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饲粮维生素E缺乏对雏鸡生长性能及脾脏淋巴细胞凋亡的影响被引量：3: 2023年; 试验旨在研究饲粮中维生素E缺乏对雏鸡生长性能、脾脏组织和脾脏淋巴细胞形态结构、脾脏淋巴细胞凋亡相关蛋白和基因表达水平的影响。选取1日龄雄性雏鸡160羽,随机分为2组,饲粮维生素E缺乏试验组的预混料中不添加维生素E,对照组额外添加维生素E(30 mg/kg),每组各80羽,每组10个重复,每个重复8羽,试验期40 d。结果表明:试验组雏鸡平均日增重低于对照组(P<0.05),耗料增重比高于对照组(P<0.05);试验组雏鸡脾脏组织和脾脏淋巴细胞中维生素E含量低于对照组(P<0.05);试验组雏鸡脾脏组织和脾脏淋巴细胞结构出现损伤;试验组雏鸡脾脏淋巴细胞中Caspase-3活性高于对照组(P<0.05);试验组雏鸡脾脏淋巴细胞中Bcl-2的mRNA表达量低于对照组(P<0.05),p53和Caspase-3的mRNA相对表达量高于对照组(P<0.05)。由此可见,饲粮中维生素E缺乏将导致雏鸡生长性能显著降低;维生素E缺乏通过提高脾脏淋巴细胞中Caspase-3活性,影响Bcl-2、p53和Caspase-3基因表达诱导脾脏淋巴细胞凋亡。; 孟圆伍涵竹苏梦圆俞佳钰李婧娴王奔; 关键词：雏鸡脾脏淋巴细胞

白藜芦醇对热应激诱导肉鸡脾脏淋巴细胞增殖及凋亡的作用研究被引量：6: 2023年; 本试验旨在研究白藜芦醇对热应激诱导肉鸡脾脏淋巴细胞增殖及凋亡的作用。本试验通过分离和消化白羽肉鸡脾脏组织,成功培养出原代淋巴细胞,并能稳定传代。通过构建正常细胞模型(37℃)和热应激细胞模型(42℃培养3 h),培养鸡脾脏淋巴细胞,并分别添加不同剂量的白藜芦醇(15、30、60μg/mL)。运用CCK8法测定热应激对脾脏淋巴细胞存活率的影响;取脾脏淋巴细胞上清液,用乳酸脱氢酶(LDH)法测量LDH活性;采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)染色法检测脾脏细胞凋亡水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测凋亡蛋白的含量;提取总RNA,用实时荧光定量PCR法测量热休克蛋白70(HSP70)基因相对表达量的变化;提取总蛋白,用Western blot法检测HSP70、肿瘤抑制因子53(p53)、凋亡激活因子-1(APAF-1)、肿瘤抑制因子65(p65)、核因子κB抑制蛋白(IκB)、肿瘤抑制因子38(p38)蛋白表达量。结果表明:热应激处理导致淋巴细胞增殖显著下降(P<0.05),LDH活性显著增加(P<0.05)。用15、30、60μg/mL白藜芦醇处理脾脏淋巴细胞并热应激培养时,细胞增殖呈剂量依赖性增加(P<0.05),LDH活性显著下降(P<0.05)。热应激会造成淋巴细胞凋亡和损伤,添加白藜芦醇后显著降低了细胞凋亡率(P<0.05)。热应激导致淋巴细胞的p53含量和p53蛋白表达量显著增加(P<0.05),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)含量显著降低(P<0.05),Bcl-2相关X蛋白(Bax)含量显著增加(P<0.05)。热应激时添加或正常条件下添加白藜芦醇会使Bcl-2含量显著增加(P<0.05),Bax含量显著降低(P<0.05),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Caspase 9)含量显著降低(P<0.05),APAF-1的蛋白表达量显著降低(P<0.05)。热应激时添加白藜芦醇对p53蛋白表达量没有显著影响(P>0.05)。综上所述,白藜芦醇可以剂量依赖性增加细胞增殖、减轻细胞凋亡等,从而减轻热应激导致的脾脏淋巴细胞的损伤�; 刘峰成孟田田郅可欣龚番文李泽政陈乐乐贺建华; 关键词：白藜芦醇热应激脾脏淋巴细胞凋亡

