搜索到5635篇“ DNA提取方法“的相关文章
- 适用于玉米螟虫蜕DNA提取方法的筛选与验证
- 2025年
- 【目的】新疆伊犁河谷是亚洲玉米螟和欧洲玉米螟混合发生区,采用一种对玉米螟无损伤的提取方法,高效建立纯系种群,准确分离鉴定亚洲玉米螟和欧洲玉米螟,为后期开展生物学生态学研究提供科学依据。【方法】以玉米螟虫蜕为材料,建立一套无形态特征损伤、经济适用、操作简单、快速且能满足后续PCR扩增检测技术的DNA提取方法。基于筛选试剂盒法(KM)、蛋白酶法(PM)、CTAB法(CM)等常用DNA提取方法,提取玉米螟虫蜕DNA、靶标COI序列扩增、琼脂糖凝胶检测。【结果】虫蜕有效的提取方法为处理3:蛋白酶法,其中蛋白酶法提取虫蜕的DNA浓度最高,为(23.03±0.01)ng/μL,但其纯度不高,不利于后续PCR扩增。处理3提取虫蜕的DNA浓度平均值为(8.46±0.22)ng/μL,符合提取要求,纯度较高为1.86,满足后续PCR扩增试验。【结论】处理3与蛋白酶法可以用于大批量提取玉米螟虫蜕gDNA,种群鉴定具有对玉米螟无损伤、成本低、步骤简单、避免氯仿和异丙醇伤害等优点,处理3较蛋白酶法有较高的扩增效率。
- 孙健博丁新华贾尊尊高国文付开赟吐尔逊·阿合买提安尼瓦尔·库尔班郭文超
- 关键词:玉米螟DNA提取蛋白酶法
- 一种古代牙结石的宏基因组DNA提取方法
- 本发明提供了一种古代牙结石的宏基因组DNA提取方法,属于基因工程技术领域。该方法包括样品预处理、DNA提取、纯化和质检等步骤,通过优化提取试剂和方法,能够在保持DNA完整性的同时,最大限度地减少外源污染,提高DNA提取效...
- 何海峰杨阳陶乐沈曲
- 一种可直接用于PCR的茶树组织快速DNA提取方法
- 本发明属于生物化学与分子生物学技术领域,公开一种可直接用于PCR的茶树组织快速DNA提取方法。包括以下步骤:取茶树组织样品2~10mg,碾磨植物组织,加入80~100μL提取缓冲液,继续碾磨至呈浆状,得到浆状茶树组织样品...
- 羊玉花杨子银
- 一种基于磁珠法的可去除基因组污染的血浆游离DNA提取方法
- 本发明公开了一种基于磁珠法的可去除基因组污染的血浆游离DNA提取方法,涉及游离DNA检测技术领域,具体步骤如下:步骤一、样本一步裂解结合;步骤二、清洗1:向离心管中加入清洗液1,涡旋振荡再置于磁力架上,静置待磁珠吸附完全...
- 余浩钱山山
- DNA提取用沉淀剂组合物及使用其的DNA提取方法
- 本发明提供一种有效去除阻碍微生物DNA分离纯化的物质的沉淀剂组合物及使用该沉淀剂的高浓度、高纯度DNA提取方法,具体涉及一种杂质沉淀剂组合物、使用所述沉淀剂组合物的DNA提取方法及由此提取的DNA的扩增方法,其中所述杂质...
- 安章爀金珉希全善敃阿诺达日·孟盒加日格尔
- 物体表面灰尘采集及DNA提取方法优化研究
- 2024年
- 目的 灰尘作为法庭科学极具特色和应用价值的物证,其中包含丰富的环境DNA信息,逐渐成为领域内的前沿研究热点。然而,作为办案应用中的关键基础环节,从法庭科学领域实际应用出发的物体表面灰尘的采集及DNA提取研究,仍亟待开展。方法 使用Copan Liquid Amies Elution Swab拭子擦拭物体表面采集灰尘,将采集样品管内拭子头、沉淀、上清液分别提取DNA,评估DNA含量从而选定应处理和裂解的样品管内成分。按照5种不同采样面积(25~400 cm^(2))采集灰尘样本并检测DNA浓度,确定合适的采样面积。