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一种胰岛样细胞团及其制法和应用: 本发明提供了一种人工培养的胰岛样细胞团，其特征在于，所述细胞群由干细胞分化而得，在未经富集的情况下同时中包含：(a)胰岛β细胞占20％～90％；和(b)胰岛α细胞占5％～70％；以及由人多能干细胞培养获得所述的胰岛样细胞...; 程新肖伊妮

共培养条件下大鼠骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞团的研究: 2022年; 目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)与胰岛细胞共培养体系下分化为胰岛样细胞团的可能性。方法无菌条件下从Wistar大鼠的股骨及胫骨分离纯化BMSCs,流式细胞仪检测BMSCs表面标志物CD_(44)和CD_(90)表达;行成骨方向及成脂肪方向诱导分化,采用茜素红染色和油红O染色对诱导后的细胞进行鉴定。分离纯化大鼠胰腺的胰岛细胞,采用双硫腙染色鉴定。使用ELISA法检测胰岛细胞培养液的基础胰岛素水平;分别加入含葡萄糖5.6 mmol/L(低糖)和25.0 mmol/L(高糖)的培养液,ELISA法检测胰岛素释放量。取第5代BMSCs和胰岛细胞,随机分为干细胞单独培养组(干细胞组)、干细胞-胰岛细胞共培养组(共培养组)及胰岛细胞单独培养组(胰岛组),使用倒置相差显微镜观察各组BMSCs的形态学变化;使用ELISA法检测各组基础胰岛素分泌量及高、低葡萄糖刺激后胰岛素释放量;免疫细胞化学染色法检测共培养组诱导形成的胰岛样细胞团的胰岛素蛋白表达;透射电镜观察胰岛样细胞超微结构。结果BMSCs表面标志物CD_(44)和CD_(90)的阳性率分别为99.48%、99.50%,经成骨方向诱导分化形成多个钙结节,经成脂肪方向诱导分化胞质内形成较多脂滴。双硫腙染色显示胰岛中β细胞呈棕红色,每个胰腺可获得胰岛约450个,平均纯度达80%。低糖、高糖组刺激后胰岛的胰岛素释放量分别为(7.105±1.551)mIU/ml和(20.231±1.592)mIU/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。共培养组培养7 d后,见局部干细胞开始聚拢并以出芽的方式向上生长成小团块,直至最后形成球形的胰岛样细胞团结构。干细胞组基础胰岛素分泌量<0.5 mIU/L;胰岛组培养5 d胰岛素分泌量达峰值,随后逐渐下降,13 d时降至最高值的20%;共培养组胰岛素水平在5 d时达到峰值,13 d时仍维持在峰值水平的40%左右,胰岛组与共培养组8、10、13 d基础胰岛素分泌量差异有统计学意义(P值均<0.05),但; 刘鑫岑妍慧贾微杨瑞李森姜娜黄泽萍宁志莹黄威; 关键词：骨髓间充质干细胞胰岛共同培养技术细胞分化胰岛样细胞团

一种胰岛样细胞团及其制法和应用: 本发明提供了一种人工培养的胰岛样细胞团，其特征在于，所述细胞群由干细胞分化而得，在未经富集的情况下同时中包含：(a)胰岛β细胞占20％～90％；和(b)胰岛α细胞占5％～70％；以及由人多能干细胞培养获得所述的胰岛样细胞...; 程新肖伊妮

包含胰岛样细胞团的制剂: 本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及包含胰岛样细胞团的制剂。本发明提供了包含胰岛样细胞团的制剂及其制备方法，该制剂可降解，在显微镜下可见微球形态完整，粒径分布均匀。将该微球在体外培养，可发现微囊内干细胞扩增，并开始逐渐形...; 王立坚赵钢王竑婷

包含胰岛样细胞团的制剂: 本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及包含胰岛样细胞团的制剂。本发明提供了包含胰岛样细胞团的制剂及其制备方法，该制剂可降解，在显微镜下可见微球形态完整，粒径分布均匀。将该微球在体外培养，可发现微囊内干细胞扩增，并开始逐渐形...; 王立坚赵钢王竑婷

雷公藤多糖诱导胰腺干细胞成胰岛样细胞团（英文）被引量：1: 2018年; 背景:胰岛细胞来源不足说明胰岛细胞移植治疗糖尿病不能满足临床需要。因此,体外诱导胰腺干细胞分化为胰岛细胞成为研究的热点。目的:观察雷公藤多糖对小鼠胰岛来源的胰腺干细胞的诱导分化作用,从而探索中药诱导胰腺干细胞分化为胰岛β细胞的作用。方法:采用雷公藤多糖体外诱导经纯化的小鼠胰腺干细胞分化为胰岛细胞。胰岛样细胞团进行形态学观察,双硫腙染色和Western blot分析。结果与结论:①细胞形态学、细胞生长特性及免疫细胞化学染色显示,实验不仅得到了纯度高的小鼠胰腺干细胞,而且该细胞经雷公藤多糖诱导后能形成球形的胰岛样结构,有细长的蒂与培养瓶底部相连,双硫腙染色呈铁红色;②Western-blot检测显示,胰岛样细胞团中有β细胞素蛋白的表达;③结果表明,小鼠胰腺干细胞可以体外经雷公藤多糖诱导分化为含有β细胞的胰岛样细胞团。; 岑妍慧李中华李中华贾微杨瑞何国珍何国珍吴晓君钟静石磊; 关键词：胰腺干细胞胰岛样细胞团免疫细胞化学染色 Β细胞素

