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利用正向重复片段的GUS报告基因检测DNA双链断裂引起的基因重组研究
2018年
本研究建立了一种方便快捷地检测DNA双链断裂引起的基因重组的方法。传统的检测DNA双链断裂的方法较为复杂、繁琐。因此,构建简单、快速的此类检测技术是非常必要的。本研究构建了利用正向重复片段的GUS基因载体以及引导RNA和噬菌体MS2外壳蛋白偶联限制性核酸内切酶的基因组编辑系统,在GUS基因内部DNA重复区切割DNA,导致双链断裂(double-strand breaks,DSBs),DSB经同源序列引导修复(homology-directed repair,HDR)途径,引起GUS基因重组,恢复其功能。此方法可以经过GUS染色后快速、直观地检测位点特异的DSB。通过GUS与其底物的反应,以达到半定量、直观快速检测DSB的目的。
鲍岳张俊华苏振华曹雪松
关键词:GUS基因DNA双链断裂GUS染色基因重组
GUS报告基因的转基因材料的PCR检测引物及检测方法
本发明提供一对用于检测含GUS报告基因的转基因材料的PCR引物,是根据GUS基因序列设计的一对引物,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1和2所示,该对引物不仅能通过传统定性PCR方法检测转基因材料中的GUS报告基因片段(...
黄培劲安保光李亚梅陈思兰欧阳超
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GUS报告基因的转基因材料的PCR检测引物及检测方法
本发明提供一对用于检测含GUS报告基因的转基因材料的PCR引物,是根据GUS基因序列设计的一对引物,其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1和2所示,该对引物不仅能通过传统定性PCR方法检测转基因材料中的GUS报告基因片段(...
黄培劲安保光李亚梅陈思兰欧阳超
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水稻Os05g0442400基因启动子分析以及由Os05g0442400基因启动子引导GUS报告基因在转基因水稻中的表达
2013年
采用Plant CARE和PLACE软件分析预测水稻Os05g0442400基因启动子序列中可能存在的顺式作用元件.结果显示,在起始密码子ATG上游1500bp区域内,除了启动子基本的核心作用元件外,还存在一些与植物抵御非生物胁迫过程有关的作用元件、脱落酸应答元件、光诱导启动子作用元件、病原菌诱发因子作用元件,以及根特异性结合位点.采用根癌农杆菌介导法成功将Os05g0442400 promoter::gus构建导入"中花11"水稻.由不同组织部位GUS染液检测表明:在水稻苗期,内源Os05g0442400基因可能主要在根部表达;随着水稻生殖期的延续,水稻内源Os05g0442400基因在颖壳中的表达区域由上向下面积增大,并在抽穗后达到最大表达区域.这些结果可能与Os05g0442400基因启动子上分别存在根特异性结合位点和光诱导启动子作用元件具有一定的联系.
宋亚娥张红梅李建粤
关键词:水稻启动子顺式作用元件转基因GUS报告基因
基于gus报告基因的灵芝转化体系建立
灵芝(Ganodermalucidum)是我国传统药物中有多种治疗和保健作用的药用真菌。本课题组于2012年6月发表了灵芝基因组的研究结果,推动灵芝成为中药学研究中的首个模式药用物种。遗传转化体系平台是模式药用物种研究的...
徐志超徐江季爱加汪波孙伟宋经元孙超郭红卫胡鸢雷陈士林
关键词:报告基因GFP灵芝
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GUS报告基因在植物功能基因研究中的应用被引量:5
2008年
近十年来,植物转基因技术取得了显著的进展,许多转基因植物不断问世,其中报告基因GUS基因工程和遗传转化中发挥着重要的作用。就GUS基因的来源,GUS基因在转基因植物中的表达,GUS活性的测定方法,GUS基因基因安全评价,GUS基因应用的最新进展作了简要综述。
袁思玮黄锐之罗红兵
关键词:植物转基因基因表达
一种转基因植物GUS报告基因组化检测的改进方法
本发明涉及一种转基因植物GUS报告基因组化检测的改进方法,属于植物基因工程技术领域。该方法具体操作步骤为:A.配制GUS组化检测液:75~85mM磷酸钾缓冲液(pH7.0),1.5~2.5mMK<Sub>4</Sub>F...
张震林周宝良陈松张香桂
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一种转基因植物GUS报告基因组化检测专用试剂盒
本实用新型涉及一种转基因植物GUS报告基因组化检测专用试剂盒,属于植物基因工程技术领域。该试剂盒包括检测反应管、管盖和装有反应专用检测液的试剂瓶。其中,所述检测反应管有序排列在底板上,并与底板连为一体,所述管盖对应排列在...
张震林周宝良陈松张香桂
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一种转基因植物GUS报告基因组化检测的改进方法
本发明涉及一种转基因植物GUS报告基因组化检测的改进方法,属于植物基因工程技术领域。该方法具体操作步骤为:A、配制GUS组化检测液:75~85mM磷酸钾缓冲液(pH7.0),1.5~2.5mMK<Sub>4</Sub>F...
张震林周宝良陈松张香桂
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用无启动子的GUS报告基因捕获水稻基因启动子被引量:11
2003年
构建了嵌合质粒 p13DGUTs ,它是在Ds转座子中插入了无启动子的 β 葡萄糖醛酸酶报告基因(GUS) ,用于分离水稻基因启动子。将 p13DGUTs转化粳稻品种中花 11的胚性愈伤组织 ,获得了 4 96个转基因植株。抗性愈伤组织与转基因植株的GUS染色与PCR分析表明整合在水稻染色体上的Ds因子都发生了随机跳跃。转基因植株T0 代与部分T1代的GUS染色结果表明 ,M92转基因植株中Ds转座子整合位置上游的水稻基因启动子指导GUS基因的表达及表达的特性是可遗传的。文章对此方法在分离水稻基因启动子与基因上的应用进行了讨论。
朱英蔡秀玲王宗阳
关键词:GUS报告基因水稻

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