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云南省自然科学基金(2000C0014Q)
云南省自然科学基金(2000C0014Q)
- 作品数：11 被引量：60H指数：6
- 相关作者：蔡红陈海如孔宝华张华明李小林更多>>
- 相关机构：云南农业大学云南省农业科学院更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 应用分子生物学方法检测植原体研究进展被引量：9
- 2002年
- 从血清学、核酸杂交技术以及PCR技术等方面综述了国内外植原体检测研究的概况及最新进展。
- 蔡红杨根华孔宝华陈海如
- 关键词：分子生物学植原体血清学PCR
- 仙人掌丛枝病植原体CWB1株系16SrRNA基因克隆及序列分析被引量：1
- 2001年
- 对表现丛枝症状的仙人掌植株总DNA进行植原体 1 6SrRNA基因PCR扩增 ,得到一条约 1 5kb的特异片段 ,表明植株中有植原体存在 ,将此植原体株系命名为CWB1。把此特异片段与pGEM TEasy载体连接并转化到大肠杆菌JM1 0 9感受态细胞中 ,通过PCR鉴定、限制性内切酶 (EcoRI)酶切分析及核苷酸序列分析 ,均表明克隆成功。序列分析结果显示 ,此株系的 1 6SrRNA基因全长 1 489个碱基 ,与属于植原体 1 6SrⅡ C亚组的Fababeanphyllody植原体同源率最高 ,为 99 7%。通过 1 6SrRNA基因核酸序列同源性比较 ,认为该株系属于 1 6SrⅡ C亚组 ,基本确定了其分类地位。
- 蔡红李凡孔宝华陈海如
- 关键词：仙人掌丛枝病植原体16SRRNA基因基因克隆
- 不同症状矮牵牛植株植原体16SrDNA片段的克隆及序列分析*被引量：5
- 2005年
- 应用植原体 16SrRNA基因通用引物,分别对表现矮化和扁茎症状的矮牵牛植株进行巢式PCR检测,均得到约 1. 2kb的特异片段。将此特异片段与pGEM -TEasy载体连接并转化到大肠杆菌JM109感受态细胞中,通过PCR鉴定,序列测定及同源性比较分析,结果表明:这 2个植原体株系 16SrDNA片段G+C含量分别为47. 1%和 47. 0%,具有其他柔膜菌纲原核生物 16SrRNA基因碱基组成特征;与 16Sr组中的代表株系 (西方翠菊黄化,SAY)同源率达到最高,分别为 99. 1和 98. 6%,故认为这 2个株系为该组成员之一。
- 蔡红李小林孔宝华陈海如
- 关键词：矮牵牛矮化16SRDNA序列植原体病害
- 植原体分类研究进展被引量：8
- 2002年
- 综述了植原体分类研究概况及最新进展 ,内容涉及基于生物学特性、血清学和DNA分子杂交。
- 蔡红祖旭宇陈海如
- 关键词：植原体植物病害生物学特性血清学RFLP
- 紫花苜蓿丛枝病植原体的分子检测及鉴定被引量：5
- 2007年
- 利用植原体16S rRNA基因通用引物对云南昆明发生的苜蓿丛枝病感病植株总DNA进行巢式PCR扩增,得到1.2kb的特异片段,从分子水平证实了苜蓿丛枝病的病原是植原体。从PCR产物的RFLP酶切图谱可看出,该植原体株系的酶切图谱与马里兰翠菊黄化植原体(AY1)相同。对扩增片段进行克隆及序列测定后,利用最小进化法做Bootstrap验证的系统进化树,表明苜蓿丛枝病植原体为Candidatus Phytoplasma asteris成员之一,与植原体16SrI-B亚组成员关系密切。
- 刘涛蔡红赵丹陈海如
- 关键词：巢式PCR紫花苜蓿丛枝病植原体系统进化
- 不同症状矮牵牛植株植原体16S rDNA片段克隆及序列分析
- 分别对表现矮化和扁茎症状的矮牵牛植株进行植株总DNA提取,利用植原体16S rRNA基因通过引物对R16mF2/R16mR1和R16F2/R16R2进行直接PCR及巢式PCR扩增,均得到约1.2 kb的特异片段。将此特异...
- 蔡红李凡陈海如
- 关键词：矮牵牛克隆及序列分析植原体
- 柑橘小叶病植原体的分子检测及鉴定被引量：3
- 2008年
- 对自然表现小叶的柑橘植株,利用植原体16S rRNA基因通用引物进行巢式PCR检测,得到1.2 kb的特异片段,证明此感病植株是由植原体引起.将此特异片段与pGEM-T Easy载体连接并转化到大肠杆菌JM109感受态细胞中,通过PCR鉴定、序列测定及同源性比较分析,结果表明此株系与属于16SrI-B亚组的苜蓿丛枝植原体株系(Lucerne witches′-broom phytoplasma strain,LuWB)同源率达98.88%,故认为该植原体株系属植原体16SrI-B亚组中的成员.
- 邵权蔡红陈海如
- 关键词：柑橘小叶RDNA序列植原体系统进化
- 黄槐丛枝病植原体的检测及鉴定被引量：9
- 2005年
- 应用植原体 16SrRNA基因通用引物,对自然表现丛枝的黄槐植株进行巢式PCR检测,得到约 1 2kb的特异片段,证明此植株中存在植原体。将此特异片段与pGEM TEasy载体连接并转化到大肠杆菌JM109感受态细胞中,通过PCR鉴定、序列测定及同源性比较分析,结果表明此植原体株系(STWB)16SrDNA片段G+C含量为 45 8%,与榆树黄化植原体组(Elmyellowsgroup, 16SrVgroup)中的各株系最高同源率可达 99 4%,而与其它组中的株系明显低于 97 0%,故认为该植原体株系为榆树黄化植原体组中的成员之一。
- 蔡红李小林孔宝华陈海如
- 关键词：植原体丛枝病特异片段PCR鉴定G+C含量
- 长春花黄化植株植原体株系的复合侵染
- 植原体(phytoplasma)(原称类菌原体Mycoplas-ma-like Organism,简称MLO)是一类无细胞壁,存在于植物筛管细胞内的原核生物。早期对植原体的鉴定主要是通过生物学特性,如症状特征、与昆虫介体...
- 蔡红孔宝华陈海如
- 关键词：植原体复合侵染
- 竹丛枝植原体16SrDNA片段克隆与序列分析被引量：12
- 2005年
- 利用植原体16SrRNA基因序列设计合成的引物,对表现丛枝的竹子植株总DNA进行直接PCR及巢式PCR扩增,得到长1.2kb的目的片段。将此片段与pGEMTEasy载体连接并转化到大肠杆菌DH5α感受态细胞中。通过酶切、PCR鉴定,对筛选得到的重组阳性克隆进行核酸序列测定及同源性比较分析,结果表明其与植原体16SrⅠ组中的西方翠菊黄化植原体(SAY)同源率为99%。依据16SrDNA序列建立了竹子丛枝病植原体株系的系统进化树。对云南竹子丛枝病植原体株系分类鉴定与已报道的结果相似。
- 蔡红张华明陈海如秦洋
- 关键词：分子生物学植原体