诱导人脐带MSCs分化为胰岛样细胞团的促成熟方案及机制被引量：4: 2013年; 目的:通过各种生物化学制剂的不同组合在体外诱导人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)向胰岛样细胞团(ILCs)分化,筛选出能表达激素原转化酶(PC)1和PC2的促成熟方案。方法:用胶原酶Ⅱ消化、过滤离心和不完全消化传代的方法从人的完整脐带中分离和纯化hUC-MSCs,流式细胞术、RT-PCR和免疫细胞荧光技术检测其干细胞标志物。选用A、B、C 3种方案诱导hUC-MSCs向ILCs分化:方案A为含10μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、10μg/L表皮生长因子(EGF)、10 mg/L银杏提取液(GBE)及2%胎牛血清(FCS)的高糖培养基IM-DM;在方案A基础上加入10μg/L尼克酰胺为方案B;在方案B基础上加入10μg/L肝细胞生长因子(HGF)为方案C。在hUC-MSCs诱导前后,通过倒置显微镜观察其形态变化,采用RT-PCR、qPCR和Western blotting检测胰岛相关mRNA和蛋白,特别是PC1和PC2的表达情况。结果:(1)细胞形态、表面相关抗原、干细胞特异基因的表达等情况表明hUC-MSCs可以从人脐带中被成功地分离和纯化;hUC-MSCs普遍表达nestin,轻微表达Isl1。(2)RT-PCR检测发现方案A诱导的ILCs有Glut-2和MafA mRNA表达,方案B诱导的ILCs有Glut-2、MafA、Nkx6.1和PC2mRNA表达,方案C诱导的ILCs有Glut-2、MafA、Nkx6.1、PC2、Ngn3、Pdx1、PC1和胰岛素mRNA表达,提示A、B和C3种方案诱导的细胞有逐渐成熟的趋势。qPCR检测也证实了PC1 mRNA仅在方案C中有表达,PC2 mRNA在方案B和方案C中均有表达,但方案C中PC2 mRNA的表达量显著高于方案B(P<0.01);Western blotting结果也表明PC1蛋白只在方案C中有表达;PC2酶原(ProPC2)与PC2在方案B和方案C中都有表达,且它们在方案C中的表达量均显著高于方案B(P<0.01)。结论:(1)hUC-MSCs具有向胰岛祖细胞或胰岛细胞分化的潜能;(2)方案C中尼克酰胺和HGF可促进hUC-MSCs向ILCs分化,使ILCs表达PC1并上调PC2;相对于方案A和B,方案C是一种促成熟方案。; 苏仲春陈家劲王圳陈志明王跃春; 关键词：脐带间充质干细胞胰岛样细胞团

PuraMatrix水凝胶三维培养对人脐带MSCs向胰岛样细胞团分化的影响: 目的：在二维培养条件下用单纯生物学制剂诱导人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）向胰岛样细胞团（ILCs）分化，筛选出能表达激素原转换酶PC1和PC2的最佳诱导方案；在PuraMatrix (PM)水凝胶中对hUC-MS...; 苏仲春; 关键词：胰岛样细胞团间充质干细胞脐带

三维环境下肌源性干细胞分化为胰岛样细胞团: 2013年; 目的：运用三维细胞培养模型研究细胞外微环境对肌源性干细胞分化为胰岛样细胞的作用。方法：用差速贴壁的方法对SD大鼠肌源性干细胞进行分离和培养,将细胞分为胶原支架化学诱导剂组,化学诱导剂组,空白组。分别观察诱导后细胞的生长形态,采用双巯腙DTZ染色鉴定胰岛素分泌细胞,细胞免疫化学检测胰岛相关蛋白,RTPCR方法检测诱导后细胞的相关基因表达情况,葡萄糖刺激实验检测胰岛样细胞成熟度。结果：在普通光镜下,胶原支架化学诱导剂组中诱导的胰岛样细胞团体积比化学诱导剂组大得多;双巯腙DTZ染色结果显示胶原支架化学诱导剂组比化学诱导剂组能诱导更多的胰岛样细胞;细胞免疫化学检测胶原支架化学诱导剂组诱导的胰岛样细胞更类似于成年大鼠胰岛组织;RTPCR方法检测胶原支架化学诱导剂组表达胰岛相关基因比化学诱导剂组高。结论：三维环境下肌源性干细胞可诱导分化为胰岛样细胞,并且大鼠肌源性细胞可大量快速分化为更成熟的胰岛样细胞。; 殷甜甜刘畅梅晰凡王滢丽; 关键词：肌源性干细胞胶原支架胰岛样细胞

体外诱导胰腺干细胞向胰岛样细胞团的分化被引量：1: 2012年; 背景:目前由于胰岛来源匮乏,使得胰岛细胞移植治疗糖尿病无法满足临床需求,故体外将胰腺干细胞诱导分化为胰岛成为研究焦点。目的:于体外将小鼠胰腺干细胞诱导成胰岛样细胞团并对其进行相关检测,探寻一种胰腺干细胞体外诱导分化成胰岛及鉴定的技术和方法。方法:体外获得纯化的小鼠胰腺干细胞,采用联合诱导剂对其进行成胰岛方向的诱导分化,并对诱导形成的胰岛样细胞团进行形态学观察、双硫腙染色、RT-PCR和Western blot检测。结果与结论:实验通过细胞形态学和细胞生长特性的观察以及免疫细胞化学染色证实体外成功获得了小鼠胰腺干细胞,采用联合诱导剂将其诱导成胰岛样结构,呈球形,以较细长的蒂部与瓶底连接,双硫腙染色将其染成铁红色。RT-PCR和Western blot法可分别检测到胰岛样细胞团的胰岛素mRNA和胰岛素蛋白。结果证实小鼠胰腺干细胞可体外诱导分化成含β细胞的胰岛样细胞团。; 岑妍慧谢小薰陈维平何国珍黄波郭文文肖燕子; 关键词：胰腺干细胞胰岛样细胞团干细胞培养小鼠

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