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中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(xjj2011021)

作品数:1 被引量:1H指数:1
相关作者:李晨燕孙青竹钟波杨旭东吕社民更多>>
相关机构:西安交通大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
相关领域:生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇真核表达载体
  • 1篇细胞
  • 1篇克隆
  • 1篇基因
  • 1篇基因克隆
  • 1篇核表达
  • 1篇A549细胞

机构

  • 1篇西安交通大学

作者

  • 1篇韩燕
  • 1篇吕社民
  • 1篇杨旭东
  • 1篇钟波
  • 1篇孙青竹
  • 1篇李晨燕

传媒

  • 1篇细胞与分子免...

年份

  • 1篇2012
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
人PRMT1真核表达载体的构建及鉴定被引量:1
2012年
目的:构建人PRMT1基因真核表达载体,并进行表达检测及鉴定。方法:采用RT-PCR技术扩增人PRMT1全长cDNA;经过双酶切、连接等反应,构建pcDNA3.1(+)-PRMT1真核表达载体,并转化DH5α感受态细胞;用含氨苄青霉素的LB培养基筛选阳性克隆;经菌液PCR及测序鉴定重组质粒;瞬时转染A549细胞,采用实时定量PCR检测重组质粒的表达水平及PRMT1对eotaxin-1和ccr-3表达的影响。通过Western blot从蛋白水平检测重组质粒在真核细胞内的表达。结果:RT-PCR扩增的人PRMT1全长cDNA为1136 bp;所筛选出的pcDNA3.1(+)-PRMT1重组载体中插入片段与NCBI GenBank文库中人PRMT1 cDNA的序列完全一致;实时定量PCR和Western blot检测证实重组质粒在A549细胞内可高效表达;并且PRMT1与eotaxin-1和ccr-3的表达呈正相关性。结论:成功构建了pcDNA3.1(+)-PRMT1重组载体,为进一步研究PRMT1基因的作用机制奠定基础。
李晨燕孙青竹杨旭东钟波韩燕吕社民
关键词:真核表达载体基因克隆A549细胞
共1页<1>
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