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- 肠出血性大肠杆菌O157
- 肠出血性大肠杆菌O157是牛肠中的大肠杆菌，用携带O157的牛肉做菜时，手上也会残留O157。如果蔬菜和其他食物被这只手接触到，同样会附着上O157。小朋友很可能在不知不觉中吃下这些食物，引发疾病。本书主要讲解了肠出血性...
- （日）冈田晴惠文
- 关键词：大肠杆菌
- 一株猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7的全基因组测序及毒力和耐药基因分析
- 2025年
- [目的]分析一株猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1的全基因组信息及其毒力和耐药基因。[方法]基于Nanopore三代测序技术平台和Illumina二代测序技术平台对猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1进行全基因组测序,利用Prokka软件预测基因组序列信息,并通过UniProt、KEGG、KEGG Pathway、GO、Pfam、COG、TIGERfams、RefSeq和NR数据库进行基因预测和注释,再利用碳水化合物酶(CAZy)、病原与宿主互作(PHI)、毒力因子(VFDB)和耐药基因(CARD)数据库进行基因功能分析。[结果]肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1基因组大小为5404747 bp,GC含量为50.49%,该菌株含有3个质粒;共预测到5674个蛋白质编码基因,包含22个rRNA(7个23S rRNA、7个16S rRNA、8个5S rRNA)、1个tmRNA、102个tRNA基因和282个小RNA分子;预测出9个CRISPR序列、273个重复序列;KEGG、KEGG Pathway、NR、UniProt、GO、COG、Pfam、RefSeq和TIGERfams数据库分别注释到1712、1693、5265、5264、4029、4294、4688、5252和2741个基因;CAZy数据库注释筛选出100个基因,PHI数据库注释筛选出2354个基因,VFDB数据库注释筛选出的毒力基因主要包括菌毛、鞭毛、Ⅱ型分泌系统、Ⅲ型分泌系统、Ⅵ型分泌系统、紧密黏附素、铁转运系统、脂多糖、荚膜、侵袭素和外毒素;CARD数据库注释筛选出的耐药基因与多重耐药外排泵、大环内酯类抗生素、四环素、多粘菌素、{37}肽、氨基糖苷类抗生素、肽类抗生素及甲硝唑相关。[结论]获得一株肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1全基因组序列,序列分析表明该菌株携带大量毒力基因与耐药基因。
- 周艳万启旸朱树娇张辉包红朵王冉
- 关键词：全基因组测序基因功能注释
- 食品中肠出血性大肠杆菌O157∶H7的检测技术研究进展被引量：4
- 2024年
- 近年来,因食源性致病菌造成的食品中毒正在不断增加,严重威胁了人类的健康,大肠杆菌(E.coli)O157∶H7由于其低感染剂量和高致病性等特点引起了研究人员和世界卫生组织的高度重视。因此精准快速的检测食品中的E.coli O157∶H7对食品安全问题有着重要的意义,是预防和控制食源性疾病传播的重要技术,为此本文对E.coli O157∶H7的常规检测方法、免疫学法、分子生物学法和其他方法进行论述,介绍了这些方法的优缺点,对各种方法进行了整体比较,以期为有关工作者在选择检测方法或研发新方法提供参考。
- 周炳武于泽闫兆伦刘雨涵侯嘉欣刘晓倩谢婧宜刘晔
- 关键词：食源性致病菌食品安全
- 表达肠出血性大肠杆菌O157 O-抗原重组减毒沙门菌的构建及其免疫效果评价
- 2024年
- 为构建表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157 O-抗原的重组减毒鼠伤寒沙门菌,本研究以EHEC O157基因组为模板,采用PCR分3段扩增O157 O-抗原基因簇(galF~gnd),并采用同源重组技术将EHEC O157 O-抗原基因簇与含asd基因的pSL2161线性化片段重组,构建表达EHEC O157 O-抗原的重组质粒pSL2161-O157并经PCR与测序鉴定正确后电转化4基因缺失沙门菌ATCC14028ΔcrpΔcyaΔasdΔrfbP,构建表达EHEC O157 O-抗原的重组减毒沙门菌O157-ATCC14028ΔcrpΔcyaΔasdΔrfbP,经PCR及测序鉴定。采用裂解法粗提野生型鼠伤寒沙门菌ATCC14028、EHEC O157与构建的重组减毒沙门菌种中的脂多糖(LPS),采用western blot鉴定上述3种菌中的LPS与EHEC O157 O-因子血清的反应性,并根据该重组菌与野生菌株ATCC14028的OD600nm值测定二者的体外生长能力。PCR与测序鉴定结果显示,重组减毒沙门菌正确构建。