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一种用于猪胸膜肺炎放线杆菌病的生物制剂: 本发明提供了一种用于猪胸膜肺炎放线杆菌病的生物制剂，属于猪胸膜肺炎放线杆菌病治疗技术领域。本发明发现大花旋覆花素能够有效的抑制猪胸膜肺炎放线杆菌，并发现其能够破除猪胸膜肺炎放线杆菌生物被膜，抑制猪胸膜肺炎放线杆菌对于猪肺...; 胡莉萍黄河闫雪耿爽李鑫黄金发潘雯瑶

猪胸膜肺炎放线杆菌灭活亚单位联合疫苗及应用: 本发明属于生物技术及兽用疫苗领域，具体涉及猪胸膜肺炎放线杆菌灭活亚单位联合疫苗及应用。所述的疫苗包括：SEQ ID NO.1所示的rApxⅠ蛋白、SEQ ID NO.2所示的rApxⅡ蛋白和灭活的猪胸膜肺炎放线杆菌，所述...; 王湘如魏文彬王泽松刘洪硕贾超莹付霁阳杨瑞成金言成陈焕春

胸膜肺炎放线杆菌 tadF 基因缺失株构建及生物学特性研究: 2025年; 为探究tadF基因对胸膜肺炎放线杆菌(App)生物学特性及毒力的影响,研究基于App血清1型4074株,通过两步单交换同源重组及正负向筛选,构建tadF基因缺失株,并测定亲本株和缺失株生长曲线、侧翼基因表达水平、生物被膜形成能力、细胞黏附入侵能力和对小鼠的致病力。结果显示,成功构建tadF基因缺失株4074ΔtadF,该基因缺失对App生物被膜形成能力和侧翼基因表达水平无显著影响,但缺失株增殖速度慢于亲本株,tadF基因缺失显著降低App对PAM细胞的黏附入侵能力(P<0.05),亲本株黏附入侵能力为缺失株的1.75倍;对小鼠致病力检测结果显示,缺失株对小鼠的LD 50是亲本株的2.5倍,表明tadF基因缺失株对小鼠致病力下降。说明胸膜肺炎放线杆菌tadF基因缺失导致App增殖变慢,并降低其对细胞黏附入侵能力和对小鼠的毒力,为App黏附素作用机制研究提供参考。; 熊威振冀笑明任豆豆梁萱魏雨婷崔国林许金朋; 关键词：胸膜肺炎放线杆菌黏附素生物学特性

一种胸膜肺炎放线杆菌双重外毒素基因LAMP-LFD检测试剂盒: 本发明公开了一种胸膜肺炎放线杆菌双重外毒素基因LAMP‑LFD检测试剂盒，涉及分子生物检测技术领域。该试剂盒包括一种引物组合；该引物组合包括用于检测靶标apxⅠ基因的LAMP内引物对和用于检测靶标apxⅣ基因的LAMP内...; 周俊明李彬范一聪祝昊丹王丹丹倪艳秀范宝超胡屹屹何孔旺

猪胸膜肺炎放线杆菌通过Adh诱导猪肺泡巨噬细胞氧化应激: 2025年; 【背景】猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)可导致严重的肺脏炎性损伤。细胞氧化应激与肺脏炎性损伤密切相关,但是APP感染和细胞氧化应激之间的关系仍不清楚。【目的】明确APP感染和细胞氧化应激之间的关系并对其机制进行初步探索,从而为进一步阐明APP致病机理奠定基础。【方法】APP野生菌5b(5b WT)和Adh基因缺失菌(5bΔAdh)分别感染猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM)后,荧光显微镜观察细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,RT-qPCR和Western blotting检测氧化应激相关分子的表达变化,利用NLRP3炎性体抑制剂MCC950处理细胞,分别感染5b WT和5bΔAdh后,生化反应法检测细胞内乳酸和丙酮酸含量,流式细胞术检测细胞内ROS水平及线粒体膜电位变化情况;采用tandem mass tag(TMT)标记定量蛋白质组学测序分析细胞蛋白表达变化并检测线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)的释放情况。【结果】免疫荧光和流式细胞术检测结果均显示,5b WT组ROS水平明显高于5bΔAdh组,但经MCC950处理后可以逆转这一上升趋势;生化指标检测结果表明,相较于5bΔAdh组,5b WT组的丙酮酸和乳酸的含量下降更显著,而且经过MCC950抑制NLRP3活性后,细菌感染组的丙酮酸和乳酸的含量均有显著回升,与对照组无显著差异;5b WT和5bΔAdh感染后,猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM)中氧化应激关键转录因子核转录因子红系2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)和GCLM均呈现出下降的趋势;Western blotting结果表明5b WT和5bΔAdh组烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(nicotinamide adenine dinucleotide oxidase 2,NOX2)含量增高,并且5b WT组含量升高更明显;蛋白质组学分析表明共有15个蛋白的表达出现显著变化,GO分析发现这些差异蛋白主要参与ATP代谢、嘌呤代谢、炎症等重要生物学过程,KEGG分析发现这些蛋白与炎�; 尹小丽文博王瑞彪胡建和张鑫赫白跃宇丁轲丁轲王艳辉王磊; 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌猪肺泡巨噬细胞 ADH 活性氧线粒体损伤

