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FZD2激活β-catenin稳定雌激素受体α缓解骨质疏松症的分子机制研究
2025年
目的评估和探索FZD2增加双侧卵巢切除术(ovariectomy,OVX)小鼠模型骨量的功效以及其作用机制。方法建立OVX诱导的骨质疏松症小鼠模型。腺病毒过表达FZD2。30只6~8周龄性C57BL/6J小鼠随机分为Control组、Sham组、OVX Model组、OVX Model+E2 Treatment组[给予小鼠二醇(E2)处理]、OVX Model+FZD2 Treatment-L组(给予小鼠左后肢膝关节注射腺病毒-过表达-FZD2治疗)、OVX Model+control-R组(给予小鼠右后肢膝关节注射腺病毒-vector处理),每组6只(OVX Model+FZD2 Treatment-L组和OVX Model+Control-R组使用同样小鼠)。微计算机断层扫描测定小鼠左右后肢胫骨骨小梁和皮质骨骨量相关指标。Western blot测定小鼠胫骨FZD2、active-β-catenin、β-catenin、p-ERα、ERα、Runx2和ALP表达水平。免疫共沉淀法测定分别使用Wnt3a、E2和腺病毒-过表达-FZD2处理的小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1中ERα和β-catenin的直接相互作用。结果与OVX Model组比较,OVX Model+E2 Treatment组小鼠骨组织中的FZD2、active-β-catenin、β-catenin、p-ERα、ERα、Runx2和ALP表达水平上调(P<0.05);骨小梁的骨体积分数和骨小梁数量数值升高(P<0.05);骨小梁分离和皮质骨的骨髓腔面积数值降低(P<0.05)。与OVX Model+E2 Treatment组比较,OVX Model+FZD2 Treatment-L组能够实现与OVX Model+E2 Treatment组类似的功效(P>0.05)。分别加入Wnt3a或E2或腺病毒-过表达-FZD2处理MC3T3-E1细胞后,co-IP免疫印迹结果显示ERα和β-catenin条带显影均为阳性。结论过表达和激活FZD2激活β-catenin稳定雌激素受体α缓解骨质疏松症。
崔永建李艳王桂芝
关键词:骨质疏松症雌激素雌激素受体
雌激素受体α激活腺苷酸活化蛋白激酶信号通路促进成骨细胞的增殖与分化
2025年
背景:研究表明,雌激素受体α可作为上游蛋白,调节腺苷酸活化蛋白激酶的表达及磷酸化水平,激活雌激素受体α-腺苷酸活化蛋白激酶通路可促进成骨增殖分化。目的:通过成骨细胞系、分子生物学层面探讨雌激素受体α调控腺苷酸活化蛋白激酶的分子机制及对成骨细胞增殖、分化的影响。方法:(1)将传代的MC3T3-E1小鼠胚胎成骨细胞分3组:空白对照组、mock组(转染pCDNA3.1对照质粒)、雌激素受体α组(转染pCDNA3.1-雌激素受体α过表达质粒),RT-qPCR和Western blot法检测肝激酶B1、CaMKKβ和腺苷酸活化蛋白激酶α1 mRNA、蛋白及磷酸化水平。(2)ChIP-qPCR证明雌激素受体α与肝激酶B1启动子互作;双荧光素酶实验证明雌激素受体α与肝激酶B1启动子区域互作激活其转录表达。(3)细胞分3组:mock+shNC组、雌激素受体α+shNC组、雌激素受体α+shLKB1组,采用Western blot检测细胞中肝激酶B1、磷酸化肝激酶B1、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α1蛋白的表达水平变化。