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重组腺病毒载体及其制备方法
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种新型重组腺病毒载体及其制备方法。本发明解决的技术问题是提供一种新型重组腺病毒载体,以克服现有的腺病毒载体系统耗时长、筛选过程复杂等缺陷。本发明所采取的技术方案是提供一种重组腺病毒载体,...
杨莉田要美
MATV11重组腺病毒载体、应用、制备方法及HPV治疗性疫苗
本发明涉及HPV治疗性疫苗技术领域,具体而言,涉及MATV11重组腺病毒载体、应用、制备方法及HPV治疗性疫苗。该MATV11重组腺病毒载体包括如SEQ ID No.1所述的核苷酸序列和如SEQ ID No.2所示的核苷...
程腾魏睿马丁李飞代依林
一种鱼弹状病毒重组腺病毒载体疫苗及其制备方法和应用
本发明涉及生物医药技术领域,具体公开了一种鱼弹状病毒重组腺病毒载体疫苗及其制备方法和应用。本发明利用复制缺陷型重组腺病毒载体制备得到携带有SCRV病毒的M基因的重组腺病毒疫苗,制备方法包括鳜鱼弹状病毒M基因克隆、构建带有...
徐田军周学锋郑伟伟孙悦娜高云航
MATV51重组腺病毒载体、应用、制备方法及HPV16/18/52治疗性疫苗
本发明涉及HPV治疗性疫苗技术领域,具体而言,涉及MATV51重组腺病毒载体、应用、制备方法及HPV16/18/52治疗性疫苗。MATV51重组腺病毒载体包括用于编码HPV16、HPV18和HPV52的E6及E7抗原的核...
李飞马丁高庆蕾魏睿代依林
大西洋鲑传染性胰坏死病病毒VP2蛋白和VP3蛋白重组腺病毒载体的构建及其表达
2025年
传染性胰坏死病(infectious pancreatic necrosis,IPN)是由传染性胰坏死病病毒(infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)引起的一种主要危害鲑科鱼类的传染病。为克隆传染性胰坏死病病毒(IPNV)VP2基因和VP3基因,并构建其重组腺病毒载体,利用PCR方法分别扩增出IPNV VP2基因和VP3基因,通过多基因片段同源重组技术将IPNV VP2基因和VP3基因克隆到pAd-Track-CMV载体,经过线性化后与pAd-easy-1载体在BJ5183菌体内进行同源重组,构建出重组腺病毒质粒;通过PCR及NotⅠ和HindⅢ双酶切鉴定,再经PacⅠ线性化后用于转染293T细胞,获得重组腺病毒;通过绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达监控重组腺病毒的复制情况,用Western-blotting法分别检测IPNV VP2蛋白和VP3蛋白的表达,并测定重组病毒滴度。结果显示,分别克隆出IPNV VP2和VP3基因,基因总长度为2211 bp,构建出目的基因重组腺病毒载体,该病毒在293T细胞中分别表达出蛋白分子质量约为54 kD和26 kD的产物,滴度为1.0×10^(9)个/mL TCID_(50)。结果表明,已成功获得IPNV VP2基因和VP3基因重组腺病毒,该病毒在293T细胞中滴度较高,能够稳定表达。传染性胰坏死病病毒VP2蛋白和VP3蛋白重组腺病毒载体的成功构建可为大西洋鲑传染性胰坏死病活载体疫苗的研制提供参考。
李守湖秦闯李新苍石建高
关键词:VP2基因VP3基因腺病毒载体
一种CAstV-ORF2重组腺病毒载体活疫苗及其应用
本发明公开了一种CAstV‑ORF2重组腺病毒载体活疫苗及其应用,属于疫苗技术领域。通过本发明对CAstV‑ORF2衣壳蛋白序列进行分析筛选,删除序列中抗原性低的388aa‑455aa区域,加入Linker连接臂(aa:...
周德方孟凡润成子强周静李睿琪邓兵晋美旺杰拉普德吉普赤罗桑曲珍任增帮普布桑珠
一种布鲁氏菌Bp26基因重组腺病毒载体疫苗及其制备和应用
本发明公开了一种布鲁氏菌Bp26基因重组腺病毒载体疫苗及其制备和应用。具体地,本发明通过对Bp26基因进行改造,提供了一种可同时实现布鲁氏菌检测和预防的引物对,并基于该引物对开发了一种安全性高、保护力强的病毒载体疫苗,解...
贺笋赵海龙何传雨吴冬玲刘梦志韩瑞穆榕博黄伟伟常品师伟伟
一种应用于多种构建体系的重组腺病毒载体质粒及其构建方法和应用
本发明公开了一种应用于多种构建体系的重组腺病毒载体质粒及其构建方法和应用,该重组腺病毒载体质粒的序列SEQ ID NO.3所示,包含AdEasy、AdMax以及GateWay系统所需的必须元件,包括Left/Right ...
代红圆郑义丁文鹏
一种应用于多种构建体系的重组腺病毒载体质粒及其构建方法和应用
本发明公开了一种应用于多种构建体系的重组腺病毒载体质粒及其构建方法和应用,该重组腺病毒载体质粒的序列SEQ ID NO.3所示,包含AdEasy、AdMax以及GateWay系统所需的必须元件,包括Left/Right ...
代红圆郑义丁文鹏
虹鳟传染性造血器官坏死病-传染性胰坏死病重组腺病毒载体的构建
2024年
传染性造血器官坏死病和传染性胰坏死病是以感染鲑科鱼类为主的两种传染病。为克隆传染性造血器官坏死病病毒IHNVG基因和传染性胰坏死病病毒IPNVVP2基因,并构建其重组腺病毒载体。利用RT-PCR方法分别扩增出IHNVG基因和IPNVVP2基因,通过多基因片段同源重组技术将IHNVG基因和IPNVVP2基因克隆到pAdTrack-CMV载体上,经过线性化后与pAdEasy-1载体在BJ5183菌体内同源重组,构建出重组腺病毒质粒,经PCR及NotⅠ和HindⅢ双酶切鉴定后,再经PacⅠ线性化后用于转染HEK-293细胞,获得重组腺病毒。通过绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达来监控重组腺病毒的复制情况,用western blot法分别检测糖蛋白(G蛋白)和VP2蛋白的表达,并测定重组病毒的滴度。结果显示,克隆出的IHNVG基因和IPNVVP2基因总长度为3036 bp。该病毒在HEK-293细胞中分别表达出蛋白分子质量约为58 kD和54 kD的产物,其滴度为1.0×10^(9.5)mL^(-1)TCID_(50)。结果表明,研究成功获得IHNVG基因和IPNVVP2基因重组腺病毒,该病毒在HEK-293细胞中滴度较高,能够稳定表达。研究结果为下一步研发传染性造血器官坏死病-传染性胰坏死病二联疫苗奠定了基础,并为进一步防控传染性造血器官坏死病和传染性胰坏死病提供了参考。
李守湖张雪青石建高
关键词:虹鳟G基因VP2基因腺病毒载体

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