猪胸膜肺炎放线杆菌临床分离株特性分析及疫苗候选菌株筛选: 2025年; 【目的】分析胸膜肺炎放线杆菌(APP)临床分离株的优势血清型,获得疫苗候选菌株。【方法】从国内疑似分离株中鉴定获得53株APP菌株,鉴定各菌株血清型及评价其生物学特性后,利用大蜡螟和小鼠模型筛选评估有价值的疫苗候选菌株。【结果】53株APP中血清型占比由高到低依次为1、7、15、5型,各菌株在体外生长存活能力强,具有不同程度的溶血活性。MIC结果显示,分离菌株对氟苯尼考敏感度较低,而对头孢类药物高度敏感。用大蜡螟和小鼠模型从每个血清型菌株中各筛选到一株高毒力候选菌株。其中,1型菌株制备的灭活疫苗能够以小于商品化疫苗中1型菌株1/5的剂量,保护100%同血清型攻毒小鼠存活。同时,商品化疫苗中缺乏的15型菌株制备的灭活疫苗对同血清型攻毒小鼠保护率为66.7%,高于商品化疫苗的保护率。【结论】本研究筛选获得高毒力的优势血清型1、5、7、15型菌株各一株,根据免疫剂量和免疫保护率分析,其中的1型菌株和15型菌株有开发为新疫苗候选菌株的潜力。; 陈虹宇朋璐张娇韩未尧汤细彪宋文博黄超金卉周锐黎璐; 关键词：胸膜肺炎放线杆菌临床分离株血清型猪传染性胸膜肺炎

猪胸膜肺炎放线杆菌OmpD、LppB蛋白的原核表达及免疫原性分析: 2025年; 本研究旨在评价猪胸膜肺炎放线杆菌OmpD和LppB蛋白的免疫原性和保护效果。通过同源性分析,发现19个血清型的APP均含有ompD和lppB基因,氨基酸序列相似性分别为98.2%~100%和99.3%~100%。利用基因工程大肠杆菌表达纯化了1型菌株的rOmpD和rLppB蛋白,并进行了免疫原性分析。结果显示,两种蛋白均能有效表达,与猪康复血清反应明显。小鼠免疫rOmpD、rLppB蛋白后,ELISA抗体水平显著提高,对国内流行的1型、7型菌株攻毒保护率为70%~80%。进一步制备含rOmpD和rLppB的油乳剂,免疫仔猪后,ELISA抗体水平显著提高,对1型、7型菌株攻毒具有部分保护作用和交叉保护能力,但未能完全阻止感染和死亡。因此OmpD、LppB有作为APP亚单位疫苗开发候选抗原的潜力,本研究为进一步开发具有良好交叉保护效果的疫苗提供了数据支持。; 曾焱欧祥龙闫晓阳刘灿廖永洪; 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌免疫原性免疫效果

一种猪临床病料中胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定培养基及其制备方法: 本发明涉及一种猪临床病料中胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定培养基及其制备方法，属于微生物培养领域。现有技术中用于猪临床呼吸道感染病料中胸膜肺炎放线杆菌分离的培养基多为常规的普通TSA或改良TSA培养基，其难以将胸膜肺炎放线杆菌...; 李蓓蓓马志永聂万森夏利宁李宗杰邱亚峰魏建超刘珂邵东华

一种可避免假阴性检测结果的猪胸膜肺炎放线杆菌恒温检测引物组及其应用: 本发明公开了一种可避免假阴性检测结果的猪胸膜肺炎放线杆菌恒温检测引物组及其应用，包括xerD检测引物组和内标引物组，所述检测引物组是以猪胸膜肺炎放线杆菌xerD基因为靶基因的LAMP引物组，包括核苷酸序列如SEQ ID ...; 曹炜伟黄百祺刘助红梁宝霞续倩谢文敏

猪源ISG15蛋白通过促进炎症因子释放和巨噬细胞死亡加剧胸膜肺炎放线杆菌感染: 2025年; 【背景】猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)感染引起的一种呼吸道疾病,该病死亡率可达80%–100%。干扰素刺激基因15(interferon-stimulated genes 15,ISG15)蛋白可抑制病毒的复制,但其在APP方面的研究尚不清楚。【目的】构建猪源ISG15原核表达载体,纯化ISG15蛋白并研究其对APP感染的影响。【方法】构建pET-28a-ISG15原核表达载体,纯化获得ISG15蛋白。采用流式细胞术和实时荧光定量PCR法检测ISG15蛋白处理后肺泡巨噬细胞死亡情况和炎症因子表达水平。建立APP感染小鼠模型,鼻内给药ISG15后,检测小鼠体重、临床症状及存活情况,分析ISG15对APP致病性的影响。【结果】获得了ISG15蛋白。相较于单独攻菌组,ISG15添加组的肺泡巨噬细胞死亡率、炎症因子IL-6和IFN-γ表达水平均显著升高(P<0.05)。在小鼠试验中,相较于单独攻菌组,中剂量和高剂量ISG15组小鼠的临床症状及死亡率显著上升,肺组织IL-6、IFN-γ和IL-1β表达水平显著增加。【结论】ISG15通过促进肺泡巨噬细胞死亡和炎症因子的释放加剧APP的感染,为APP防治技术的研发提供了理论基础。; 甘林文宇田岩岩张开心李丰阳雷连成李娜; 关键词：胸膜肺炎放线杆菌 ISG15 炎症因子巨噬细胞

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