国家自然科学基金(30371457)
- 作品数：25 被引量：152H指数：8
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- 相关机构：苏州大学附属第二医院南通大学苏州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 脑胶质瘤分子病因相关组织芯片CyclinB1表达及其临床意义的研究被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨CyclinB1在针对胶质瘤发生、发展相关组织芯片中的表达及意义。方法:构建针对人脑胶质瘤发生、发展分子机制研究的组织芯片,应用免疫组化EnVision法检测CyclinB1在组织芯片标本中的表达,分析其表达率及表达强度。结果:CyclinB1染色阳性表达主要位于细胞核。在71例人脑胶质瘤组织中,CyclinB1阳性表达率为52.1%,与正常成人脑组织(18.2%)比较,差异有统计学意义(χ2=5.15,P<0.05)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ级人脑胶质瘤组织CyclinB1阳性表达率分别为11.2%、44.0%、65.2%和71.4%;病理级别与CyclinB1的阳性表达率呈正相关(r=0.959,P<0.05)。两种胶质瘤细胞系多细胞球体SHG44细胞和GBM细胞的CyclinB1阳性表达率高于神经干细胞、脑肿瘤干细胞(χ2=9.60,P<0.01);人胚胎脑组织、裸鼠移植瘤和裸鼠骨髓中也呈过表达。结论:CyclinB1的表达强度能客观反映被测细胞的增殖活性,处于非增殖状态的干细胞低表达或不表达。它的高表达与肿瘤恶性程度相一致。
- 霍红梅翟德忠朱卿王爱东兰青黄强
- 关键词：组织阵列分析
- 胶质瘤分子病因研究
- 2006年
- 随着高通量分子生物技术的完善,寻找胶质瘤确切的分子病因成为可能。在基因工程鼠模型制作过程中发现了多个癌基因和抑癌基因的敲除、转入或转染后发生了类似人类的恶性浸润性胶质瘤,但所谓的“癌前期变”的责任分子尚未明确。胶质瘤干细胞的研究成功和迅速发展为之开拓了新途径。胶质瘤干细胞、神经干细胞和正常胶质细胞三者间能否转化、转化条件的探索是当今研究的胶质瘤分子病因的新策略。在神经干细胞向胶质瘤干细胞演变过程中寻找上述的责任分子是研究者看好的新途径。
- 黄强
- 关键词：胶质瘤胶质瘤干细胞神经干细胞分子病因
- 细胞周期蛋白依赖性激酶cdc2与恶性肿瘤发生发展的研究被引量：17
- 2006年
- cdc2在细胞周期调控中起着调控G2至M期的作用。在G2期后期,cyclinB与cdc2结合,形成有丝分裂促进因子(MPF),再由cdc25、cyclin H、cdk7等一些磷酸酶和激酶作用,使其激活,活化的MPF通过cdc2对细胞核内组蛋白H1、核纤维层蛋白A、B、C、核仁蛋白nucleolin等蛋白发生直接或间接磷酸化作用,从而诱导产生一系列变化,使细胞发生有丝分裂。cdc2的过度表达或缺乏,可使细胞周期进程发生紊乱,不能正常生长、分化。cdc2过表达往往导致细胞恶性增殖,形成肿瘤。现已证明cdc2过度表达与许多恶性肿瘤的发生、发展、预后有关,但与神经干细胞、胶质瘤干细胞之间的关系尚待阐明。
- 翟德忠黄强
- 关键词：肿瘤细胞周期
- survivin基因RNAi逆转录病毒载体设计与构建方法实验研究被引量：9
- 2005年
- 目的 设计和构建survivin基因的表达si RNA逆转录病毒重组载体,探讨胶质瘤分子病因及用于基因治疗的可行性。方法 利用在线软件si Direct设计干扰survivin基因靶序列,合成回文DNA序列退火后克隆至线性化p SUPER质粒载体,重组质粒载体双酶切电泳鉴定和测序分析,再转染phoenix细胞产生病毒转染低分化SHG4 4 - 9胶质瘤细胞株。利用NIH3T3细胞测定病毒滴度。Western blot测定转染后SHG4 4 - 9细胞survivin表达量。结果 p SU PER表达si RNA重组质粒载体经双酶切电泳鉴定和DNA测序分析,证实插入6 0 bp序列与原序列一致,位置正确。测定p SUPER.retro- S1、p SU PER.retro- S2病毒滴度值分别为5 .5×10 5CFU/ m l和5 .75×10 5CFU/ ml,干扰效率分别为70 .5 %和接近10 0 .0 %。结论 survivin基因的表达si RNA逆转录病毒重组载体的构建成功,不但为研究胶质瘤分子病因和基因治疗提供了有用工具,而且也为研究高表达survivin的其它肿瘤构建了新的平台。
- 程序曲王金鹏黄强王爱东董军兰青
- 关键词：RNAISURVIVIN逆转录病毒载体胶质瘤
