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霍乱毒素被引量:7
2000年
霍乱毒素是一种很强的粘膜免疫佐剂 ,本文介绍了霍乱毒素的结构、霍乱毒素毒性的分子机理及近年来在霍乱毒素佐剂活性方面的研究进展 。
杨淑静马清钧
关键词:霍乱毒素佐剂免疫
一种重组霍乱毒素B亚单位中氨苄西林残留量的测定方法
本发明属于药品质量检测领域,具体涉及一种重组霍乱毒素B亚单位中氨苄西林残留量的测定方法。其中,高效液相色谱的检测条件包括:流动相:A相为体积比为2‑4:1的0.008‑0.012mol/L磷酸二氢钾溶液与乙腈混合液,磷酸...
周永丹闻宏亮孙如玉刘浩张梦悦
一种特异性霍乱毒素毒力基因快速荧光PCR检测试剂盒及检测方法
本发明涉及一种特异性霍乱毒素毒力基因快速荧光PCR检测试剂盒及其检测方法。本发明试剂盒包括PCR反应缓冲液、酶混合液、两对正、反引物、两条探针组成,两对引物和两条探针分别根据霍乱弧菌毒力基因ctxA和人基因组RnaseP...
刘博
一种产生霍乱毒素A亚单位单克隆抗体的杂交瘤细胞株、抗体、试剂盒及其应用
本发明涉及免疫学和体外诊断领域,本发明提供了一种产生霍乱毒素A亚单位单克隆抗体的杂交瘤细胞株、抗体、试剂盒及其应用。所述产生霍乱毒素A亚单位单克隆抗体的杂交瘤细胞株的名称为杂交瘤细胞株KNV,保藏编号为CGMCC No....
孙茂忠魏春豪胥传来匡华徐丽广吴晓玲刘丽强郝昌龙宋珊珊吴爱红郭玲玲胥欣欣瞿爱华
一种从包涵体中提取霍乱毒素B亚基的方法
本发明公开了一种从包涵体中提取霍乱毒素B亚基的方法,将用尿素溶液溶解的含有CTB的包涵体的蛋白样品装入处理好的1kDa的透析袋中;将透析袋置于盛有含尿素的透析液的透析烧杯中,透析烧杯置于磁力搅拌器上,将整个透析烧杯和磁力...
张薇崔涵吴伟
用于产生经纯化重组霍乱毒素B(rCTB)的新方法及其制剂
本发明涉及用于产生经纯化重组霍乱毒素B(recombinant cholera toxin B,rCTB)的新方法,所述经纯化重组霍乱毒素B提供针对由多种细菌例如霍乱弧菌(Vibrio cholerae)和肠致病性大肠杆...
塔伦·夏尔马 尼拉伊·乔希 维布胡·干乍 迪帕·西克里瓦尔 尼迪·舒克拉 达温德·吉尔
热不稳定肠毒素霍乱毒素在制备抑制致病型大肠杆菌活性制剂中的应用
本发明公开了热不稳定肠毒素霍乱毒素在制备抑制致病型大肠杆菌活性制剂中的应用,表现为可以通过促进共生型大肠杆菌Y18J中细菌素的表达抑制致病型大肠杆菌活性,其中细菌素为大肠杆菌素B和/或大肠杆菌素M。由于热不稳定肠毒素(...
尹佳印遇龙赵颖刘丹李梦瑶
一种基于霍乱毒素多聚体结构的诱导胰腺再生的口服嵌合蛋白及应用
本发明涉及一种嵌合蛋白,具体涉及一种基于霍乱毒素多聚体结构的诱导胰腺再生的口服嵌合蛋白及应用。所述的基于霍乱毒素多聚体结构的诱导胰腺再生的口服嵌合蛋白包含第一多肽和第二多肽,其中,第一多肽和第二多肽相互嵌合,第一多肽为E...
