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云南省烟草专卖局(公司)科技项目(2011YN01)

作品数:1 被引量:3H指数:1
相关作者:皮金鹏刘勇谢贺兰建强李文正更多>>
相关机构:云南省烟草农业科学研究院云南农业大学更多>>
发文基金:云南省烟草专卖局(公司)科技项目更多>>
相关领域:农业科学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇农业科学

主题

  • 1篇毒病
  • 1篇烟草
  • 1篇烟草马铃薯Y...
  • 1篇片段
  • 1篇片段克隆
  • 1篇相关基因
  • 1篇马铃薯
  • 1篇克隆
  • 1篇基因
  • 1篇PVY
  • 1篇RNAI载体
  • 1篇RNAI载体...
  • 1篇EIF4E
  • 1篇病毒病

机构

  • 1篇云南农业大学
  • 1篇云南省烟草农...

作者

  • 1篇李文正
  • 1篇兰建强
  • 1篇谢贺
  • 1篇刘勇
  • 1篇皮金鹏

传媒

  • 1篇中国农学通报

年份

  • 1篇2012
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
烟草马铃薯Y病毒病相关基因eIF4E的片段克隆及RNAi载体构建被引量:3
2012年
以在植物体内转录出RNA沉默的高效诱导因子双链RNA(dsRNA)为目标,以感病烟草品种为材料,提取总RNA,根据已报道的eIF4E基因的核苷酸序列,在保守区域和差异区域分别设计特异性引物,采用RT-PCR克隆出eIF4E基因的目的片段。将正向目的基因用XbaⅠ和ClaⅠ切下,将所得基因片段与用同样酶切开的含内含子的载体pKAN相连,取名pK-S;用同样的方法,将反向目的基因用XhoⅠ和KpnⅠ切下,所得基因片段与用同样酶切开的pK-S相连,取名pK-SA,再用NotⅠ将包括Intron和正反向基因在内的片段切下,将其定向插入同样酶切开的pART27上,获得重组质粒。以中间载体pKANNIBAL和表达载体pART27为基础,构建成以CaMV35S启动子为驱动的含有"正向eIF4E目的片段-pdkintron-反向eIF4E目的片段"的RNAi烟草表达载体,获得的载体可以应用于植物转基因抗病毒育种工程中。
皮金鹏谢贺刘勇兰建强李文正
关键词:烟草PVYEIF4ERNAI载体构建
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