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- 一种保持稳定性状的小鼠骨髓树突状细胞的原代培养方法
- 本发明属于细胞培养领域,更具体地,涉及一种保持稳定性状的小鼠骨髓树突状细胞的原代培养方法。利用本发明提供的方法经过7‑8天的培养可获得足量的BMDC细胞,本发明通过采用特定的培养条件,阶梯式改变CO<Sub>2</Sub...
- 杨革薛皓文车程川刘金锋
- 胞壁酰二肽对儿童急性白血病骨髓树突状细胞体外扩增的影响
- 2024年
- 目的探讨儿童AL的治疗方法。方法采用Ficoll-Hypaque法分离AL患儿MNC,将其分为4组。对照组:以含10%FCS的RPMI1640培养液培养;实验1组:单用MDP;实验2组:rhGM-CSF+rhIL-4+rhTNF-α;实验3组:rhGM-CSF+rhIL-4+rhTNF-α+MDP。观察每日细胞生长情况及细胞形态,培养8d后计数各组细胞数量并应用流式细胞仪检测各组细胞免疫表型。结果对照组培养3 d,细胞大量死亡,数量明显减少;而实验各组在培养第2-8天均出现细胞形态的变化;实验各组细胞数及HLA-DR、CD1a、CD83细胞比例均高于对照组,以实验3组最高(P<0.05)。结论MDP对AL患儿骨髓DC有扩增作用并促其成熟,与细胞因子联合作用更强。
- 孙绍霞刘春雷王敏李晓玲
- 关键词:胞壁酰二肽树突状细胞急性白血病骨髓扩增
- β-葡聚糖对不同诱导来源的小鼠骨髓树突状细胞生物学功能的影响
- 2024年
- 目的研究在不同诱导条件下β-葡聚糖对小鼠骨髓树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells, BMDCs)活化和功能的影响。方法取小鼠胫骨和腓骨的骨髓在体外分别用FMS样酪氨酸激酶3配体(FMS-like tyrosine kinase 3 ligand, Flt-3L)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, GM-CSF)和IL-4诱导成FL-DCs、GM-DCs, 经全葡聚糖颗粒(whole glucan particles, WGP)刺激后, 流式细胞术分析FL-DCs和GM-DCs表面分子CD40、CD80、MHCⅠ、MHCⅡ、CD8α、CD11b的表达;ELISA检测细胞上清液中IL-12p40、TNF-α、IL-6、IL-10的含量;实时荧光定量PCR检测各细胞因子及趋化因子受体的mRNA水平;OT-Ⅰ、OT-Ⅱ小鼠经磁珠分选试剂盒分选出CD8+、CD4+T细胞, 加入特异性抗原卵清蛋白(ovalbumin, OVA)与FL-DCs、GM-DCs共培养, 流式细胞术检测T细胞的增殖分化情况。结果经WGP刺激后, FL-DCs和GM-DCs中CD40、CD80、MHCⅠ、MHCⅡ、CD8α的表达均显著上调(P<0.05);细胞因子IL-12p40、TNF-α的分泌显著增多(P<0.05), 而IL-6、IL-10含量在FL-DCs、GM-DCs间存在差异;实时荧光定量PCR结果显示, WGP促进GM-DCs中趋化因子受体CXCR5和CCR7的表达(P<0.001和P<0.01), FL-DCs中CCR7的改变更为显著(P<0.000 1);在两种不同的培养方式中, WGP均能促进CD4+T细胞产生更多的IFN-γ和IL-17α(P<0.05)。结论 WGP可诱导BMDCs的成熟, 提高BMDCs对效应T细胞的活化能力, 且可促使不同诱导来源的BMDCs向不同的Th细胞分化。
- 段雪含郝永哲丁骏戚春建
- 关键词:Β-葡聚糖树突状细胞免疫功能
- 一种小鼠骨髓树突状细胞诱导纯化方法
- 本发明公开一种小鼠骨髓树突状细胞诱导纯化方法,包括以下步骤:S1、小鼠骨髓细胞提取:用手术镊将股骨、胫骨保留端夹裂继续冲洗,最大限度获取细胞;S2、树突状细胞细胞培养:培养第三天保留原有培养基及细胞并加入新鲜培养基继续培...
- 鹿中华刘玲范赡文程振兴郭凤梅
- 一种保持稳定性状的小鼠骨髓树突状细胞的原代培养方法
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- 杨革薛皓文车程川刘金锋
- 硒化党参多糖对骨髓树突状细胞功能的调控及机制研究
- 硒化多糖具有增强机体免疫功能及抗氧化、抗肿瘤、降血糖和降血脂等多种药理作用,其生物活性高于硒和多糖各自的单独作用。本试验先以水提醇沉法提取党参粗多糖,TCA除蛋白,DEAE-52、G-200分离提纯,后采用硝酸-亚硒酸钠...
- 景丽荣
- 关键词:树突状细胞免疫调节
- 磷酸胆碱负载的骨髓树突状细胞在动脉粥样硬化进展中的作用及机制研究
- 背景:动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是一种炎症性疾病,涉及活化抗原的适应性和先天免疫反应,包括氧化低密度脂蛋白(ox LDL)和磷酸化胆碱(PC)。树突状细胞(DCs)接受抗原刺激后激活,通过提呈抗...