Western blot结果显示,重组减毒沙门菌和野生型EHEC O157的粗提LPS均能够与EHEC O157 O-因子血清反应,出现LPS特异性的梯状条带,ATCC14028株与O157 O-因子血清无反应条带。生长曲线结果显示,重组减毒沙门菌与ATCC14028株的生长速度无明显差异。表明EHEC O157 O-抗原基因簇在4基因缺失沙门菌中获得了表达,且该表达与4基因的缺失均不影响沙门菌的体外生长能力。采用首免-加强免疫策略对ICR小鼠分别口服免疫重组减毒沙门菌和4基因缺失沙门菌,二免后13 d采用间接ELISA检测各组小鼠血清中LPS的IgG抗体水平,利用荧光定量PCR(qPCR)检测各组小鼠脾细胞中细胞因子的转录水平。二免后14 d采用10 LD_(50)的EHEC O157攻毒,15 d内观察并记录各组小鼠的临床症状与死亡率,评估该重组菌株对免疫小鼠的保护效果。ELISA与q PCR结果显示,与阴性对照组和4基因缺失沙门菌免疫组相比,重组减毒沙门菌诱导小鼠产生的针对EHEC O157与ATCC14028 LPS的IgG抗体水平均极显著升高(P<0.001、P<0.01);该组小鼠
- 陈歆丹张晓荟高宇杰王温馨葛同鑫宋厚辉韩月程昌勇
- 关键词：减毒沙门菌O-抗原免疫保护
- 没食子酸对肠出血性大肠杆菌O157:H7生物膜群体感应调控机制
- 张承慧
- 基于分子生物学方法的食品中肠出血性大肠杆菌O157∶H7检测技术研究进展
- 2024年
- 对检测大肠杆菌O157∶H7(E.coli O157∶H7)的预富集技术和聚合酶链式反应(PCR)技术、等温扩增技术、基于成簇规律间隔短回文重复序列及相关蛋白质系统(CRISPR/Cas)的技术等分子生物学方法进行论述,介绍了这些方法在E.coli O157∶H7检测中的研究进展,并对其检出限和靶基因等进行了比较,以期为E.coli O157∶H7的快速检测提供参考依据。
- 孙千雪周炳武王婷蔡琳雅胡珊珊刘晔
- 关键词：食源性致病菌
- 基于多组学联合分析研究柠檬醛对肠出血性大肠杆菌O157:H7的抑菌机制
- 周昌倩
- 重组酶介导的肠出血性大肠杆菌O157:H7等温扩增方法的建立被引量：5
- 2022年
- 目的:建立新的快速检测常见食源性致病微生物肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic E.coli,EHEC)O157:H7的方法。方法:根据EHECO157:H7保守区序列,结合重组酶介导的恒温扩增(recombinase-aided amplification,RAA)和荧光定量或胶体金侧向流免疫层析试纸条(lateral flow dipstick,LFD),建立两种EHEC O157:H7检测方法(RAA荧光法和RAA-LFD法)并进行优化,评估这两种方法的灵敏性及特异性。结果:两种检测方法均可在39℃恒温条件下16 min内完成检测,两种方法的检测限均可达1×10~4拷贝数,具有较高的灵敏性。两种方法与其他常见的肠道致病菌(金黄色葡萄球菌、沙门氏杆菌、弯曲菌、耶尔森菌、志贺杆菌)质粒模板无交叉反应,具有良好的特异性。结论:本研究建立的两种检测EHEC O157:H7的方法,检测时间短并具有较好的特异性、灵敏性和重复性,可用于EHEC O157:H7的快速检测。
- 蔡欣王源林赵杰匡衡孙学伟刘宗财崔茜杨展汪茂荣
- 关键词：RAA
- 肉桂精油对肠出血性大肠杆菌O157:H7生长及代谢特征影响的研究
- 植物精油,也叫植物源抗菌保鲜剂,一直被公认为,具有低毒、安全、广谱的抗菌性,主要包括香辛材料和从中草药中提取的物质,在食品中精油可以作为调味剂添加。但是,关于植物精油的具体的抗菌机制,尚不清晰完整,所以,这个问题在很大程...
- 费莹莹
- 关键词：肉桂精油肠出血性大肠杆菌O157:H7抗菌机制代谢组学
- 肉桂精油抑制肠出血性大肠杆菌O157∶H7活性研究被引量：6
- 2022年
- 肠出血性大肠杆菌O157∶H7(Entero{7}emorr{7}agic Esc{7}eric{7}ia coli 157∶H7,EHEC O157)因具有生长繁殖快,污染途径广泛,高染病率和高致病率的特点成为最常见的食源性病菌之一。为探究肉桂精油对EHEC O157细胞膜特性和呼吸代谢的影响。以EHEC O157为研究对象,用不同浓度的的肉桂精油处理,37℃恒温振荡培养。结果显示,肉桂精油对EHEC O157的最小抑菌浓度(minimum in{7}ibitory concentration,MIC)为0.0004 g/L。随精油处理时间的延长,菌液中核酸和蛋白质含量,β-半乳糖苷酶含量均逐渐上升;蛋白质含量,碱性蛋白酶(alkaline protease,AKP)活性逐渐下降;琥珀酸脱氢酶(succinate de{7}ydrogenase,SDH)活性先上升后下降。综上表明,肉桂精油对EHEC O157表现出良好的抑菌性,可以破坏菌体细胞膜,改变细胞膜表面特性,导致细胞膜通透性变大,胞内大分子物质流出,最终影响三羧酸循环。希望该研究为精油抑菌机制向分子层面深入拓展提供有效的理论依据。
- 费莹莹张珍陈雪琴李雯
- 关键词：肉桂精油呼吸代谢抑菌
