋白B1
- 金克诱导肿瘤细胞凋亡的细胞周期特异性定性被引量：3
- 2004年
- 体外培养的Molt 4细胞与不同浓度的金克孵育,通过Sub G1法和PA法分析细胞凋亡率及细胞凋亡的周期时相性。发现浓度为1.5g/L的金克诱导G1期Molt 4细胞18h后细胞发生明显凋亡,36h后凋亡达到最高峰。金克诱导肿瘤细胞凋亡的周期时相性的阐明有助于揭示金克的抗肿瘤机制。
- 王家顿龚建平
- 关键词：细胞周期细胞凋亡抗肿瘤机制白血病
- 三氧化二砷联合8-CPT-cAMP诱导维甲酸耐药早幼粒细胞白血病细胞分化的实验研究被引量：6
- 2003年
- 目的 了解三氧化二砷 (As2 O3 )联合 8 对氯苯硫基环腺苷酸 (8 CPT cAMP)对维甲酸(RA)耐药的急性早幼粒细胞白血病 (APL)细胞的作用。方法 以RA耐药的APL细胞株NB4 R1和NB4 R2为模型 ,通过观察细胞生长、形态、表面分化抗原以及对四氮唑蓝的还原能力的改变来研究As2 O3 、8 CPT cAMP单独和联合对细胞增殖及分化的影响 ;并应用免疫荧光和Westernblot检测药物处理前后细胞内PML RARα融合蛋白以及细胞周期调控蛋白的变化。结果 低剂量As2 O3 (0 .2 5 μmol L)与 8 CPT cAMP(2 0 0 μmol L)可协同促进NB4 R1和NB4 R2细胞分化。 8 CPT cAMP可通过影响细胞周期调控蛋白E2F和P2 1的表达而抑制细胞增殖 ,并促进As2 O3 介导的PML RARα融合蛋白降解。结论 As2 O3 联合 8 CPT cAMP能够诱导RA耐药的APL细胞分化。
- 朱琦余韵贾培敏蔡循陈赛娟陈竺王振义童建华
- 关键词：细胞分化急性早幼粒细胞白血病三氧化二砷维甲酸
- 结直肠肿瘤形成过程中主要细胞周期素D1、E、A、B1的表达被引量：1
- 2012年
- 目的观察人类主要细胞周期素[（Cyclins）D1、E、A、B1]在不同结直肠组织中的表达，探讨其在结直肠肿瘤形成、发展过程中的表达规律。方法采用流式细胞术（FCM）双参数法半定量检测30例正常结肠黏膜组织，28例结直肠腺瘤及121例结直肠癌组织中Cyclin（D1、E、A、B1）及细胞核增殖抗原（Ki一67）表达。根据不同Cyclin在细胞周期中的作用及表达特征，将其表达分为不同类型，结合临床病理学资料进行统计学分析。结果结肠黏膜底部、中间层、表层组织细胞，Cyclin（E、B1）表达阳性率及水平由高到低直至无表达，差异有统计学意义（P〈0．01）；Cyclin（E、B1）表达与细胞增殖活性（以Ki-67为指标）正相关（P〈0．05）；Cyclin（Dl、A）仅表达于底层增殖细胞，表层完全分化细胞不表达Cyclins。结直肠腺瘤组织细胞Cyclins的表达主要分3型：I型Cyclin（E、B1）低表达，Cyclin（D1、A）无表达。Ⅱ型Cyclin（E、B1）高表达，Cyclin（Dl，A）低／无表达；HI型Cyclin（D1，E，A，B1）高表达；Cyclins表达形式与结直肠腺瘤大小、病理类型及腺瘤增殖活性明显相关（P〈0．05）。结直癌细胞Cyclins异常表达大致可归为5型：I型Cyclin（D1、E、A、B1）均高表达；Ⅱ型CyclinD1低表达，Cyclin（E、A、B1）均不同形式高表达；III型CyclinDI不表达，Cyclin（E、A、B1）均不同形式高表达；1V型CyclinD1不表达，Cyclin（E、A、B1）低表达；V型Cyclin（D1、E、A、B1）均不表达。I到V型结、直肠癌淋巴结转移率、转移程度、肿瘤浸润程度及TNM分期Ⅳ期呈上升趋势，Cyclins表达类型与结、直肠癌以上临床病理因素相关（P〈0．05）。结论正常结肠黏膜细胞增殖分化过程中Cyclins（以CyclinE、B1为主）呈衰减规律性变化，可能与细胞有限增殖和定向分化的调控有关。Cyclins表达水平逐步增高可能与结直肠腺瘤的形成
- 李伟华吴剑宏高纯陈金明龚建平
- 关键词：细胞周期细胞周期素细胞核增殖抗原流式细胞术
- 榄香烯诱导HeLa细胞凋亡的实验研究被引量：36
- 2000年
- 目的从 8种抗病毒、抗肿瘤药物中筛选出诱导HeLa细胞凋亡的药物 ,并对其抗肿瘤机理进行探讨。方法应用相差显微镜、电镜和流式细胞仪等检测手段 ,证实HeLa细胞凋亡 ,并对凋亡的HeLa细胞周期变化进行分析。 结果榄香烯阻滞HeLa细胞在G2 /M期 ,降低HeLa细胞分裂能力 ,抑制其增殖 ;榄香烯抗肿瘤作用存在明显的阈值 ,即达到某一有效剂量 ,就可发挥强烈的抗肿瘤作用。 结论榄香烯是一种有效的诱导细胞凋亡的药物 ,对指导临床药物治疗宫颈癌具有重要意义。
