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工业生物技术教育部重点实验室基金
工业生物技术教育部重点实验室基金
- 作品数:34 被引量:277H指数:10
- 相关作者:周青王武杨海麟张玲孙艳更多>>
- 相关机构:江南大学苏州科技学院福州大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划福建省自然科学基金江苏省高校高新技术产业发展项目更多>>
- 相关领域:环境科学与工程农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 甾短杆菌胆固醇氧化酶基因在大肠杆菌中的表达被引量:13
- 2008年
- 为了实现胆固醇氧化酶在大肠杆菌中的表达,将甾短杆菌Brevibacteriumsp.DGCDC-82胆固醇氧化酶基因用PCR的方法去掉信号肽序列,连接到质粒pTrc99a,通过筛选得到了表达胆固醇氧化酶的重组菌JM109/pTrc99a-COD。经IPTG诱导后表达出相对分子质量约为5.5×104的蛋白质。分别考察了诱导温度、时间、IPTG浓度等因素对重组菌表达的胆固醇氧化酶的影响。在优化条件下,该胆固醇氧化酶的酶活可以达到700 U/L。酶学特性分析表明其反应的最适pH为7.5,最适温度为40℃。
- 张玲霍惠芝沈微杨海麟邬敏辰王武
- 关键词:BREVIBACTERIUM胆固醇氧化酶原核表达信号肽
- 辣根过氧化物酶分光光度法测定黄嘌呤氧化酶的活性被引量:20
- 2006年
- 研究了以辣根过氧化物酶-苯酚- 4-氨基安替比林反应显色新体系,检测黄嘌呤氧化酶(XOD)活力的新方法.确定该酶活性测定的最佳条件为:辣根过氧化物酶(HRP) 7000 U/L,4-氨基安替比林(AAP) 1 mmol/L,苯酚(PA) 6 mmol/L,黄嘌呤(XAN) 1 mmol/L溶于50 mmol/L Tris-CL缓冲液(pH 8.4);反应温度为37℃,保温时间为20 min;检测波长为508 nm.本方法测定XOD酶活的线性范围为5.0~100.0 U/L,线性关系良好(r=0.9992),检出限为1.3 U/L.该方法操作简单易行,测定结果准确可靠.可有效应用于普通实验室和临床常规生化检测.
- 李忠琴许小平杨海麟王武
- 关键词:黄嘌呤氧化酶辣根过氧化物酶分光光度法
- 城市环境污染对人类健康的影响被引量:5
- 2005年
- 生活在城镇中的人难以躲避来自空气、饮水、食物、噪声乃至光的污染,健康受到损害。环境污染影响人体健康的特点是多因子、多介质、低剂量、长期作用。环境中任何物理的、化学的以及生物因素的改变都可以对人类健康产生影响,由此引发哮喘、过敏、心血管疾病、重金属中毒以至癌症等威胁人类健康的疾病,并使城镇人口的死亡率上升。
- 黄飚周青
- 关键词:城市环境污染空气污染噪声污染光污染重金属污染
- 环境微生物基因组学的生态学管窥被引量:2
- 2008年
- 自然界约99%的微生物不能通过传统的分离筛选途径进行培养(即未培养微生物),为获得新的基因资源,更全面地认识微生物多样性和微生物在自然环境和生物圈中的重要作用,近年来随着分子生物学的快速发展及其在微生物研究中的广泛运用,以环境中未培养微生物为研究对象的新兴学科——环境微生物基因组学成为国内外学者的研究热点。本文介绍了环境微生物基因组学的分析研究策略及生态作用:从环境样品中直接提取所有微生物的总DNA,采用适宜的载体克隆到宿主细胞中构建宏基因组文库,再筛选新的活性物质或基因;从生态学角度分析微生物不可培养的原因,可利用环境微生物基因组技术进行土壤污染修复、畜禽养殖除臭、鉴定新物种以及确定特定生态环境体系中未培养微生物种群与群落的结构组成及物种的进化模式。
- 张黎周青
- 关键词:未培养微生物基因组文库
- 环境因子对C_3植物光呼吸生态学效应研究进展被引量:2
- 2008年
