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用重组腺病毒介导的基因编辑技术编辑鸡NHE1基因研究: 王震

利用羧甲基壳聚糖优化重组腺病毒介导的IL-10体内抗肝纤维化作用研究: 目的：肝纤维化是一种常规治疗难以治愈的慢性肝脏疾病，基因导向治疗具有很大的应用前景。白介素-10(IL-10)因其众所周知的抗炎作用，一直是潜在抗纤维化基因治疗焦点。病毒载体是主要的基因传递载体之一，其中腺病毒（Ad）载...; 勾颜年; 关键词：肝纤维化羧甲基壳聚糖重组腺病毒载体白细胞介素-10 基因治疗

重组腺病毒介导的缺氧诱导因子-1α对脑缺氧后神经元中缺氧诱导因子-1α的调控被引量：1: 2023年; 目的探讨重组腺病毒介导的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)转染对缺氧后的大鼠大脑皮层神经元中HIF-1α的调控作用及可能机制。方法(1)制备大鼠大脑皮层神经元原代培养模型及缺氧模型。重组腺病毒缺氧诱导因子-1α(AdHIF-1α)转染和重组腺病毒空载体(Ad)转染正常及缺氧细胞;将其分为正常对照组(Normal)、缺氧组(Hypoxia)、AdHIF-1α基因转染组、Ad组。(2)荧光显微镜下观察AdHIF-1α/Ad转染情况;采用蛋白印迹(Westernblot)法分别在12h、24h、48h及72 h观察各实验组HIF-1α蛋白的表达。结果用Ad/AdHIF-lα转染缺氧的神经元后,在荧光显微镜下观察转染48h时荧光表达最明显。Westernblot检测经AdHIF-1α基因转染组各时间点HIF-1α的表达明显增加,12h有阳性表达,24h表达有所增加,48h达高峰,持续到72h开始下降,与缺氧组相比差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05),Ad组与缺氧组相比无统计学意义。结论重组腺病毒介导的HIF-1α基因转染能明显提高缺氧神经元中HIF-1α的表达量,有可能对缺氧后的神经元发挥保护作用。; 邹哲华陶陶晋明璐徐坚; 关键词：缺氧诱导因子1,Α亚基

重组腺病毒介导的HIF-2α过表达对孕鼠的影响被引量：1: 2021年; 目的通过重组腺病毒介导使低氧诱导因子-2α(HIF-2α)过表达,探讨其过表达对SD孕鼠的影响。方法将SD孕鼠随机分为重组腺病毒组、盐水组、空白腺病毒组,每组12只,于妊娠第9 d经鼠尾静脉分别注射100μL载有HIF-2α的重组腺病毒(1×10^(10)Pfu/只)、盐水、空白腺病毒(1×10^(10)Pfu/只),观测孕鼠血压、尿蛋白、肝肾功能情况及仔鼠均重变化,应用免疫组化法分析胎盘组织HIF-2α表达情况。结果妊娠第19 d,与空白腺病毒组、盐水组相比,重组腺病毒组血压、尿蛋白显著升高,仔鼠均重明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。空白腺病毒组与盐水组相比,孕鼠血压、尿蛋白、仔鼠均重无明显差异(P>0.05)。三组孕鼠ALT、ALB、BUN、Cr无明显差异(P>0.05),免疫组化结果提示重组腺病毒组HIF-2α表达高于盐水组、空白腺病毒组(P<0.05)。结论 HIF-2α过表达可使SD孕鼠产生子痫前期症状、胎儿宫内生长受限(IUGR),HIF-2α可能参与子痫前期发病机制。; 马萌谢莹莺赵世晨徐梦婷何岑盈; 关键词：孕鼠重组腺病毒

重组腺病毒介导肝细胞生长因子转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究: 2021年; 目的评价重组腺病毒介导肝细胞生长因子(Ad-HGF)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)的转染效率及对干细胞增殖的影响。方法1只雄性Wistar大鼠,鼠龄4周,体质量约90 g。采用密度梯度离心法结合贴壁法分离培养大鼠BMSC,流式细胞仪进行鉴定;携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(Ad-GFP)转染BM-SC,探索最佳感染指数(MOI),激光共聚焦显微镜观察转染效果,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比浊法(MTT)测定转染对BMSC增殖的影响;在最佳MOI时Ad-HGF转染BMSC,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定人HGF在不同时间的表达。结果成功培养大鼠BMSC,GFP成功表达,不影响细胞增殖(P>0.05);转染效率随MOI增大逐渐增加,在MOI=200时,效率达88.42%;Ad-HGF成功高效率转染MSC,HGF基因得到持续高表达,48 h时达最高水平。结论Ad-HGF成功高效率转染大鼠BMSC,外源基因得到持续表达,不影响干细胞活性。; 范慧慧孙琰玮李宝平; 关键词：转染间质干细胞肝细胞生长因子腺病毒