(4)细胞分4组:mock组、雌激素受体α组、雌激素受体α+5μmol/L Compound C(腺苷酸活化蛋白激酶抑制剂)组、雌激素受体α+10μmol/L Compound C组,Western blot法检测腺苷酸活化蛋白激酶信号通路相关蛋白和成骨分化相关蛋白的表达。细胞转染24 h后给予成骨诱导14 d,检测各组细胞碱性磷酸酶染色及活性情况。成骨诱导21d采用茜素红染色检测矿化结节形成情况。(5)按分组转染及不同浓度腺苷酸活化蛋白激酶抑制剂预处理,通过CCK8检测细胞活力。结果与结论:(1)雌激素受体α能激活MC3T3-E1细胞中腺苷酸活化蛋白激酶信号通路;(2)雌激素受体α可促进肝激酶B1转录介导腺苷酸活化蛋白激酶信号通路激活;(3)雌激素受体α通过激活腺苷酸活化蛋白激酶信号通路促进MC3T3-E1细胞增殖分化,腺苷酸活化蛋白激酶抑制剂干预下腺苷酸活化蛋白激酶α1、磷酸化腺苷酸活化�
杨锋徐金凡龙欢杨冯春张桂鑫姜涛陈庆真邵敏
关键词:绝经后骨质疏松症AMPK信号通路
雌激素受体α在胃癌中的研究进展
2024年
胃癌是常见恶性肿瘤之一,虽然靶向治疗、免疫治疗等新的治疗方式出现使胃癌患者的总体生存率略有改善,但整体疗效仍然有限,需进一步探索新的有效治疗策略。雌激素是一种类固醇激素,主要通过与雌激素受体(estrogen receptor,ER)结合,参与调节多种生理和病理过程。多项研究表明,雌激素受体α(estrogen receptor-alpha,ERα)可参与调节胃癌细胞增殖、侵袭和转移等生物学行为。全文就近年关于ERα在胃癌中的研究成果,对其在胃癌发生、进展、治疗和预后中的作用,及其作为胃癌有效治疗靶点的潜能进行分析。
方井泉陈晗俞鹏飞
关键词:胃肿瘤雌激素受体Α雌激素临床病理特征
一种雌激素受体α靶向PET分子探针及其应用
本发明涉及一种雌激素受体α靶向PET分子探针及其应用,属于PET成像技术领域。本发明提供了一种雌激素受体α的靶向化合物,此靶向化合物引入了聚乙二醇链,具有稳定性好、摩尔活度高、靶向特异性好的优势。研究表明,将此靶向化合物...
林建国陈盼盼彭莹刘清竹谢敏浩
一种选择性雌激素受体α降解化合物及其制备方法和应用
本发明公开了一种选择性雌激素受体α降解化合物及其制备方法和应用,具体涉及医药化学技术领域。所述降解化合物为(4‑乙氧基苯基)(6‑羟基‑2‑(4‑羟基苯基)苯并[b]噻吩‑3‑基)甲酮衍生物。本发明的衍生物可以规避AI/...
田洋杨涛张建辉
雌激素受体α在绝经后骨质疏松中的研究进展及作用机制被引量:2
2024年
绝经后骨质疏松(postmenopausal osteoporosis, PMOP)是亟需解决的公共健康问题。患者雌激素减少,雌激素受体(estrogen receptor α,ERα)表达水平下降,成骨细胞功能下降,破骨细胞活性增强,骨代谢偶联失衡。ERα在PMOP的发生发展中具有重要作用,笔者从PubMed、Web of Science和中国知网检索近10年(2013-2023年)骨质疏松研究领域的文献,总结归纳ERα在骨髓间充质干细胞、成骨细胞祖细胞、成骨细胞前体细胞、成熟成骨细胞、破骨细胞和骨细胞中的作用,并以能显著改善PMOP的黄酮类成分淫羊藿苷为例阐述基于ERα的抗PMOP相关机制。
瞿霖赵梦幻王冬玉宋蕾周昆
关键词:绝经后骨质疏松雌激素受体Α成骨细胞破骨细胞
双重靶向降解雌激素受体α和芳构化酶的PROTACs化合物及其应用
本发明公开了一种双重靶向降解雌激素受体α和芳构化酶的PROTACs化合物及其应用,属于医药技术领域。本发明化合物具有如下的结构通式,通式中,X为CH或N;E3 ligand是具有泛素化功能的由VHL或CRBN基因等编码的...
