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绵羊钙网蛋白对兔外周血单个核细胞Th1/Th2和Th17/Treg免疫平衡的影响
2025年
旨在探讨绵羊钙网蛋白(PsoCRT)对健康新西兰兔外周血单个核细胞(PBMC)Th1/Th2和Th17/Treg免疫平衡的影响。采用RT-PCR技术从绵羊混合阶段虫体总RNA中扩增得到去除信号肽的PsoCRT基因,经原核表达、纯化后得到重组蛋白(rPsoCRT);分别以5、10、20、40、80μg·mL^(-1)rPsoCRT刺激兔PBMC,利用荧光定量PCR检测细胞中Th1/Th2、Th17/Treg主效细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-17A、IL-10)和关键转录因子(T-bet、GATA-3、RORc、Foxp3)的转录水平。结果显示:PsoCRT基因全长1 254 bp,属于典型的钙网蛋白家族;原核表达获得重组蛋白rPsoCRT大小约64 ku,可促进兔PBMC中Th1细胞IFN-γ和T-bet转录水平的升高,但抑制Th2细胞IL-4转录,而对GATA-3转录无影响,导致IFN-γ/IL-4和T-bet/GATA-3比值升高,平衡向Th1发生偏移;Th17细胞IL-17A和Treg细胞Foxp3 mRNA转录水平下降,而IL-10和RORc转录水平无显著变化,导致IL-17A/IL-10和RORc/Foxp3比值降低,平衡向Treg发生偏移。综上,PsoCRT可引起兔PBMC中Th1/Th2和Th17/Treg主效细胞因子和转录因子转录水平失衡,导致宿主免疫平衡偏向Th1和Treg免疫应答。
李艳娥梁友萍樊洁吴芳燕尧香悦李毛却乎次仁仓决郝桂英古小彬
关键词:绵羊痒螨钙网蛋白TH1/TH2TH17/TREG免疫平衡
绵羊重组丝氨酸蛋白酶抑制剂对小鼠银屑病样皮肤炎症的影响
2024年
课题组前期发现绵羊的重组丝氨酸蛋白酶抑制剂4和5(recombinant serine protease inhibitors 4 and 5,r Pso SP4和r Pso SP5)可体外抑制糜蛋白酶、胰蛋白酶和弹性蛋白酶的活性,因此推测其可能具有抗炎活性,为证实上述推测,评价了r Pso SP4和r Pso SP5是否可以改善小鼠银屑病样皮肤炎症。BALB/c小鼠随机分为5组,用凡士林或咪喹莫特乳膏(imiquimod cream,IMQ)连续涂抹背部皮肤6 d,建立空白对照组和银屑病模型,期间模型组每日皮内注射PBS(IMQ组)或pET32a(+)载体蛋白(IMQ+pET32a(+)组)或r Pso SP4(IMQ+r Pso SP4组)或r Pso SP5(IMQ+r Pso SP5组),每天观察小鼠银屑病样皮损区变化,于第7天处死小鼠,比较各组皮损组织病理变化和皮损组织中IL-1β、IL-6和TNF-α的转录水平。结果表明:IMQ造模成功,小鼠呈现典型的银屑病样皮损;与模型组(IMQ组)相比,IMQ+r Pso SP4组可有效改善小鼠银屑病样皮损,包括显著抑制小鼠体重减轻(第4~6天,P<0.05,P<0.01,P<0.001)和皮损区红斑(第5~6天)、鳞屑(第4~6天)、皮肤增厚程度(第4~6天)及PASI评分(第3~6天)显著减少(P<0.05,P<0.001)。此外,与IMQ组相比,IMQ+r Pso SP4组皮损区组织病理损伤显著减轻,表皮厚度显著降低(P<0.05),浸润的炎性细胞数量极显著减少(P<0.001),皮损区IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA水平极显著降低(P<0.001,P<0.0001),而IMQ+r Pso SP5组对小鼠银屑病样皮损无明显改善。综上,r Pso SP4可显著改善小鼠银屑病样皮损,具有显著的抗炎活性,而r Pso SP5的抗炎活性不明显。
田焱杨富升李艳娥梁友萍樊洁吴芳燕古小彬
关键词:绵羊痒螨
绵羊重组精氨酸激酶诱导兔皮肤嗜酸性粒细胞的聚集
2023年