- 光呼吸是C3植物体内重要的代谢过程。本文阐述了人类经济发展的同时对自然环境所产生的种种影响后果,包括CO2浓度升高、紫外辐射增加、温度变化、强光等环境因子对植物光呼吸所产生的影响,如直接或间接导致植物光呼吸速率的变化,进而在植物生理和生态上产生相关的效应。C3植物在受到环境胁迫时,可以通过光呼吸协调代谢功能,在一定程度上发挥规避环境、尤其是极端环境胁迫的效应。因此,可通过调节C3植物的光呼吸规避环境胁迫,这为光呼吸研究在环境生态学领域的拓展指出新的方向。
- 戴浩周青叶亚新
- 关键词:C3植物光呼吸环境胁迫生理生态效应
- 重组E.coli胆固醇氧化酶的分离纯化及其酶学性质研究被引量:2
- 2009年
- 对重组E.coli产生的胆固醇氧化酶采用70%硫酸铵盐析、CM Sepharose FF离子层析、Phenyl Sepharose 6 Fast疏水层析、Sephadex G-75凝胶过滤,得到的胆固醇氧化酶在SDS-PAGE上呈单一蛋白质条带,酶的纯化倍数为93,收率为21%。部分酶学性质表明:酶的最适反应温度为37℃,最适反应pH7.5,热稳定范围在40℃以下,酶的pH稳定范围为6~9,分子量分别为50 kD和52 kD。酶动力学参数Km值及Vmax分别为8.2×10-5mol/L和0.21 mmol/(L.min)。
- 钟学敏张玲孙艳杨海麟王武
- 关键词:胆固醇氧化酶分离纯化酶学性质
- 高密度培养重组大肠杆菌发酵生产胆固醇氧化酶的策略
- 2009年
- 以重组大肠杆菌发酵生产胆固醇氧化酶,依据溶解氧的变化控制底物的流加速率,实现了重组大肠杆菌的高密度培养,最高密度达85(OD600)。在此基础上确定了最佳的诱导时机为发酵中期,菌体产酶水平达.583(1.6U/L,产酶速率为971.77 U·L-1·h-1,生产强度为388.71U·L-1·h-1,实现了胆固醇氧化酶的高效生产。
- 王长城孙艳张玲王武杨海麟
- 关键词:胆固醇氧化酶分批补料
- 30种草本观赏植物对模拟酸雨的反应被引量:10
- 2007年
- 采用叶面喷洒模拟酸雨方法,研究了30种草本观赏植物对酸雨急性伤害的反应。试验结果表明,随酸雨胁迫强度增强,多数草本观赏植物叶片伤斑面积加大。当酸雨pH达2.0时,所有植物叶片均出现伤斑,其中近半数种类叶片伤斑面积>20%。30种草本观赏植物中敏感植物3种,占10.0%;抗性植物17种,占56.67%;中等抗性植物10种,占33.33%。在设定的酸雨胁迫强度(pH 2.0~3.5)下,多数植物的伤害阈值可被确定,惟有羽衣甘蓝、三色堇和葱兰在pH 2.0酸雨胁迫下仍无法确定其伤害阈值,表明此3种草本观赏植物对酸雨有极强抗性。试验表明30种受试草本观赏植物抗酸雨能力强弱与叶片细胞pH变化有关,即叶片细胞pH缓冲能力影响了酸雨对叶片的表观伤害效应。
- 张光生顾苏云胡捷周青
- 关键词:模拟酸雨
- 胆固醇氧化酶分离纯化及应用的研究进展被引量:6
- 2009年
- 综述了不同微生物所产胆固醇氧化酶的分离纯化方法及应用研究情况,重点介绍了破除乳化体系的方法,血清中胆固醇含量的检测,并针对分离纯化与应用中存在的问题提出了今后的研究方向。
- 钟学敏孙艳张玲杨海麟王武
- 关键词:胆固醇氧化酶分离纯化乳化体系
- 偶联酶催化分光光度法测定黄嘌呤被引量:4
- 2007年
- 研究了以黄嘌呤氧化酶-辣根过氧化物酶-苯酚-4-氨基安替比林反应为显色体系测定不同样液中黄嘌呤浓度的新方法。确定该测定方法的最佳反应条件为:黄嘌呤氧化酶(XO)0·32U/mL,辣根过氧化物酶(HRP)7·0U/mL,4-氨基安替比林(AAP)1mmol/L,苯酚(PA)6mmol/L溶于100mmol/LTris-HCl缓冲液(pH8·4);反应温度为37℃,保温时间为20min;检测波长为508nm。本方法测定黄嘌呤浓度的线性范围为0·2~10·0mmol/L,线性关系良好(R=0·9978),检测限为0·05mmol/L。方法操作简单易行,测定结果准确可靠,可有效应用于普通实验室和常规临床血液生化检测。
- 李忠琴邬敏辰许小平王武
- 关键词:黄嘌呤氧化酶辣根过氧化物酶酶活测定