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拟南芥rd29A启动子在不同胁迫下GUS活性分析被引量：3: 2019年; 通过特异PCR扩增技术,以拟南芥基因组DNA为模板,克隆了rd29A基因上游1 600 bp的胁迫诱导型启动子序列。将此1 600 bp的调控序列与GUS基因连接构建植物表达载体pBI101-rd29A-GUS,并用农杆菌介导法转基因拟南芥。定量PCR结果显示,干旱胁迫下转基因纯合株系中rd29A显著上调表达。GUS组织化学染色及GUS定量分析结果表明,在ABA、甘露醇和NaCl等胁迫处理下,GUS活性增强,尤其是ABA胁迫处理。说明rd29A启动子可以增强逆境下GUS基因的表达,可作为一种诱导型启动子应用于提高作物抗逆性的基因工程研究中。; 柳娜杨文雄王世红张雪婷杨长刚; 关键词：RD29A NACL 甘露醇

黄芩查尔酮合酶基因内含子在转基因烟草中对GUS活性调控的初步研究被引量：3: 2011年; 目的:通过对黄芩查耳酮合酶基因内含子区域分析,初步分析其功能。方法:设计特异引物克隆黄芩查耳酮合酶内含子,并通过生物信息学方法预测其顺式作用元件组成;将内含子插入植物表达载体pCAMBIA1301中,转化烟草后观察GUS在各种非生物胁迫下的活性。结果:在查耳酮合酶内含子中预测了7种顺式元件;黑暗及高温条件下,GUS活性先上升(3h),后降低(9 h);10%PEG处理条件下,GUS活性上升;ABA及MeJA对GUS的表达的调节作用不明显。结论:黄芩查尔酮合酶基因内含子可能参与了外界环境对黄芩有效成分的调控。; 伍翀黄璐琦袁媛张楠林淑芳; 关键词：黄芩

抗冻蛋白-GUS基因诱导性融合表达载体转化烟草植株中GUS活性测定被引量：4: 2006年; 把修饰合成的带有甘薯信号肽序列的抗冻蛋白成串基因与β-葡萄糖醛酸苷酶(GU S)报道基因融合克隆在大豆热休克启动区下游构建了温度诱导型双元载体pBF 04,三亲株配对法转化根癌农杆菌,叶盘法导入烟草,获得了转基因烟草植株.将10株转基因烟草放置在40℃诱导不同时间,利用荧光光度分析法测定水解液中GU S活性,结果诱导18、24、48小时的4株中GU S活性明显高于对照组和诱导6、12小时组,说明我们修饰合成的抗冻蛋白与GU S基因融合构建的载体在热休克启动区控制下可以诱导表达.经组织化学法测定这些阳性植株的叶片和茎段切片细胞间隙显示GU S活性,提示甘薯信号肽可能起作用.; 王文艳达来; 关键词：抗冻蛋白转基因烟草

通过花萼管注射法获得转基因花生研究初报 I.部分后代叶片Gus活性分析被引量：2: 1999年; 对Ｇｕｓ和牛酪蛋白嵌合基因注入花生栽培种花萼管获得的３株后代叶片Ｇｕｓ活性作了荧光测定。结果表明，其中１株呈强Ｇｕｓ活性，证明Ｇｕｓ基因已成功转入花生并获得表达。; 王传堂赵双宜苗华荣李正超徐建芝; 关键词：花生转基因 GUS活性

烟草花粉发育过程及不同组织中的内源GUS活性被引量：4: 1995年; 以 X- gluc作为葡糖苷酸酶 ( GUS)酶反应底物 ,用酶组织化学方法检测了烟草 ( Nicotianatabacum L.)不同组织细胞的内源 GUS。在幼苗的根、茎、叶不同发育时期的花药壁、柱头、胚珠分离的生殖细胞和胚囊中 ,均未检测到内源 GUS活性。不同发育时期的烟草花粉内源GUS活性存在差异 ,在小孢子分裂前后和成熟花粉萌发前后有两个活性高峰。检测花粉内源GUS活性的适宜 p H为 5 .0 ;p H7.0的条件下未检测到内源 GUS。用 2 0 %甲醇或 0 .2mmol/L葡糖二酸内酯处理不能完全抑制内源; 施华中杨弘远周嫦; 关键词：花粉烟草发育

大豆内源的类GUS活性(英文)被引量：1: 1991年; Jefferson等(1986)提出用β—葡糖苷酸酶(GUS)基因作为基因整合的标志基因。本文用组织化学和荧光定性等方法分析,检验大豆及基野生种(Soja)种子和植株内的类GUS活性。组织化学分析结果表明,栽培大豆的成熟植株和幼苗叶片以及野生种的幼苗叶片均表现为阴性反应。而不同发育时期未成熟豆荚的4个部分(荚皮、种皮、胚乳、胚)都表现强的组织化学着色反应。栽培品种和Soja种的成熟种子的子叶、胚芽、下胚轴、胚根也表现阳性反应。维管束较其周围组织表现出更强的着色反应。大豆类GUS活性存在于成熟干种子的任何部分。着色的深度在种子萌发初期增加,到4天后则迅速下降,到第10天,幼苗的任何部分不再呈现阳性反应。未成熟胚表现强的类GUS着色反应,但在培养1～2天后着色反应消失。定性荧光分析结果表明,各发育时期的大豆种子均表现阴性反应但反应强度不及阳性对照,而阴性对照无反应。用标准的ELISA(依丽沙)方法分析结果表明,所有阳性对照的细胞具有抗GUS活性,而所有样本均无抗GUS活性。这表明大豆种子及其组织内的控制类GUS活性的蛋白质与大肠杆菌的GUS酶没有抗原相似性。因此,在转基因大豆植株里分析大肠杆菌的GUS活性反应是可能的。; 胡青野Ching-yeh HuPaula P.CheePaul D.Miller; 关键词：大豆 GUS 活性