王华倩孙家杰何华锋何贤樱
霍乱毒素B亚基与草鱼呼肠孤病毒VP7融合基因的合成和原核表达
2023年
草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus, GCRV)是一种致病力强,严重危害水产养殖业健康发展的病毒。免疫接种疫苗是预防GCRV的有效途径,而口服免疫接种对生活在水中的鱼类是一种理想的接种方式。GCRV衣壳蛋白VP7具有较好的免疫原性。霍乱毒素B亚基(cholera toxin B subunit, CTB)是一种较好的黏膜佐剂。本研究采用PCR技术,将CTB基因和VP7基因进行柔性融合,获得1260 bp的CTB-VP7融合基因,构建重组表达质粒pET28a-CTB-VP7,转化大肠杆菌BL21 (DE3),获得了表达CTB-VP7融合蛋白的菌株。当采用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导时,获得CTB-VP7融合蛋白的分子量约49 kDa,与预期的分子量大小一致。当IPTG浓度为0.08 mmol·L^(-1),诱导温度为37℃,诱导转速为100 r·min~(-1),诱导表达5.0 h时,CTB-VP7融合蛋白的表达量最大,达到2.45 mg·L^(-1)。CTB-VP7融合蛋白在菌体中主要以包涵体的形式存在。在融合蛋白纯化时,洗脱缓冲液中咪唑浓度为200 mmol·L^(-1),目标蛋白纯度达96%。本研究通过基因合成和原核表达得到CTB-VP7融合蛋白,为进一步验证CTB-VP7融合蛋白能否作为抵抗GCRV的粘膜疫苗奠定了基础。
王桐桐金姗姗韩玉行索美涛郭新琦张秋胜
关键词:草鱼呼肠孤病毒VP7蛋白CTB粘膜疫苗
大肠杆菌来源重组霍乱毒素B亚基蛋白细菌内毒素检测方法探讨被引量:1
2022年
目的:通过动态显色法建立大肠杆菌来源的重组霍乱毒素B亚基蛋白质(CTB)细菌内毒素检测方法,探讨如何检测大肠杆菌来源重组蛋白质表达体系细菌内毒素残留量。方法:以大肠杆菌来源的重组CTB为研究对象,按照《中华人民共和国药典》2020年版四部1143细菌内毒素检查法之动态显色法要求,参考《中华人民共和国药典》2020年版四部9099分析方法确认指导原则及《中华人民共和国药典》2020年版四部9101分析方法验证指导原则对其进行品种适应性验证及细菌内毒素含量检测。结果:标准品内毒素含量在0.005~5.0 EU·mL^(-1)范围内,每次标准曲线相关系数(r)均>0.980,标准曲线可靠性验证通过,有效测定范围为0.005~5.0 EU·mL^(-1);4 ng·mL^(-1)供试品浓度添加标准曲线中间浓度已知量的细菌内毒素标准品(0.5 EU·mL^(-1))后,3批样品对应外加细菌内毒素回收率为94%,98%,94%,均在50%~200%范围,且均接近于100%;外加内毒素浓度在标准曲线中间浓度附近3点(1.0,0.5,0.25 EU·mL^(-1))时,4 ng·mL^(-1)供试品中测得的外加内毒素回收率均在50%~200%范围;3批样品多次测定细菌内毒素结果差异较小,同批样品测定结果均在其均值50%~200%范围内,同批样品复管及同批样品3次测定结果变异系数(CV)均<10%。结论:动态显色法适用于重组CTB大肠杆菌表达体系细菌内毒素残留量检测,为大肠杆菌来源重组蛋白质表达体系细菌内毒素残留量检测合适的方法。
何华红王华倩李薇
关键词:大肠杆菌表达

相关作者

马清钧
作品数:388被引量:991H指数:19
供职机构:军事医学科学院生物工程研究所
研究主题:融合蛋白 大肠杆菌 霍乱毒素 恶性疟原虫 DNA疫苗
李海标
作品数:128被引量:588H指数:14
供职机构:中山大学基础医学院
研究主题:视网膜节细胞 霍乱毒素 胚胎干细胞 表皮干细胞 金黄地鼠
曹诚
作品数:247被引量:492H指数:11
供职机构:北京生物工程研究所
研究主题:抗体 人源化抗体 编码基因 肿瘤细胞生长 抗原
王华倩
作品数:59被引量:36H指数:3
供职机构:广东工业大学
研究主题:霍乱毒素 嵌合蛋白 霍乱毒素B亚单位 前列腺癌 癌细胞株
石成华
作品数:57被引量:110H指数:6
供职机构:军事医学科学院生物工程研究所
研究主题:霍乱毒素 基因融合 B亚基 恶性疟原虫 丙型肝炎病毒