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间接竞争酶联免疫分析法快速检测决明子中黄曲霉毒素B_(1)的研究: 2023年; 目的:建立适用于中药决明子中黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))快速检测的间接竞争酶联免疫分析法(indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA)。方法:首先采用棋盘滴定法优化抗原抗体最佳浓度,建立抑制曲线,然后以显色值和灵敏度为评价指标筛选样品的提取和稀释方法。对所建立的方法进行方法学考察,最后用于实际样品检测。结果:经过优化,确定样品的最佳提取溶剂为乙腈-甲醇溶液(90∶10,v/v),稀释溶液为甲醇-PBS溶液(10∶90,v/v),稀释倍数为20倍。方法的半数抑制浓度为0.078 ng/mL,线性范围为0.016~0.25 ng/mL,回收率为85.00%~109.2%,RSD为0.45%~9.08%。采用所建立的方法对25批决明子进行了检测,经液相色谱-串联质谱法确证,超过限量标准的样品的假阳性率小于5%。结论:本文所建立的ic-ELISA灵敏、简便,适用于决明子中AFB_(1)的快速筛查,但仍存在一定的假阳性率,后续还需要对产生干扰的基质因素进行研究并消除,进一步提高检测的准确度。; 张磊林煜伦; 关键词：样品前处理决明子

基于QuEChERS样品前处理的间接竞争酶联免疫分析法快速检测薏苡仁中黄曲霉毒素B_(1)被引量：2: 2023年; 目的解决间接竞争酶联免疫分析法(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA)检测薏苡仁中黄曲霉毒素B_(1)(Aflatoxin B_(1),AFB_(1))的基质干扰问题,建立一种简便的高通量检测方法,用于薏苡仁中AFB_(1)的快速筛查。方法以ic-ELISA的显色值和抑制率为评价指标优化样品前处理过程,重点考察QuEChERS萃取净化技术、不同稀释溶剂和稀释方式消除基质效应的效果,并对建立的方法进行方法学考察,最后应用于薏苡仁实际样品检测,检测结果用液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)进行确证。结果建立了一种无需任何校正,可用溶剂标准曲线进行定量分析的ic-ELISA。方法的半数抑制浓度为0.074 ng/mL,线性范围为1.37~20.0μg/kg,加标回收率在75.12%~84.46%之间,RSD小于6%。122批薏苡仁及其相关样品中AFB_(1)的阳性率为20.5%,阳性样品的超标率为24.0%,污染水平为1.76~27.56μg/kg。ic-ELISA与LC-MS/MS检测结果的相关系数(r)为0.98。结论QuEChERS萃取净化技术能够有效去除薏苡仁中的干扰成分,对快速样品前处理方法的建立具有重要应用价值,结合本研究所建立的ic-ELISA,为薏苡仁中AFB_(1)的检测和监测提供简便有效的技术手段。; 张磊关凯仪黄雨心王淑美; 关键词：薏苡仁

酶联免疫分析法测定水产苗种中喹乙醇代谢物被引量：4: 2022年; 本研究建立了水产苗种中喹乙醇(Olaquindox,OLA)代谢物3-甲基-喹噁啉-2-羧酸(3-methyl-quinoxaline-2-carboxylic acid,MQCA)残留量检测的酶联免疫法(ELISA)。乙酸乙酯作为提取溶剂,采用盐酸(HCl)溶液对样品提取液酸解、纯水饱和正己烷脱脂除杂等措施对前处理过程进行优化。结果表明,MQCA在0.400~60.000μg/kg范围内线性良好,相关系数R^(2)=0.996,检出限为0.400μg/kg。在4.00、8.00、40.00μg/kg的加标水平下,中国对虾(Penaeus chinensis)、三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)、刺参(Stichopus japonicus)、牙鲆(Paralichthys olivaceus)等不同基质苗种中MQCA的平均回收率为71.4%~95.7%,精密度为3.9%~7.9%。与HPLC法相比,该法灵敏度高、特异性强、快速简便,适用于不同基质水产苗种中MQCA残留量的快速批量检测。; 梁娟于盟盟潘玉兰马腾安萍王芳; 关键词：水产苗种酶联免疫法

酶联免疫分析法在食品农药残留检测中的应用被引量：1: 2022年; 农业生产活动中杀虫剂的滥用与不当利用将造成严重的生态问题与环保问题,杀虫剂残留超标问题已经成为危害食品安全的一项主要原因,为保护人民的健康,一定要提高对食品安全的关注。酶联免疫吸附实验(ELISA)是一项利用酶标记抗体或抗原为主要试剂来标记免疫状态的实验技术,它融合了对抗原抗体反应的高特异性和高效的蛋白质催化作用,具备敏感度高、特异性强、准确性好、测试成本低、速度快等优势。近年来,该方法已应用于食品安全中农药残留的测定,效果良好。; 刘珊珊谭雪松谢作文吴思逸; 关键词：酶联免疫法食品安全农药残留

