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一种MCD介导的DNA质粒植物瞬时转化体系及其应用
本发明公开了一种MCD介导的DNA质粒植物瞬时转化体系及其应用,该转化体系为包含以下成分的溶液:MCD纳米、plasmid DNA、Tween‑20和MES Buffer。该转化体系可以进行各种功能基因组研究,包括验证小...
张文利黄健佘林威江鹏闰永行程雪姣
转染DNA质粒到CHO细胞的脂质体及制备方法及其应用
本发明涉及生物技术领域,具体涉及转染DNA质粒到CHO细胞的脂质体及制备方法及其应用。所述脂质体包含GM1‑X、DOPE、胆固醇和叶酸衍生物,所述X为亲水接头。本发明的脂质体作为CHO转染试剂具有较高转染效率,便于放大,...
冯奇易维京刘丰赵忠颢姬成东尹欢王建琴李保霞
环状DNA质粒、其产品及在提高质粒产量中的应用
本文涉及环状DNA质粒、其产品及在提高质粒产量中的应用,具体提供了一种环状DNA质粒,其包含:(a)复制起点,(b)抗性基因,(c)不依赖rho因子的转录终止子,(d)促旋酶结合位点,和(e)多克隆位点;其中,所述抗性基...
段颖异李兆鹏王莹莹冯彬斌董艳
用于快速产生用于细胞系开发的同源重组载体的DNA质粒
本发明提供了用于将转基因DNA插入细胞中的同源重组载体。这些载体缩短了生产时间并允许容易地产生经遗传修饰的细胞。本发明允许用户使用所述同源重组载体来测试多种标签并产生纯合的经修饰细胞系。本发明可用于产生敲除细胞、产生具有...
奥斯卡·M·佩雷斯-莱亚尔
基于DNA质粒的SINV载体系统的开发与优化
近年来,病毒载体因其在基因治疗领域的广泛应用和卓越的基因传递能力,已成为研究焦点。辛德比斯病毒(SINV),作为阿尔法病毒属的一员,它以非整合性、低免疫原性、低致病性及瞬时高效的基因表达特性而被认为是具有极大潜力的基因治...
刘嘉玮
关键词:病毒载体
克罗诺杆菌DNA质粒标准样品的制备及在婴幼儿配方奶粉检测中的应用被引量:1
2023年
选取阪崎克罗诺杆菌中atpD、gyrB、infB、fusA和glnS管家基因作为靶序列,构建质粒标准样品快速检测克罗诺杆菌。通过测序和菌落聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)对构建的重组质粒进行验证,传15代后对重组质粒进行测序验证质粒稳定性。制备的atpD、gyrB、infB、fusA和glnS质粒标准样品,对其进行定性实验,并检测其检出限和稳定性,然后使用atpD、gyrB、infB、fusA和glnS质粒标准样品对婴幼儿奶粉中克罗诺杆菌进行检测。通过菌落PCR和测序结果显示atpD、gyrB、infB、fusA和glnS质粒标准样品制备成功。PCR体系对质粒标准样品检测具有特异性,atpD、gyrB、infB、fusA和glnS检出限分别为1.14×10^(6)、1.07×10^(7)、1.09×10^(7)、1.73×10^(5)、7.54×10^(5)拷贝/μL。质粒冻干粉可以在-20、4、25℃稳定保存90 d。将质粒标准样品用于23份婴幼儿奶粉样品检测,检测出1份具有gyrB管家基因。参考GB 4789.40—2016《食品微生物学检验克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验》的方法进行传统微生物分离检测,未检测出克罗诺杆菌。相较于传统方法质粒标准样品的应用极大提高了样品的检测效率。
马跃然王晖范慧霞赵红阳赵红阳卢行安郜晓峰
关键词:管家基因
类水滑石纳米载体负载DNA质粒构建及植物基因递送研究
2023年
为克服外源基因在植物遗传转化中进入细胞过程复杂,转染率低等问题,通过水热法合成了一种粒径较小、分散均一的类水滑石纳米材料基因载体(layered double hydroxide nanosheets,简称LDHs)。通过傅里叶变换红外光谱仪、透射电子显微镜、马尔文纳米粒度电位仪等对该硝酸根插层的类水滑石纳米材料进行了表征,LDHs呈现较规则的六边形层板结构、粒径为20~80 nm, zeta电位是(39.8±2.5) mV,并借助琼脂糖凝胶电泳试验发现该材料可有效地和外源基因结合,当质粒与LDHs质量比为1∶3时可被完全负载,并保护核酸分子免受脱氧核糖核酸酶DNaseⅠ的消化水解作用。通过形成纳米粒子-核酸复合体的方式,借助叶面无孔注射,将含有绿色荧光蛋白质粒DNA渗入到生长4周的野生型本氏烟草叶片中,4 d后可在激光共聚焦显微镜下清晰地观察到目的信号。表明,类水滑石有望通过不借助外力的简易方法将外源基因高效率地递送入植物体从而实现完整的基因释放及表达,展现出了此纳米材料在植物纳米基因载体方面的应用方面具备很大的潜力,对优化外源基因递送进入植物细胞进行遗传转化方面具有一定的指导意义。
孙仲旭张汉超陈龙曾章华
关键词:类水滑石基因载体植物基因工程纳米材料
一种DNA质粒提纯用磁珠吸附机构
本实用新型涉及DNA质粒磁珠纯化提取技术领域,具体为一种DNA质粒提纯用磁珠吸附机构,包括一一对应设置的磁棒及棒套,所述磁棒及所述棒套沿竖直方向通过升降驱动组件分别进行升降设置,且所述磁棒隔着所述棒套进行磁珠的吸附工作;...
丁新辉胡正义肖重洋
通过疏水相互作用色谱法改善DNA质粒制剂中RNA和污染物的去除
公开了一种用于从包含pDNA和污染物的样品制备纯化的pDNA制剂的方法,所述方法包括以下步骤:将样品与疏水相互作用色谱(HIC)材料在溶液中接触,所述溶液包含浓度能够迫使pDNA和污染物吸附在HIC材料上的共液性盐,在将...
P·S·加农R·瑟克尔尼克K·波兹克
DNA质粒提取工作站及其工作方法
本发明涉及生物技术领域,具体为DNA质粒提取工作站及其工作方法,包括提取机构及转移机构,所述提取机构用于提取样液中的DNA质粒,该提取机构通过依序对试样容器中的样液注入用于提取DNA质料的药液,并对样液进行振荡或摇液后,...
胡正义洪伟

相关作者

滕建英
作品数:22被引量:59H指数:5
供职机构:杭州师范大学医学院(健康管理学院)
研究主题:烧伤创面 细胞凋亡 动脉导管 新生血管化 真皮支架
唐黎
作品数:9被引量:0H指数:0
供职机构:华侨大学
研究主题:灵敏度 解链 常规PCR HU DNA质粒
侯丹
作品数:11被引量:0H指数:0
供职机构:华侨大学
研究主题:灵敏度 酶切位点 解链 常规PCR HU
刘兰
作品数:77被引量:145H指数:7
供职机构:中国食品药品检定研究院
研究主题:生物学活性 RHG-CSF 重组人粒细胞集落刺激因子 标准品 生物活性
刘晓
作品数:20被引量:20H指数:3
供职机构:北京林业大学
研究主题:基因导入 植物分子育种 蛋白 基因 桉树