周海兵董春娥辛丽兰程艳
雌激素受体α介导的宝藿苷I对成骨细胞的作用机制研究
瞿霖
B细胞淋巴瘤因子-3对乳腺癌雌激素受体α信号通路及细胞增殖的影响
2024年
目的探讨B细胞淋巴瘤因子-3(Bcl-3)对乳腺癌雌激素受体α(ERα)信号通路以及细胞增殖的影响。方法取对数生长期MCF-7细胞,随机分为siControl组和siBcl-3#1组,分别滴加ControlsiRNA和siBcl-3#1siRNA,应用细胞转染试剂Lipofectamine TM 2000转染5 h。取稳定转染48 h后的siControl组和siBcl-3#1组MCF-7细胞,应用实时荧光定量聚合酶链反应检测MCF-7细胞中Bcl-3、乳腺癌雌激素调控基因1(GREB1)、PDZ结构域蛋白1(PDZK1)和ERα靶基因三叶因子1(TFF1)mRNA的表达,Western blot法检测MCF-7细胞中Bcl-3、ERα蛋白表达,细胞计数试剂盒-8实验检测MCF-7细胞增殖能力。取HEK293T细胞,随机分为Input组(即阳性对照组)、IP组(即免疫共沉淀组)和IgG组(即阴性对照组),共转染Bcl-3和ERα质粒48 h后,用100μL免疫共沉淀(Co-IP)细胞裂解液冰上裂解细胞后,分离上清液;Input组取90μL上清液,加入30μL 4×Loading buffer;IP组取450μL上清液,加入40μL Protein A/G和绿色荧光蛋白抗体0.5μL;IgG组取450μL上清液,加入0.5μL IgG、30μL Protein A/G琼脂糖磁珠;采用Co-IP实验检测细胞中Bcl-3和ERα结合效果。取对数生长期的MCF-7细胞,采用免疫荧光共定位实验检测Bcl-3和ERα是否存在共定位现象。结果si-Bcl-3#1组MCF-7细胞中Bcl-3、GREB1、TFF1和PDZK1 mRNA相对表达量显著低于siControl组(P<0.05)。si-Bcl-3#1组MCF-7细胞中Bcl-3蛋白和ERα蛋白相对表达量显著低于siControl组(P<0.05)。培养0、24 h时,si-Bcl-3#1组与siControl组MCF-7细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05);培养48、72 h时,si-Bcl-3#1组MCF-7细胞增殖能力显著低于siControl组(P<0.05)。Co-IP实验结果显示,Bcl-3和ERα存在相互作用。免疫荧光共定位实验结果显示,Bcl-3和ERα存在共定位现象。结论Bcl-3在乳腺癌细胞中呈高表达,其能够提高乳腺癌ERα信号通路的转导活性,促进ERα阳性乳腺癌细胞增殖。
武丹凤朱建王辉
关键词:乳腺癌雌激素受体Α细胞增殖
白细胞介素-17A与雌激素受体α和β在上皮性卵巢癌组织中的表达及其临床意义
2024年
目的:探讨白细胞介素(IL)-17A与雌激素受体α(ERα)、ERβ在上皮性卵巢癌(EOC)组织中的表达水平及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法:回顾性分析2018年8月—2022年8月间在无锡市妇幼保健院诊治的102例EOC患者的临床和病理资料,采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测癌组织及相应病旁组织中IL-17A、ERα、ERβ mRNA的表达情况,计算ERα/β比值。分析IL-17A mRNA、ERα/β与患者临床病理特征的关系,并采用Kaplan-Meier法和Cox回归法分析IL-17A mRNA、ERα/β对EOC患者预后总生存期(OS)的影响。结果:与癌旁组织比较,癌组织中IL-17A、ERα m RNA表达水平及ERα/β水平均升高(P<0.05),而ERβ mRNA表达水平降低(P<0.05)。分别以IL-17A mRNA、ERα/β的平均值0.52、3.85为分界值进行高、低表达分组,结果显示IL-17A高表达及ERα/β高比值与FIGO分期、淋巴结转移、腹水量有关(P<0.05)。随访时间12~60个月,中位随访时间36个月,随访期间共38例(37.25%)患者死亡。Kaplan-Meier分析显示,IL-17A mRNA高表达者累积生存率低于其低表达者(P<0.05);ERα/β高比值者累积生存率亦低于ERα/β低比值者(P<0.05)。多因素Cox分析显示,FIGO III+IV期、术后残灶>2 cm、IL-17A m RNA高表达、ERα/β高比值是EOC患者总体生存期的独立危险因素(P<0.05)。结论:EOC组织中IL-17A、ERα及ERα/β mRNA上调,而ERβ m RNA水平下调,且IL-17A高表达及ERα/β高比值的EOC患者预后相对较差。
王科芳陈瑜吴陈雨刘梅汪丽杰田建广周小会许岚
关键词:上皮性卵巢癌白细胞介素-17A雌激素受体Α雌激素受体Β临床病理特征