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国家自然科学基金(30772383)
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
相关作者:
易成腊
张帆
孙旭芳
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2013
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诱导pIRES—Egr1-EGFP—Omi/HtrA2的表达对人眼脉络膜黑色素瘤细胞OCM-1凋亡的影响
被引量:1
2013年
目的诱导pIRES—Egr1—EGFP—Omi/HtrA2质粒在人眼脉络膜黑色素瘤细胞OCM-1的表达,观察其对OCM—1细胞凋亡的影响。方法设计合成pIRES—Egrl-EGFP及pIRES—Egrl—EGFP-Omi/HtrA2质粒,用Lipofectamine^TM2000脂质体法分别转染入OCM—1细胞,50μmol/L双氧水干预转染细胞后,荧光冠微镜观察两组细胞转染表达效率。Western blot检测质粒表达后Omi/HtrA2以及X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的蛋白,流式细胞仪和噻唑蓝(MTT)法检测细胞凋亡。结果构建的两组质粒分别转染入OCM-1细胞,转染pIRES—Egrl—EGFP组和pIRES—Egrl—EGFP—Omi/HtrA2组细胞在双氧水干预后表达绿色荧光细胞数均较干预前增加(P〈0.05),分别为78.9±4-7.8干预80.3±3.2,pIRES—Egt1-EGFP—Omi/HtrA2组细胞在双氧水干预后,Omi/HtrA2和XIAP蛋白的表达分别较诱导前增加53.5%和降低31.9%,差异有统计学意义(P〈0.01);细胞凋亡率显著增加,细胞凋亡数增加到[(8.19±2.13)%,P〈0.01]。结论双氧水能有效的启动pIRES—Egrl—EGFP—Omi/HtrA2质粒并诱导其下游的基因表达,引起细胞的凋亡增加,其机制与Omi/HtrA2以及XIAP蛋白表达变化相关。
余天
闫淑
张帆
易成腊
孙旭芳
关键词:
脉络膜黑色素瘤
早期生长反应基因1
OMI/HTRA2
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