葡萄VvAGL12基因启动子克隆及表达活性分析: 2024年; MADS-box家族是植物最大的转录因子家族之一,在参与逆境胁迫与调控开花应答中具有重要作用,其AGL12-like亚组在葡萄中的功能尚不清楚。从黑比诺葡萄基因组克隆获得VvAGL12启动子(proVvAGL12),对启动子序列元件进行分析,发现该启动子区域存在多种与逆境胁迫相关的顺式作用元件。构建proVvAGL12驱动的GUS表达载体,并在拟南芥和烟草中进行转化,发现proVvAGL12启动子片段在拟南芥中具有启动活性,其驱动GUS在转基因拟南芥植株的叶片、茎段、花器官、根、果荚部位表达,表达活性可持续整个生长周期。转基因拟南芥和烟草胁迫处理实验表明,proVvAGL12驱动的GUS活性受赤霉素、脱落酸、聚乙二醇和低温调控。; 姜宁王雪婷王春楠曲日涛郭俊娇张娟于春燕; 关键词：葡萄启动子克隆 GUS活性非生物胁迫

菜用大豆GmDi19-3启动子对盐胁迫和外源ABA、MeJA的响应被引量：2: 2024年; 为阐明菜用大豆GmDi19-3启动子的调控功能,分析了GmDi19-3的盐胁迫诱导性、外源植物生长调节剂信号诱导性和组织表达特异性,克隆获得GmDi19-3启动子序列并分析其顺式作用元件组成,构建Gm Di19-3启动子融合GUS报告基因表达载体并在拟南芥中稳定表达,检测启动子在转基因植株中的活性。GmDi19-3呈现典型的盐胁迫和外源ABA、MeJA信号诱导表达特性,GmDi19-3启动子区域包含逆境胁迫及激素诱导表达元件。GUS组织染色和活性检测显示,GmDi19-3启动子具有活性,在叶片、茎和根中明显表达,盐胁迫及外源ABA和MeJA信号能显著诱导GmDi19-3启动子活性增强。这些研究结果表明GmDi19-3启动子在菜用大豆盐胁迫和外源ABA、MeJA信号应答过程中发挥重要作用。; 冯志娟刘娜张古文卜远鹏王斌龚亚明; 关键词：菜用大豆启动子 GUS活性盐胁迫 MEJA

花生干旱诱导型启动子Ah MYB44-11-Pro的克隆与功能分析: 2024年; 干旱是严重威胁我国花生产量与品质的主要环境因素之一。为阐明干旱胁迫响应基因AhMYB44-11的调控机制,揭示其启动子的功能,本研究从花生基因组中扩增获得该基因的启动子序列AhMYB44-11-Pro,分别构建全长及5'端部分缺失启动子的GUS融合表达载体,利用农杆菌介导的遗传转化体系,分析启动子的活性和表达模式。结果显示,相比于同源基因AhMYB44-01的启动子,AhMYB44-11-Pro具有更多的MBS、Myb-bindingsit等响应干旱胁迫的顺式作用元件;同时其拟南芥转基因阳性植株经脱水处理后GUS染色加深,GUS酶活性显著增加;表明启动子的活性受干旱胁迫诱导表达,证实AhMYB44-11-Pro是一个干旱诱导型启动子。此外, AhMYB44-11-Pro含有种子胚乳特异表达元件和赤霉素响应元件, GUS染色显示在角果发育过程中其活性呈上调趋势,由此推测AhMYB44-11可能在种子发育尤其是干物质积累过程中发挥重要作用。本研究结果将为全面解析AhMYB44的生物学功能奠定基础,也为作物抗旱遗传改良提供参考依据。; 刘永惠沈一沈悦梁满沙琴张旭尧陈志德; 关键词：花生启动子干旱胁迫 GUS活性

普通烟草外向整流Shaker K^(+)通道NtSKOR1的组织表达分析: 2024年; 外向整流Shaker K^(+)通道SKOR(Stelar K^(+)outward rectifier)是一类定位于植物根部中柱细胞质膜的外向整流Shaker K^(+)通道。为探究普通烟草NtSKOR1的启动子活性和不同时期组织表达情况,克隆该基因上游2439 bp的启动子序列,创制启动子驱动β-葡萄糖苷酸酶基因(GUS)的烟草材料并进行组织化学染色,通过RT-qPCR验证该基因的表达。结果表明NtSKOR1启动子含有光响应、逆境胁迫和激素等相关的顺式作用元件;转ProNtSKOR1::GUS烟草的组织化学染色试验表明:萌发期至子叶展平期未检测到GUS活性;小十字期,在真叶叶脉和茎尖分生组织开始检测到GUS活性;生根期,除茎和叶脉的维管组织外,在根部维管组织也开始检测到明显GUS活性,且活性随烟株生长而逐渐增强;盛花期,主要在烟草的根、茎和叶脉维管组织检测到活性,且上部叶叶脉中的GUS活性高于下部叶叶脉。RT-qPCR与GUS活性检测结果基本一致。综上可知,NtSKOR1主要在烟草小十字期及后续发育阶段的根、茎、叶的维管组织中表达,烟草进入盛花期后,该基因在光合作用较强的上部叶中的表达高于下部叶,推测该基因可能参与烟草K^(+)转运和同化产物协同运输。; 农童嘉徐方正袁佳苹向海英王学瑛袁光OLUWASEYI Setonji Hunpatin崔萌萌宁扬王倩戴培刚; 关键词：GUS活性烟草

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