- 神经干细胞与脑肿瘤发生被引量：2
- 2004年
- 随着神经干细胞、脑肿瘤干细胞研究的深入,脑肿瘤起源于神经干细胞得到越来越多证据的支持,而传统的脑肿瘤起源及发生模式受到了前所未有的挑战。脑肿瘤神经干细胞起源学说一经证实,必将对脑肿瘤的基础研究和临床治疗指明新的方向,并带来突破性的进展。
- 黄强张全斌
- 关键词：神经干细胞脑肿瘤肿瘤干细胞
- 胶质瘤起源细胞与分子病因研究被引量：7
- 2005年
- 神经干细胞和胶质瘤干细胞的研究成功,对早有定论的胶质瘤起源细胞学说发出了挑战。在胶质瘤细胞中,为数不多的干细胞是生成肿瘤的细胞已经证实,但肿瘤干细胞是否起源于神经干细胞仅仅只是推测。两者间的分子关系是研究的切入点,推测调控分子就是胶质瘤发生的分子病因。
- 黄强王爱东张全斌董军兰青
- 关键词：病因研究源细胞胶质瘤细胞胶质瘤发生细胞学说调控分子
- 起源细胞分化障碍与胶质瘤发生的分子关系被引量：16
- 2005年
- 朱玉德黄强
- 关键词：干细胞
- 人脑胶质瘤干细胞SHG-44s的克隆及初步鉴定被引量：52
- 2005年
- 目的:探讨人脑胶质瘤体外细胞系中存在肿瘤干细胞的可能性。方法:将SHG44细胞系和SHG44-9细胞株,分别应用含血清培养基(DMEM+10%FCS)和无血清培养基(DMEM/F12,添加bFGF、LIF和EGF)培养。用CD133免疫磁珠分离干细胞、Hoechst33342和NESTIN流式细胞仪、Nestin、NSE、GFAP免疫细胞化学染色检测肿瘤干细胞及其分化细胞。结果:CD133磁珠分离得到的干细胞的比例:在血清组SHG44和SHG44-9分别为0.021%和0.035%;无血清组分别为1.2%和2.3%。而Hoechst33342和CD133标记后流式细胞仪检测干细胞比例:血清组中SHG44、SHG44-9分别为1.5%、0.37%;无血清组分别为16.4%和29.1%。并且这些细胞能够增殖和分化成神经元和胶质细胞。而Nestin标记后SHG44、SHG44-9中分别有51.05%、77.53%阳性细胞。结论:体外长期传代培养的人脑胶质瘤细胞系中存在肿瘤干细胞SHG44s,CD133磁珠和Hoechst33342流式细胞仪分离和检测胶质瘤干细胞是行之有效的方法,而Nestin+细胞是干细胞分化后的祖细胞或前体细胞,不能作为分离和检测干细胞特异性标记物使用。
- 王金鹏黄强张全斌董军朱玉德王爱东兰青
- 关键词：肿瘤干细胞胶质瘤流式细胞仪免疫细胞化学
- CDC2敲低治疗人脑胶质瘤的实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的提供CDC2作为胶质瘤发生发展相关新分子的实验依据。方法构建针对目的基因的shRNA逆转录病毒表达载体；对体外培养的人脑胶质瘤细胞及其裸小鼠移植瘤进行转染，观察与目标基因相关的表型变化；荧光实时定量PCR检测mRNA表达，Western印迹检测蛋白表达；流式细胞仪检测细胞周期和凋亡的变化。结果shRNA表达载体使人脑胶质瘤细胞株SHG44CDC2的mRNA、蛋白表达显著下调，同时出现了明显的细胞G2／M期阻滞，细胞生长抑制，凋亡增加。裸小鼠皮下移植瘤明显缩小；肿瘤颅内移植裸小鼠生存期明显延长。结论CDC2基因过表达是胶质瘤发生发展病因分子之一，敲低其表达可使肿瘤的恶性增殖得到控制。
- 陈骅黄强董军翟德忠王爱东兰青
- 关键词：神经胶质瘤CDC2RNA干扰基因治疗
- 胶质瘤治疗的靶分子CDC2RNA干扰的体外实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的探讨抑制细胞周期依赖性激酶CDC2基因对人脑胶质瘤细胞生长的影响．并为其作为胶质瘤发生发展相关基因在胶质瘤治疗方面的应用价值提供实验依据。方法利用本实验室基因重组构建的CDC2shRNA逆转录病毒表达质粒对体外培养的人脑胶质瘤细胞进行转染。倒置显微镜观察细胞形态和数量变化；RT-PCR及荧光实时定量PCR检测CDC2mRNA表达：Westemblot检测CDC2蛋白表达；流式细胞仪检测细胞周期和凋亡的变化；透射电子显微镜观察细胞超微结构。结果人脑胶质瘤细胞系U251在转染针对CDC2的shRNA逆转录病毒表达质粒48h后，贴壁生长的细胞逐渐漂浮，细胞生长受到抑制，CDC2mRNA下调均达98％以上．蛋白表达下调达92％以上，同时出现了明显的细胞G2／M期阻滞．细胞凋亡由0．57％上升到13．01％．并且超微结构受损明显。结论CDC2shRNA逆转录病毒表达质粒介导的RNA干扰能有效的抑制U251细胞的增殖．CDC2可作为胶质瘤基因治疗靶分子作进一步研究。
- 李骥腾黄强陈骅王爱东董军兰青
- 关键词：神经胶质瘤CDC2RNA干扰
