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用分子转染细胞的方法、组合物、试剂盒及应用: 本发明涉及一种用分子转染细胞的方法、组合物、试剂盒及应用，所述方法包括以下步骤：向细胞中添加用于转染的分子；和调节细胞中蛋白激酶C(PKC)的活性和/或提供包含约5个至约20个组氨酸残基的pH响应性肽。; 詹姆斯·狄克逊

用于转染细胞的组合物和方法: 本公开涉及可在基因疗法应用中用作安全且无毒的核酸转染剂的支化聚合物和聚合复合物。; L·卡特勒W·王

一种电转染细胞活性测定方法与装置: 本发明提供一种电转染细胞活性测定方法与装置。该方法包括：通过光学显微镜获取电转染细胞悬液图像；将电转染细胞悬液图像分别进行高斯平滑处理和离散小波变换，对应得到粗尺度图像I<Sub>c</Sub>和细尺度图像I<Sub>f...; 刘念刘彦涂海燕

一种阳性转染细胞亲和分选方法及试剂盒: 本发明涉及一种阳性转染细胞亲和分选试剂盒及方法。为了克服难转染细胞中基因递送效率低的难题，本发明提供了一种亲和细胞分选系统，可有效分选转染阳性细胞。本发明构建了一系列可靶向定位细胞膜外表面的细胞亲和纯化标签，在转染阳性的...; 黄启来杨乐乐马树敏左晴晴崔莉方

高效转染细胞的慢病毒及其制备方法和用途: 本发明属于生物化学和生物医学技术领域，具体涉及一种高效转染细胞的慢病毒及其制备方法和用途。针对现有慢病毒对细胞的转导效率仍然具有进一步提高的空间，特别是，对T淋巴细胞的转导效率较低，并且仍缺乏成本低、安全性好、转染效率高...; 仝爱平钟坤宏张宗梁王国庆杨念王曾陈永东卢华庆王昊翔徐龙周良学

阳离子多聚体DNA复合物及促进目标质粒转染细胞及表达的方法: 本发明公开了一种阳离子多聚体DNA复合物及促进目标质粒转染细胞及表达的方法。所述阳离子多聚体DNA复合物是由辅助DNA与带正电荷的细胞转染试剂孵育形成。所述方法包括：以包含目标基因的质粒、辅助DNA与阳离子多聚体共孵育后...; 邵嘉红谭靓谈鹏程李泰明

EIF4A3 shRNA慢病毒载体的构建及其稳定转染细胞系的建立: 2024年; 目的:构建真核细胞翻译起始因子4A3(EIF4A3)-短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体,建立Neuro-2a-EIF4A3-shRNA稳定转染细胞系。方法:通过美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库检索EIF4A3基因序列,设计并合成PCR鉴定引物,并将其连接至经EcoRⅠ和AgeⅠ酶切的慢病毒GV493载体,构建GV493-EIF4A3-shRNA慢病毒质粒,PCR筛选阳性克隆并测序鉴定。将GV493空载质粒和GV493-EIF4A3-shRNA重组质粒分别转染至HEK293T细胞中,分别为GV493对照慢病毒和GV493-EIF4A3-shRNA慢病毒,转染48 h后收集慢病毒进行包装并测定病毒滴度。将Neuro-2a细胞分为空白组、GV493对照组和GV493-EIF4A3 shRNA组,空白组不作处理,GV493对照组和GV493-EIF4A3 shRNA组分别采用相应慢病毒感染Neuro-2a细胞,慢病毒感染复数(MOI)为100,使用10 mg·L-1嘌呤霉素筛选成功感染慢病毒的Neuro-2a细胞,荧光显微镜观察各组Neuro-2a细胞的生长状态和绿色荧光表达情况;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测各组Neuro-2a细胞中EIF4A3 mRNA及蛋白表达水平。结果:PCR测序结果显示GV493-EIF4A3-shRNA重组质粒基因序列与设计合成的EIF4A3-shRNA序列一致,成功构建GV493-EIF4A3慢病毒载体。荧光显微镜观察可见HEK293T细胞荧光表达强烈,生长状态良好,慢病毒包装成功。GV493-对照慢病毒和GV493-EIF4A3-shRNA慢病毒的滴度均为2×10~8 TU·mL^(-1),GV493对照组和GV493-EIF4A3 shRNA组Neuro-2a细胞生长状态良好且表达绿色荧光,表明慢病毒感染稳定细胞系构建成功。RT-qPCR法,与空白组和GV493对照组比较,GV493-EIF4A3shRNA组Neuro-2a细胞EIF4A3mRNA表达水平明显降低(P<0.01)。Western blotting法,各组在相对分子质量49000处出现特异性条带,提示Neuro-2a细胞中EIF4A3蛋白表达成功;与空白组和GV493对照组比较,GV493-EIF4A3 shRNA组Neuro-2a细胞中EIF4A3蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:成功构建GV493-EIF4A3-shRNA慢病毒载体,建立了Neuro-2a-EIF4A3-shRNA; 何嘉文李友廖科棋李胜男; 关键词：短发夹RNA 慢病毒

GPx6过表达慢病毒载体和稳定转染细胞系的构建: 2024年; 为了建立稳定表达谷胱甘肽过氧化物酶6(Glutathione peroxidase 6,GPx6)的真核表达细胞系,对GPx6进行基因克隆,构建慢病毒表达载体,建立表达猪源GPx6的CHO-K1细胞系.根据NCBI数据库中的猪GPx6基因的c DNA序列,利用Primer5设计PCR扩增引物.在猪附睾组织中克隆出6His-GPx6基因,构建含有6His-GPx6的慢病毒过表达载体,利用三质粒包装系统进行慢病毒包装,慢病毒侵染CHO-K1细胞,进一步筛选获得阳性单克隆细胞系,通过免疫荧光、蛋白印迹和实时荧光定量确定目的基因表达效果.试验成功克隆出6His-GPx6基因,构建了含有6His标签的GPx6过表达慢病毒载体,并成功获得了含有GPx6的CHO-K1细胞系.为下一步研究GPx6在猪繁殖力的提高和精液稀释液添加剂的应用提供新思路.; 陈云宋文静蓝珊珊卫恒习李莉张守全; 关键词：慢病毒转染

超支化阳离子聚合物作为转染细胞的核酸递送载体: 描述了超支化阳离子聚合物。所述聚合物采用4‑支化单体，由于额外的支化单元，导致官能末端基团数量增加，从而在不同细胞类型(包括aADSC、HeLa、Neu7和RDEB角质形成细胞)中提供出色的转染效率和细胞相容性，并提供不...; 王文新阿斯根 I·拉拉赛斯徐倩 J·奥基夫埃亨周德重

超声穿孔转染细胞的方法: 本发明公开了一种超声穿孔转染细胞的方法，包括以下步骤：1)培养靶细胞；2)将靶细胞、目的对象和超声造影剂混合于容器中；3)使用超声波作用于所述容器；4)将所述容器在恒温条件下再培养，以使目的对象充分进入靶细胞；其中，目的...; 宋一之郄兴旺马玉婷王策

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