茶树菇多糖对小鼠脾脏淋巴细胞免疫调节的影响被引量：3: 2023年; 【目的】试验旨在揭示茶树菇多糖(Agrocybe aegerita polysaccharid,AAP)对小鼠脾脏淋巴细胞免疫调节的影响,为阐明AAP的作用机制及其临床应用提供依据。【方法】以小鼠脾脏淋巴细胞为研究对象,用噻唑蓝(MTT)比色法测定AAP对淋巴细胞的安全浓度,以安全浓度进行后续试验;用MTT法检测不同浓度AAP对小鼠脾脏淋巴细胞增殖的影响,同时设置细胞、脂多糖(LPS)和植物血凝素(PHA)3个对照组,筛选出对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力较强的浓度,用流式细胞仪检测其对T淋巴细胞亚型CD4^(+)/CD3^(+)和CD8^(+)/CD3^(+)比值的影响,利用ELISA法检测其对淋巴细胞上清液中白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)含量的影响。【结果】低于1000μg/mL AAP对小鼠脾脏淋巴细胞不产生毒性作用。与对照组相比,不同浓度AAP均可极显著协同LPS和PHA刺激淋巴细胞增殖(P<0.01);125和250μg/mL AAP可极显著提高CD4^(+)/CD3^(+)和CD8^(+)/CD3^(+)比值(P<0.01),显著或极显著升高淋巴细胞分泌的细胞因子IL-2、IL-4、TNF-α和IFN-γ含量(P<0.05;P<0.01)。【结论】AAP可协同LPS和PHA刺激小鼠脾脏淋巴细胞增殖,提高淋巴细胞表面CD4^(+)/CD3^(+)和CD8^(+)/CD3^(+)比值及淋巴细胞释放细胞因子的能力,进而提高机体免疫功能。; 陆辉蔡高峰武彩红邱树磊袁橙陈晓兰刘芸覃凯莉; 关键词：小鼠淋巴细胞免疫调节

低强度脉冲超声抑制脓毒症大鼠脾脏淋巴细胞的凋亡被引量：2: 2023年; 目的探讨低强度脉冲超声(LIPUS)对脓毒症SD大鼠脾脏淋巴细胞凋亡的抑制效应及可能机制。方法通过盲肠结扎穿刺术建立脓毒症SD大鼠模型,将78只雌性SD大鼠随机分为超声组(LIPUS,n=26)、盲肠结扎穿刺组(CLP,n=26)和假手术组(Sham,n=26)。超声参数如下:声强200 mW/cm^(2),辐照时间20 min,频率0.37 MHz。观察各组大鼠术后72 h内的存活情况;苏木精-伊红染色法观察脾脏淋巴细胞的数量变化;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法和流式细胞术检测脾脏淋巴细胞凋亡情况;免疫组化、蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR检测线粒体凋亡通路B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)的蛋白及mRNA的表达水平。结果Sham组72 h内全部存活,LIPUS组的存活率显著高于CLP组(P<0.05);与CLP组相比,LIPUS组脾脏淋巴细胞凋亡率显著降低(P<0.05),Bcl-2的蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0.05),Bax及Caspase 3的蛋白及mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。结论LIPUS可能通过调节线粒体通路上的关键分子(Bcl-2、Bax及Caspase 3)抑制脓毒症SD大鼠脾脏淋巴细胞凋亡,提高其72 h内存活率、延长存活时间。; 唐文韬邓娟贺思程李君粉周艺情王嫣; 关键词：低强度脉冲超声脓毒症凋亡线粒体通路

苦丁茶冬青多糖对小鼠脾脏淋巴细胞的免疫调节和抗氧化作用被引量：6: 2022年; 本文通过体外培养小鼠脾脏淋巴细胞研究苦丁茶冬青多糖对正常小鼠脾脏淋巴细胞免疫调节和抗氧化作用的影响。测定了不同浓度的苦丁茶冬青多糖(polysaccharide from Ilex kudingcha C.J.Tseng)对脾脏淋巴细胞体外增殖能力、抗氧化酶(SOD、T-AOC、GSH-Px和CAT)活力、丙二醛(MDA)含量及炎性细胞因子(TNF-α、IFN-γ和IL-1β)分泌水平的影响。结果显示,小鼠脾脏淋巴细胞的增殖与苦丁茶冬青多糖浓度呈正相关,在80和160μg/mL浓度时,吸光度值分别为0.38和0.41,与空白对照组(0.31)相比具有极显著差异(P<0.01);SOD、T-AOC、GSH-Px和CAT活力随苦丁茶冬青多糖浓度的增加而增强,浓度为160μg/mL时,抗氧化酶活力分别为4.54 U/mg蛋白、1.06 mmol/mg蛋白、799.01 mU/mg蛋白和806.85 U/mg蛋白,与空白对照组相比具有极显著性差异(P<0.01);此外,与空白对照组相比,苦丁茶冬青多糖显著降低MDA含量、促进NO分泌和促进脾脏淋巴细胞分泌TNF-α、IFN-γ和IL-1β。本研究结果表明苦丁茶冬青多糖可通过促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖、增强细胞抗氧化能力及诱导炎性细胞因子分泌等发挥其免疫增强活性,该研究可为苦丁茶冬青的开发和利用提供理论支撑。; 舒翔舒翔王辉王辉谭乐和朱红英朱科学; 关键词：脾脏淋巴细胞免疫调节