不同基质水产苗种中己烯雌酚酶联免疫分析法的建立被引量：1: 2022年; 为建立水产苗种中己烯雌酚(Diethylstibestrol,DES)残留量的定性、定量检测的酶联免疫(ELISA)法,采用乙酸乙酯作为提取剂,超声振荡提取替代涡旋振荡提取、纯水对正己烷进行饱和等措施对前处理过程进行优化,同时考察了基质效应对检测结果的影响。DES在0.150~9.00 ng·mL^(-1)的加标水平范围内,曲线相关系数R^(2)=0.997,方法定量限为0.075μg·kg^(-1);中国对虾苗种、三疣梭子蟹苗种、刺参苗种、牙鲆苗种在0.075、0.150、0.750μg·kg^(-1)加标水平下,平均回收率测定范围为74.3%~96.7%,精密度范围为3.7%~7.6%。试验结果表明,该法灵敏度更高、特异性强、快速简便,适用于不同基质水产苗种中DES残留量的定性和定量分析。; 梁娟魏海英于盟盟张倩玉牟丹丹赵涛涛; 关键词：水产苗种己烯雌酚残留量不同基质酶联免疫法

酶联免疫分析法检测乙型肝炎表面抗原常见影响因素分析被引量：2: 2022年; 目的分析酶联免疫分析法检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)常见影响因素。方法回顾性分析汝阳县中医院2019年10月至2021年5月接收的慢性乙型肝炎患者44例血清样本作为研究对象。抽取患者肘静脉血5 mL,离心处理后留下血清,将44份血清平均分成四等份,计为A、B、C、D,使用酶联免疫分析法检测HBsAg。比较不同时间HBsAg阳性血清样本滴度OD值、不同温度HBsAg阳性血清样本滴度OD值、不同洗扳HBsAg阳性血清样本滴度OD值和三种不同酶标记抗体加入量HBsAg阳性血清样本滴度OD值。结果不同时间点5 min、10 min、15 min、20 min、25 min、30 min、35 min、40 min平均OD值比较差异有统计学意义(P<0.05)。其中40 min平均OD值(0.71±0.02)最高,5 min平均OD值(0.41±0.02)最低。37℃下HBsAg阳性血清样本滴度OD值高于12℃(P<0.05)。自来水HBsAg阳性血清样本OD值高于试剂盒洗液(P<0.05)。40μL、50μL、60μL酶标记抗体加入量的OD值比较差异有统计学意义(P<0.05),其中50μL酶标记抗体加入量OD值(0.77±0.19)最高,40μL酶标记抗体加入量OD值(0.72±0.12)最低。结论时间、洗板、温度是酶联免疫分析法检测乙肝表面抗原常见影响因素,要准确处理。; 李达; 关键词：乙型肝炎酶联免疫分析法乙肝表面抗原 OD值

基于单克隆抗体的间接竞争酶联免疫分析法检测玉米赤霉烯酮: 目的:针对玉米赤霉烯酮（ZEN）建立一种准确、灵敏的间接竞争酶联免疫法。方法:通过羧甲基羟胺法合成玉米赤霉烯酮半抗原,采用碳二亚胺法分别偶联牛血清白蛋白（BSA）、鸡卵白蛋白（OVA）合成玉米赤霉烯酮免疫原（ZEN-CM...; 刘文韬邱金平陆旸; 关键词：玉米赤霉烯酮单克隆抗体

邻苯二甲酸二戊酯半抗原的合成及酶联免疫分析法的建立被引量：5: 2022年; 邻苯二甲酸二戊酯(DAP)是一种常见的邻苯二甲酸酯类增塑剂,使用范围广泛。为构建一种DAP简便、准确的检测方法,首先进行DAP半抗原的合成,得到半抗原4-氨基邻苯二甲酸二戊酯(DPAP);采用重氮法将DPAP与蛋白质进行偶联得到DAP完全人工抗原,对免疫BALB/c小鼠进行免疫;免疫后取小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞进行融合,筛选得到一株可产生DAP单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株。随后对DPA的间接竞争酶联免疫检测法进行构建,对检测条件进行优化确定最佳检测方法。所制备的DAP MAb特异性强,与DAP结构类似物产生交叉反应的反应率低。所构建的检测法最低检测限IC_(10)为0.51 ng/mL,半数抑制率IC_(50)为17.83 ng/mL,水样中加标回收率为95.36%~104.5%,可用于实际样品中DAP含量的检测,具有良好的应用前景。; 余梅张智淮张玉超吴福勇刘旭东; 关键词：半抗原酶联免疫分析法

纳米金增强酶联免疫分析法检测面粉中呕吐毒素含量的研究: 2022年; 呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)是一种主要由禾谷镰刀菌产生的单端孢霉烯族化合物,具有很高的细胞毒素及免疫抑制性质,对人类和动物健康造成严重威胁。采用将辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠二抗(HRP-IgG)偶联在金纳米颗粒(AuNPs)上,制备出一种高活性的酶-金纳米复合物(HRP-IgG-AuNPs),将其应用于酶联免疫分析(ELISA)方法中,建立了一种高灵敏检测DON的纳米金增强ELISA方法。该方法的检测灵敏度(IC50)为0.28 ng/mL,检测范围为0.01~10 ng/mL。与传统ELISA方法相比,该方法的灵敏度提高约13倍,且方法准确度高、成本低,具有良好的应用前景。; 蔡娜沈佳史巧巧; 关键词：呕吐毒素金纳米颗粒酶联免疫分析

检测血清癌症抗原量的等离子体共振显色酶联免疫分析法: 本发明属于生物医学检测技术领域，具体涉及一种检测血清癌症抗原量的等离子体共振显色酶联免疫分析法。本发明方法是将待测样品和HRP酶标记物置于微孔板内培育后进行固液相分离，使酶标记物结合部分和游离部分分离，向酶标记物结合部分...; 许东李乐邓圣旺陈轶

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