比较3种商业化DNA提取试剂盒对灰尘样本的提取效果,并检测评估提取的灰尘DNA片段大小以及是否含人源DNA,同时通过16S rDNA扩增子测序分析物体表面灰尘DNA中的细菌信息,从而建立灰尘DNA提取产物的质量控制方法。针对DNA提取中的细胞裂解关键步骤,比较评估在不同的细胞裂解方式以及震荡裂解次数下提取DNA的量,从而建立适合灰尘DNA提取的细胞裂解方法。结果 灰尘采样管内沉淀与拭子头为DNA的主要来源部位,后续提取时均应纳入处理。灰尘的采样面积与灰尘DNA浓度呈正相关,且灰尘采样面积宜大于5×5 cm^(2)。使用DNeasy PowerSoil Pro试剂盒可以获得较高的DNA产量,同时3种DNA提取试剂盒提取的DNA片段大小无显著差异,从上述灰尘样本提取的DNA中未检出人源DNA,而物体表面灰尘DNA中含有细菌DNA,并且不同采样点之间的微生物物种组成存在差异。此外,使用生物样品均质器进行研磨裂解4 min (2 min×2次)时,得到的灰尘DNA浓度最高。结论 灰尘DNA的提取与采样面积、提取试剂盒、裂解方式均有关,建立完整且适合的灰尘DNA提取方案至关重要。这不仅为研究挖掘灰尘中的环境DNA数据打下基础,还为环境样本的实际办案应用提供了方法参考。
- 杨琪彭加金王乐卢颀梅宏成戈文东张涛季安全叶健康克莱
- 关键词:DNA提取
- 不同DNA提取方法对大曲基因组DNA提取效果及扩增子文库的影响
- 2024年
- 大曲是中国传统白酒典型的“多酶多菌”的发酵剂。免培养的分子生物学方法已经成为大曲微生物群落研究的常规方法。通过评估不同DNA提取方法对大曲基因组DNA提取效果及扩增子文库的影响,选择适合用于大曲DNA提取的最佳方法。该研究选择4种DNA提取方法分别对2种大曲进行大曲微生物DNA的提取,结合DNA提取质量、qPCR定量结果、细菌16S rRNA基因和真菌ITS基因扩增子文库的Illumina Miseq测序结果,评估大曲基因组DNA不同提取方法的效果。从DNA得率和生物量的综合分析表明,SDS-based提取法的DNA得率高于试剂盒提取法,其中原位SDS-based提取法DNA得率高达5.46×10^(4)ng/g,但DNA纯度较低;SDS-based提取法的qPCR定量结果比试剂盒提取法高10^(1)~10^(6)量级,其中洗脱加SDS-based提取法的微生物生物量最高,比原位SDS-based提取法的生物量高10^(1)~10^(3)量级;试剂盒提取法的微生物生物量最低,细菌和真菌的生物量只有10^(2)~10^(4)copies/g。扩增子文库间Shannon多样性指数的比较结果表明,不同DNA提取方法在真菌ITS扩增子文库间存在显著差异,而在细菌16S rDNA扩增子文库间差异不显著。洗脱处理样本的真菌扩增子文库Shannon指数要高于原位处理的样本。通过对扩增子文库间存在显著性差异操作分类单元(operational taxonomic units,OTU)的比较可以看出,在细菌16S rDNA扩增子文库中,多数OTUs存在丰度差异,但它们大多数能在不同DNA提取方法中检测到;然而在真菌ITS扩增子文库间,少数OTUs在不同DNA提取方法中检测不到,说明DNA提取方法对部分真菌微生物基因组的提取存在显著影响,且洗脱处理有利于真菌基因组DNA的提取。综合对比4种DNA提取方法,洗脱加SDS-based提取法最适合用于大曲微生物的定量和群落结构分析。
- 叶光斌幸洪静杨志阳宗绪岩
- 关键词:DNA提取方法大曲微生物群落
- 一种大质量土壤样品微生物基因组DNA提取方法