葛根素对急性肝衰竭小鼠脾脏淋巴细胞亚型和肝脏炎症反应的影响被引量：3: 2022年; 目的探究葛根素对急性肝衰竭(ALF)小鼠脾脏淋巴细胞亚型和肝脏炎症反应的影响。方法60只8~10周龄C57/BL6雄性小鼠按照随机数字表法分为对照组(正常小鼠,腹腔注射等量的0.9%氯化钠溶液),ALF组(ALF模型小鼠,腹腔注射等量的0.9%氯化钠溶液),葛根素治疗组(ALF模型小鼠,腹腔注射100 mg·kg^(-1)·d^(-1)剂量的葛根素),每组各20只,持续治疗10 d。脾脏和胸腺称重计算小鼠的脾脏和胸腺指数;通过稀释后的小鼠血清的吸光度值计算血清半数溶血值(HC50);MTT测定小鼠外周血中T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定小鼠血清细胞因子[γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-4、IL-17A和IL-10]水平;全自动Aeroset化学分析仪评估小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBil)水平;蛋白质印迹法检测小鼠肝组织信号传导子和转录活化子1(STAT1)、STAT3和半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的蛋白表达。结果ALF组小鼠的脾脏指数和胸腺指数较对照组降低,差异均有统计学意义(P<0.05);葛根素治疗组脾脏指数和胸腺指数较ALF组升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。ALF组小鼠HC50较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05);葛根素治疗组小鼠HC50较ALF组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。ALF组T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖较对照组降低,差异均有统计学意义(P<0.05);葛根素治疗组T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖较ALF组升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。ALF组小鼠血清IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-17A水平较对照组均升高,血清IL-10水平较对照组降低,差异均有统计学意义(P<0.05);葛根素治疗组血清IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-17A水平较ALF组均降低,IL-10水平较ALF组升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。ALF组小鼠血清ALT、AST和TBil水平较对照组均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);葛根素治疗组血�; 张伟李万军杜芬; 关键词：小鼠急性肝衰竭葛根素脾脏淋巴细胞炎症反应

多房棘球蚴感染相关miR-26a-5p靶基因的鉴定及其对脾脏淋巴细胞凋亡的影响: 多房棘球绦虫的中绦期幼虫(多房棘球蚴)感染人和动物引起的多房棘球蚴病,严重威胁着人类健康和畜牧业的发展。micro RNAs(miRNAs)是一类具有转录后调控功能的非编码小RNA,在调节细胞发育和激活免疫反应等方面扮演...; 仲顺虎; 关键词：多房棘球蚴 EZH2 脾脏淋巴细胞

按不同时间方案注射的乙肝免疫球蛋白与乙肝疫苗对小鼠脾脏淋巴细胞亚群的影响被引量：2: 2022年; 目的:观察按不同时间方案注射的乙肝免疫球蛋白(HBIG)与乙肝疫苗对小鼠脾脏淋巴细胞亚群的影响。方法:饲养BALB/c小鼠120只(雌雄各60只),将小鼠按HBIG与第1针乙肝疫苗接种时间间隔分为三组(0周组、2周组、4周组),每组小鼠按接种的乙肝疫苗剂量分为2个亚组(1μg组、2μg组)。每只小鼠于第0周注射50 IU HBIG。所有小鼠于第3针乙肝疫苗接种后4周分离脾脏淋巴细胞,使用流式细胞仪检测淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、CD3−CD19^(+))比例。结果:0、2、4周组比较,两亚组(1μg、2μg)显示,与体液免疫相关的CD3−CD19^(+)B淋巴细胞所占比例在雄、雌鼠4周组中均分别高于0、2周组,差异有统计学意义;与细胞免疫相关的T淋巴细胞及其亚群(CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+))均未显示4周组高于其他两组。乙肝疫苗1μg组、2μg组比较,在雄、雌鼠中均显示4周组中2μg组CD3−CD19^(+)B淋巴细胞所占比例高于1μg组(P<0.05)。与细胞免疫相关的T淋巴细胞亚群未显示出2μg组高于1μg组的趋势。结论:小鼠注射HBIG的前提下,推迟接种乙肝疫苗及增加乙肝疫苗剂量有利于B淋巴细胞的增殖,推迟接种乙肝疫苗对T淋巴细胞亚群比例无明显影响。; 闫柳柳王爽张晓魏涛韩迪张磊; 关键词：乙肝免疫球蛋白乙肝疫苗淋巴细胞脾脏 BALB/C小鼠