重组腺病毒介导神经生长因子转染实验性自身免疫性脑脊髓炎模型小鼠少突胶质细胞的凋亡及髓鞘化被引量：2: 2021年; 背景:神经生长因子对正常的神经元凋亡具有抑制效应,能够提高其损伤修复的能力,在一些自身免疫性疾病中发挥治疗作用。目的:观察经外周转染重组腺病毒介导神经生长因子基因对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠少突胶质细胞凋亡及髓鞘化的影响。方法:将30只雌性健康的C57BL/6小鼠随机分为3组,每组10只:正常组不进行任何处理;对照组采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽免疫法建立实验性自身免疫性脑脊髓炎模型,建模后第3天尾静脉注射生理盐水,连续注射21 d;转染组同样建立实验性自身免疫性脑脊髓炎模型,建模后第3天尾静脉注射转染重组腺病毒介导神经生长因子基因,连续注射21 d。疾病高峰期处死小鼠,利用LFB染色行髓鞘组织形态病理观察,免疫荧光法观察脊髓组织中凋亡蛋白Caspase3与少突胶质细胞的表达及共定位情况,RT-PCR法检测脊髓组织中神经生长因子、髓鞘碱性蛋白mRNA水平,Western blot法检测脊髓组织中神经生长因子、Caspase3蛋白水平,Elisa法检测脊髓组织髓鞘碱性蛋白水平。实验操作过程通过西南医科大学动物实验伦理审查(201912-8)。结果与结论:①LFB染色显示,对照组脊髓组织有明显的脱髓鞘改变,转染组髓鞘脱失有显著改善;②免疫荧光显示,对照组脊髓组织少突胶质细胞中Caspase3呈明显的点状聚集,转染组聚集现象不明显;③RT-PCR检测显示,与正常组、转染组比较,对照组的髓鞘碱性蛋白、神经生长因子mRNA表达降低(P<0.05);④Western blot检测显示,与正常组、转染组比较,对照组的Caspase3蛋白水平升高(P<0.05)、神经生长因子蛋白水平降低(P<0.05);⑤Elisa检测显示,对照组髓鞘碱性蛋白水平低于正常组、转染组(P<0.05);⑥结果表明,经外周转染的重组腺病毒介导神经生长因子基因对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型有防治作用,其机制可能与上调神经生长因; 谢阳吕志宇张淑江龙婷李作孝; 关键词：神经生长因子腺病毒自身免疫性脑脊髓炎少突胶质细胞髓鞘凋亡

重组腺病毒介导的颗粒溶素运输联合化疗对结核病小鼠的效应评价: 【背景目的】结核病（tuberculosis,TB）仍然是全球最具威胁性的传染病。TB病人对冗长的化疗周期依从性差,会增加疾病复发的风险,并导致耐多药TB（multidrug-resistant TB,MDR-TB）和广...; 郝灵; 关键词：颗粒溶素结核病耐多药结核病治疗性疫苗原发感染

重组腺病毒介导MRTF-A基因干预缺血再灌注损伤模型大鼠心肌细胞的凋亡被引量：2: 2018年; 背景:有研究表明上调myocardin相关转录因子A(myocardin-related transcription factor-A,MRTF-A)基因表达可抑制脑缺血再灌注诱导的神经细胞凋亡而发挥脑保护作用,但其对心肌缺血-再灌注损伤中心肌细胞的作用鲜有报道。目的:探讨重组腺病毒介导MRTF-A基因对大鼠缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、空白载体组和Adv-MRTF-A组,制备MRTF-A cDNA重组腺病毒载体,除假手术组外构建大鼠缺血再灌注损伤模型。Adv-MRTF-A组取大鼠左心室游离壁上、下、左、右4点各注射病毒滴度1.2×10^(10) TU/mL的Adv-MRTF-A;空白载体组以同样的方法注射同量的空白对照病毒,假手术组、模型组不注射。14 d后取材,TTC染色法检测各组大鼠心肌梗死面积,TUNEL法检测各组大鼠心肌细胞凋亡,Western blot法检测各组大鼠心肌组织中MRTF-A、Bcl-2、Mcl-1和Bax蛋白表达。结果与结论:(1)假手术组大鼠心肌梗死面积0%,与模型组和空白载体组比较,Adv-MRTF-A组大鼠心肌梗死面积明显减少(P<0.001);心肌细胞凋亡率显著降低(P<0.001);心肌组织中MRTF-A、Bcl-2、Mc-1蛋白相对表达量均升高,而Bax蛋白相对表达量降低(P<0.05)。(2)结果说明,重组腺病毒介导MRTF-A基因表达可有效减少心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌梗死面积,其机制可能与促进Bcl-2、Mcl-1蛋白表达、抑制Bax蛋白表达从而抗心肌细胞凋亡有关。; 杨辉牛美芝郭晓丽刘福垒; 关键词：缺血再灌注损伤实验动物腺病毒载体

重组腺病毒介导的FOXO1和FOXO3a对缺氧复氧的小鼠心肌细胞的作用: 目的:探讨重组腺病毒介导的FOXO1和FOXO3a对缺氧/复氧的小鼠心肌细胞的作用。方法:H9C2小鼠心肌细胞缺氧(H)3 h/复氧(R)6 h,建立缺氧/复氧损伤模型。将H9C2细胞随机分为5组:A组(Control组...; 李继红; 关键词：重组腺病毒 FOXO1 FOXO3A 心肌细胞

重组腺病毒介导siBMPR-IA抑制钛颗粒诱导破骨细胞分化和骨溶解: 实验目的：　　探讨BMPR-IA在调控磨损颗粒诱导破骨细胞分化成熟中的作用。探寻BMPR-IA的沉默与过表达对破骨细胞标志基因的作用，丰富BMPs、BMP受体在骨溶解中的作用机理。　　实验方法：　　1.体外实验：　　从B...; 袁威; 关键词：破骨细胞分化成熟重组腺病毒骨溶解

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