- 俞健
- 关键词:动脉粥样硬化细胞免疫体液免疫树突状细胞磷酸胆碱
- 一种小鼠骨髓树突状细胞诱导纯化方法
- 本发明公开一种小鼠骨髓树突状细胞诱导纯化方法,包括以下步骤:S1、小鼠骨髓细胞提取:用手术镊将股骨、胫骨保留端夹裂继续冲洗,最大限度获取细胞;S2、树突状细胞细胞培养:培养第三天保留原有培养基及细胞并加入新鲜培养基继续培...
- 鹿中华刘玲范赡文程振兴郭凤梅
- 文献传递
- 雷公藤新碱对LPS诱导小鼠骨髓树突状细胞成熟分化过程及炎症因子分泌的影响被引量:4
- 2019年
- 目的:探讨雷公藤新碱对LPS诱导小鼠树突状细胞(DCs)分化、成熟过程及其分泌细胞因子的影响。方法:体外培养的C57BL/6小鼠骨髓DCs在LPS诱导成熟过程中,加入雷公藤新碱处理,流式细胞术检测DCs细胞表面MHCⅡ、CD80、CD86分子表达水平及DCs抗原吞噬能力,抗体芯片检测细胞因子的分泌情况。结果:与对照组相比,雷公藤新碱干预后DCs细胞表面分子MHCⅡ、CD80、CD86的表达水平明显降低,而抗原吞噬能力增强,培养上清中细胞因子分泌减少。结论:雷公藤新碱抑制LPS诱导的DCs成熟与分化,增加DCs抗原吞噬能力,并抑制其细胞因子分泌。提示雷公藤新碱可减轻DCs介导的炎症反应,为阐明雷公藤新碱在炎症性疾病治疗机制上提供理论与实践基础。
- 张伟闫越颖王政洁
- 关键词:树突状细胞LPS
- 胞壁酰二肽对儿童急性白血病骨髓树突状细胞功能的影响被引量:1
- 2018年
- 目的:探讨胞壁酰二肽(MDP)对儿童急性白血病骨髓树突状细胞(DC)功能的影响。方法:应用Ficoll-Hypaque法分离急性白血病患儿骨髓单个核细胞,对照组:用细胞因子诱导培养DC;实验组实验组分为5个亚组,1组:与对照组等量的MNC+ MDP (10 ug/l),2~5组分别对应为:与对照组等量的MNC + 与对照组等量的细胞因子 + 不同浓度的MDP (102 ug/l,102 ug/l,103 ug/l,104 ug/l);分别诱导培养DC,第9天收获各组DC,与同种异体外周血T淋巴细胞混合反应96 h,观察淋巴细胞的增殖情况,ELISA方法检测上清液中IL-12、IFN-γ的含量;经HL-60抗原致敏后的DC与T淋巴细胞混合培养6 d后,加入HL-60细胞共同孵育12 h,LDH释放改良法检测各组细胞毒T淋巴细胞(CTL)的杀伤活性。结果:1) 混合淋巴细胞反应显示:① T细胞扩增指数:固定刺激细胞数,不同组比较,对照组与1组、2组比较均无显著性差异(p均 > 0.05);3组、4组、5组T细胞扩增指数明显高于对照组,亦明显高于1组(p均 < 0.01)。当刺激细胞数量为1 × 103至1 × 104,同组间T细胞扩增指数逐渐增加(p均 < 0.01),1 × 104与5 × 104之间T细胞扩增指数的增加无统计学意义(p > 0.05)。② T细胞分泌细胞因子:当刺激细胞数为5 × 104时,对照组与1组、2组IL-12含量的比较均无显著性差异(p > 0.05);3组、4组、5组明显高于对照组,亦明显高于1组(p均 < 0.01)。对照组与1组、2组IFN-γ含量的比较均无显著性差异(p > 0.05);3组、4组、5组明显高于对照组,亦明显高于1组(p均 < 0.01)。2) 杀瘤活性结果显示:实验各组杀伤HL-60细胞活性均较对照组显著增强(p均 < 0.01);当MDP浓度由102 ug/l递增至104 ug/l,2组、3组、4组、5组组间比较,杀伤活性逐渐增加(p均 < 0.01),以5组杀伤HL-60细胞活性最强。结论:① 当MDP诱导后的DC数量 ≥ 1 × 103时,即能促进T细胞的增殖,且有MDP浓度依赖性。② 经MDP诱导后的DC具有促进T细胞分泌的作用,与细胞因子
- 李晓玲朱政孙立荣
- 关键词:胞壁酰二肽树突状细胞白血病免疫功能
相关作者
- 郑磊

- 作品数:522被引量:2,400H指数:20
- 供职机构:南方医科大学南方医院
- 研究主题:囊泡 细胞外 医学检验专业 实验诊断学 树突状细胞
- 孙立荣

- 作品数:312被引量:633H指数:12
- 供职机构:青岛大学
- 研究主题:儿童 白血病 急性淋巴细胞白血病 治疗儿童 白血病患儿
- 徐曼

- 作品数:56被引量:272H指数:9
- 供职机构:重庆医科大学
- 研究主题:OVA 胃癌 人子宫颈癌 B7-H4 重组疫苗
- 顾云娣

- 作品数:72被引量:298H指数:8
- 供职机构:复旦大学上海医学院人体解剖与组织胚胎学系
- 研究主题:枯否细胞 卡介苗 肝癌大鼠 肝再生 树突状细胞
- 钟翠平

- 作品数:93被引量:380H指数:10
- 供职机构:复旦大学
- 研究主题:树突状细胞 枯否细胞 肝再生 大鼠肝 肝大部切除