骆驼刺酸性多糖对小鼠脾脏淋巴细胞免疫增强作用的研究被引量：6: 2022年; [目的]本文旨在探讨骆驼刺酸性多糖(acidic Alhagi sparsifolia Shap polysaccharide,aASP)对小鼠脾淋巴细胞的免疫增强作用。[方法]采用醇沉法提取骆驼刺多糖,采用柱层析法对骆驼刺多糖进行分离及纯化,采用苯酚硫酸法、硫酸-咔唑法和BCA微孔酶标仪法,检测糖、糖醛酸和蛋白含量,采用红外光谱法鉴别多糖性质。采用MTT法确定aASP对小鼠脾脏淋巴细胞的安全浓度,在安全浓度范围内500、125和31.25μg·mL^(-1)3个浓度下检测单独、协同脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和植物血凝素(phytoheamagglutinin,PHA)对脾淋巴细胞的增殖效果;流式细胞术检测aASP对淋巴细胞亚群分化的影响;ELISA法检测aASP对淋巴细胞细胞因子分泌的影响。[结果]骆驼刺多糖提取物中多糖含量为(81.8±1.2)%,糖醛酸含量为(17.34±0.75)%,蛋白含量为(0.54±0.08)%;红外光谱显示aASP在1746.53 cm^(-1)处有较强的吸收峰,结合糖醛酸含量判定aASP为酸性多糖。高、中、低浓度的aASP均可促进脾脏淋巴细胞增殖,协同LPS和PHA能够更显著促进B细胞和T淋巴细胞的增殖(P<0.05)。流式细胞术和ELISA检测结果显示aASP能够促进CD4^(+)和CD8a^(+)T细胞的分化,并促进脾淋巴细胞分泌IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-4。[结论]aASP可以增强小鼠脾脏淋巴细胞的增殖,诱导小鼠脾脏T淋巴细胞产生Th1(helper T lymphocyte 1)及Th2(helper T lymphocyte 2)混合型免疫应答,免疫细胞偏向CD4^(+)T细胞分化。; 特列克·阿依恒别克赛福丁·阿不拉萨比热·热夏提况玲德力拜尔·木拉提阿得力江·吾斯曼; 关键词：脾脏淋巴细胞免疫增强

小鼠Skint6基因突变对脾脏淋巴细胞亚群的影响: 2022年; 目的:制备Skint6基因突变小鼠模型,探究Skint6基因突变对小鼠脾脏各淋巴细胞亚群的影响。方法:利用CRISPR/Cas9技术定点突变小鼠Skint6基因,高分辨率熔解曲线(HRM)和DNA测序鉴定Skint6基因突变小鼠(B6-Skint6^(M));取6月龄B6-WT小鼠和B6-Skint6^(M)小鼠,qRT-PCR检测小鼠皮肤Skint6基因mRNA水平,考马斯亮蓝G-250法测定小鼠尿蛋白水平;计算小鼠体质量、脾脏指数和总细胞数并通过流式细胞术(FACS)检测其脾脏中各淋巴细胞亚群比例并计算细胞绝对数。结果:DNA测序结果显示B6-Skint6^(M)小鼠模型制备成功;qRT-PCR结果表明Skint6基因突变不影响皮肤Skint6 mRNA表达。B6-Skint6^(M)小鼠尿蛋白含量明显高于B6-WT小鼠(P<0.05)。Skint6基因突变对小鼠体质量、脾脏指数无显著影响(P>0.05)。FACS结果表明,与B6-WT组小鼠相比,B6-Skint6^(M)小鼠脾脏细胞数及淋巴细胞数明显增多(P<0.01);CD3^(+)T细胞比例及细胞绝对数明显上升(P<0.01,P<0.05),CD19^(+)B细胞比例下降(P<0.05);CD3^(+)T淋巴细胞亚群中CD8^(+)T细胞比例降低(P<0.01),双阴性T细胞(DNeg)比例及细胞绝对数明显上升(P<0.01,P<0.05);CD4^(+)CD69^(+)活化T细胞比例及细胞绝对数上升(P<0.05,P<0.01),CD4^(+)CD44^(hi)T细胞比例及细胞绝对数上升(P<0.01);Treg比例及细胞绝对数明显下降(P<0.001);Tfh细胞比例及细胞绝对数上升(P<0.05);Breg比例及细胞绝对数上升(P<0.05);CD3^(+)T淋巴细胞亚群中非典型CD3^(+)B220^(+)T细胞比例及其细胞绝对数增高(P<0.001)。结论:Skint6基因突变不影响皮肤中Skint6 mRNA表达,但可影响小鼠脾脏淋巴细胞亚群比例、细胞绝对数和活化状态,从而引起小鼠免疫功能紊乱。; 王惠战倩穆高航李秀峰王艺璇徐志伟鞠吉雨; 关键词：系统性红斑狼疮淋巴细胞亚群

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