- 马东礼肖家祁童善庆胡宝瑜侍庆胡烈薇
- 关键词：凋亡宫颈癌细胞凋亡
- 全反式维甲酸对HL-60细胞分化和凋亡的影响被引量：30
- 2004年
- 背景与目的:用全反式维甲酸(alltransretinoidacid,ATRA)治疗早幼粒细胞性白血病(premyeloidleukemia,M3)在肿瘤治疗史上是一个重要里程碑。已有研究表明,ATRA治疗白血病的机理是诱导白血病细胞向成熟细胞方向分化,然而人们对分化的肿瘤细胞最终去向还不完全清楚。本实验进一步探讨ATRA诱导HL-60细胞分化和凋亡的关系。方法:以分化诱导剂ATRA(终浓度为10μmol/L)作用不同时间的HL-60细胞为检测对象,应用流式细胞仪分析细胞表面的分化标志物及细胞周期;经碘化丙啶(propidiumiodide,PI)染色后,激光共聚焦显微镜下对已分化细胞进行形态学确认;应用流式细胞仪检测药物诱导后不同时间点的细胞凋亡。结果:(1)随着药物诱导时间的延长,被诱导的HL-60细胞体积逐渐增大,在72h后,被诱导细胞开始表达分化标志物CD11b并出现细胞核型的变化;(2)在药物诱导96h后,细胞开始出现了凋亡峰,而在药物诱导72h后脱药培养8h,则可以出现高于96h的凋亡峰。结论:ATRA并不能诱导HL-60细胞完成终端分化,但是该药可以诱导白血病细胞向成熟方向分化,而且已分化的肿瘤细胞于发生凋亡。
- 许培权龚建平
- 关键词：白血病HL-60细胞细胞分化全反式维甲酸
- 新生牛肝中低分子抑瘤物体内抑瘤作用的研究
- 2006年
- 采用离子交换柱分离分子量小于1.0 kD的新生牛肝提取液,得到9份样品.在体外抑制肿瘤细胞增殖的基础上,选用体外抑瘤明显的离子交换柱层析获得的〈5〉组分进行体内对荷S-180肉瘤小鼠的肉瘤生长抑制实验.并从白细胞数、胸腺指数和脾指数三个角度分析了低分子抑瘤物对荷瘤小鼠免疫功能的影响;同时用斑点印记法,比较荷瘤前后重要脏器和肉瘤细胞内p27/k ip1细胞周期调控蛋白表达水平的变化.实验结果表明低分子新生牛肝提取液和经离子交换柱层析分离得到的〈5〉组分对荷S-180肉瘤小鼠的肉瘤生长有明显的抑制作用,实验同时发现来源于新生牛肝中的低分子抑瘤物,可通过增强荷瘤小鼠的免疫力,升高肉瘤细胞中的p27/k ip1蛋白表达水平的方式抑制肉瘤细胞的增殖,阻碍瘤细胞向正常组织的浸润和转移.
- 李霞史文静张金红
- 关键词：低分子抑瘤物S-180肉瘤
- 维生素C增强氧化砷联用二甲萘醌诱导的U937细胞凋亡及其机制被引量：22
- 2002年
- 目的 探讨维生素C是否可增强三氧化二砷 (As2 O3 )联用二甲萘醌 (DMNQ)对白血病细胞株U937的促凋亡效应及其机制。方法 以As2 O3 、维生素C、DMNQ不同组合孵育细胞 ,采用流式细胞仪及电镜检测细胞凋亡 ,并设立各种对照。结果 维生素C可增加As2 O3 联用DMNQ(10 μmol/L)诱导U937细胞发生凋亡的比例 (不加和加用维生素C细胞凋亡率分别为 35 .2 4%和 6 1.2 0 % ) ;过氧化氢酶可逆转这一效应 ;维生素C对DMNQ(2 0 μmol/L)单独诱导U937细胞凋亡无影响。 结论 维生素C在As2 O3 存在的情况下 ,通过活性氧依赖的途径 。
- 高飞易静史桂英李慧石学耕王志伟汤雪明
- 关键词：砷剂细胞凋亡活性氧组分维生素C
- 白细胞介素18在肺癌细胞的表达及其在肿瘤转移中功能的初步探讨被引量：1
- 2003年
- 目的 检测白细胞介素18(IL-18)在肺巨细胞癌高、低转移株的差异表达,探讨IL-18在肺巨细胞癌转移中介导的作用。方法 采用半定量RT-PCR或Western blot技术,检测IL-18在肺巨细胞癌高、低转移株的差异表达;构建IL-18 cDNA的重组质粒,测序分析其序列同源性;同时把IL-18基因导入肺巨细胞癌低转移株,观察IL-18对肿瘤细胞体外转移能力和转移表型的影响。结果 同肺巨细胞癌低转移株相比,IL-18 mRNA和蛋白均只能在肺巨细胞癌高转移株检测到;从肺巨细胞癌高转移株扩增出的IL-18 cDNA序列与文献报道完全一致;此外,将IL-18基因导入肺巨细胞癌低转移株后,稳定转染株细胞可正确表达IL-18融合蛋白,且转染细胞的体外迁移能力显著上调,为空对照组的3倍左右,而上皮细胞间黏附分子E-cadherin蛋白表达显著下调,为空对照组的50％左右。结论 肺巨细胞癌高转移株可组成性表达IL-18,且IL-18可能通过下调E-cadherin表达促进肺巨细胞癌细胞的转移。
- 蒋代凤邢桂春陈筱潇邱宗荫贺福初
- 关键词：白细胞介素18肺巨细胞癌肿瘤转移真核表达