- 本发明涉及分子生物学技术领域,具体涉及一种大质量土壤样品微生物基因组DNA提取方法,包括向提取容器中加入土壤样品、两种不同直径的研磨珠和提取缓冲液,混合振荡,得到初步裂解液;加入SDS后加热裂解,得到二次裂解液;离心获取...
- 李红梅魏艳丽扈进冬杨翰杨凯吴远征王贻莲赵忠娟李纪顺
- 入侵植物一年蓬基因组DNA提取方法优化
- 2024年
- 一年蓬为菊科飞蓬属植物,是分布较广、危害较重的一种外来入侵杂草。为优选该植物基因组DNA的提取方法,本研究采取四因素三水平正交试验设计,对一年蓬基因组DNA的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)提取方法进行优化,并与常规的植物基因组试剂盒法进行对比。结果表明,一年蓬基因组DNA较优的提取方法为改良CTAB法,即一年蓬的干燥叶片经CTAB-free去除多糖,并加入β-巯基乙醇防止酚氧化,用氯仿∶异戊醇(24∶1)抽提3次。改良CTAB法提取的一年蓬基因组DNA质量较高,微量分光光度计检测的A_(260)/A_(280)数值接近1.8~2.0,且凝胶电泳DNA条带清晰,无明显拖带。该方法为该植物的遗传多样性和入侵机制等研究提供参考。
- 王仕文杨子琼魏淑雅丁彤顾婉如陈雨蓓屈利利童跃伟
- 关键词:菊科一年蓬DNA提取方法改良CTAB法
- 天师栗叶片DNA提取方法的建立
- 2024年
- 提取高质量的基因组DNA是开展分子生物学研究的重要前提之一。天师栗由于叶片含有较多的多糖、多酚类物质,常常导致DNA的提取质量不高,严重影响后续的分子生物学操作。本研究以树龄分别为600、50、4 a的天师栗植株的成熟叶片为材料,建立了适合于天师栗叶片DNA的提取方法(M1),并将其与3种常见植物DNA提取方法(M2~M4)进行了比较。结果表明:M1提取DNA的浓度范围介于207.19~488.98 ng·μL^(-1),平均值为308.42 ng·μL^(-1);纯度A_(260)/A_(280)比值介于1.90~1.98,平均值为1.93;A_(260)/A_(230)比值介于1.72~1.95,平均值为1.86;DNA电泳条带清晰,亮度适中,点样孔干净无污染;ISSR-PCR能扩增出条带清晰、稳定性好、多态性高的PCR产物。M1提取出的DNA在浓度、纯度、DNA条带、ISSR-PCR扩增产物方面均明显优于其它3种方法(M2~M4),适合用于天师栗叶片DNA的提取。
- 吴消潇赵千里王美娟杨思婷廖妮燕江艺蕾杜克兵
- 关键词:DNA提取
相关作者
- 章镇

- 作品数:463被引量:4,026H指数:33
- 供职机构:南京农业大学园艺学院
- 研究主题:果梅 苹果 葡萄 克隆 果树
- 殷亚方

- 作品数:222被引量:883H指数:18
- 供职机构:中国林业科学研究院木材工业研究所
- 研究主题:木材 规格材 木材树种 碳气凝胶 无损检测
- 焦立超

- 作品数:70被引量:95H指数:7
- 供职机构:中国林业科学研究院木材工业研究所
- 研究主题:木材 木材树种 木质文物 树种 饱水木质文物
- 方盛国

- 作品数:106被引量:653H指数:16
- 供职机构:浙江大学
- 研究主题:大熊猫 扬子鳄 DNA指纹图 DNA指纹 朱鹮
- 张安居

- 作品数:40被引量:259H指数:12
- 供职机构:成都市动物园
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