本研究旨在探究绵羊精氨酸激酶(arginine kinase of Psoroptes ovi s,Pso AK)对兔皮肤嗜酸性粒细胞聚集的影响。以永生化角质形成细胞(HaCaT)和致敏兔分别为体外模型和体内模型,重组Pso AK(r Pso AK)分别刺激HaCaT细胞和皮内注射致敏兔后,采用RT-qPCR检测重组蛋白处理后HaCaT细胞和注射部位兔皮肤组织中与嗜酸性粒细胞聚集相关因子(IL-4、IL-5、IL-13、TSLP、IL-25、IL-33、CCL5、CCL11、IL-4R)转录水平,以及通过变色酸2R特殊染色观察,并统计兔皮肤组织中聚集的嗜酸性粒细胞数量。结果表明,与空白和载体蛋白对照组相比,0.1μg·mL^(-1)r Pso AK可显著促进HaCaT细胞中IL-13、IL-33、CCL5和CCL11转录水平的增加(P<0.05),以及兔皮肤内IL-4R和CCL5转录水平的增加(P<0.01),其他因子无显著变化(P>0.05);同时,与PBS和载体蛋白对照组相比,r Pso AK可诱导皮肤中嗜酸性粒细胞的数量极显著增加(P<0.001)。综上所述,Pso AK能够促进部分嗜酸性粒细胞聚集相关细胞因子和趋化因子转录水平的增加,且诱导兔皮肤内嗜酸性粒细胞的聚集,表明Pso AK是引发病皮损区嗜酸性粒细胞聚集的抗原分子,其参与了绵羊感染的致病过程。
黄翠锐郝桂英周宇田焱杨富升唐丽杨光友谢跃何冉徐璟古小彬
关键词:绵羊痒螨皮肤
绵羊重组原肌球蛋白对角质形成细胞生物学功能的影响及其致敏性评价
绵羊(Psoroptes ovis)是多种家养和野生动物皮肤表面的常见外寄生虫,可引起宿主出现消瘦、瘙、结痂和皮肤增厚等为特征的过敏性皮肤病,严重损害动物福利以及给养殖业带来巨大经济损失。课题组前期的转录组学揭示,...
黄翠锐
关键词:绵羊痒螨原肌球蛋白原核表达角质形成细胞致敏性
绵羊病的诊断及防治
2022年
绵羊病是由寄生在绵羊体表所引起的慢性皮肤病,该病会引起绵羊皮肤剧、骚动不安、采食量减少、体重下降,降低养殖效益。新疆昌吉牧区主要以养殖绵羊为主,牧民多在偏远的草场放牧,该病短时间内可感染整群羊,小群发病如果没有及时发现,将延误病情,导致该病的蔓延和流行,给牧民造成较大的经济损失。因此,掌握绵羊病的诊断和防治方法,对防控该病具有积极意义。
林小能
关键词:绵羊痒螨
绵羊半胱氨酸蛋白酶抑制剂的应用以及一种ELISA试剂盒
本发明涉及生物技术领域,公开了绵羊半胱氨酸蛋白酶抑制剂作为病和/或疥病诊断抗原等一系列相关应用,相关实验结果显示,绵羊半胱氨酸蛋白酶抑制剂能被患病以及疥病的阳性兔血清识别,表明具有反应原性;同时在以重...
古小彬王策谢跃杨光友何冉彭雪蓉
绵羊重组巨噬细胞迁移抑制因子诱导兔皮肤嗜酸性粒细胞聚集
绵羊(Psoroptesovis)是寄生于家养和野生动物皮肤表面的一种常见外寄生虫,其具有高度传染性,给养殖业造成严重经济损失,同时危害野生动物的生存。P.ovis引起的皮肤损伤是宿主的主要病变,皮损区呈现以嗜酸性粒...
葛优
关键词:绵羊痒螨巨噬细胞迁移抑制因子
绵羊兔亚种MMP2基因的转录水平及其重组蛋白间接ELISA的建立被引量:1
2022年
本研究旨在分析绵羊兔亚种MMP2基因(PocMMP2)的虫体转录水平,及建立针对重组PocMMP2(rPocMMP2)蛋白抗体的间接ELISA检测方法(iELISA)。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定PocMMP2在不同发育阶段虫体、饱食与饥饿虫体的转录水平,采用原核表达系统获得rPocMMP2,经方阵滴定法优化反应条件,建立rPocMMP2-iELISA,并用该方法检测成都地区有病流行病史兔场的86份兔血清。结果显示:PocMMP2在雌虫、雄虫、若虫和幼虫阶段均有表达,且在饥饿虫体的转录水平显著高于饱食虫体(P<0.05);rPocMMP2约72 ku,主要存在于包涵体中;rPocMMP2-iELISA临界值为0.223,敏感性和特异性分别为86.0%和83.3%,受试者工作曲线下面积(AUC)为0.876,批内与批间重复性变异系数均小于10.00%;该方法的临床检测呈现74.42%的血清阳性检出率(64/86),高于病原学检出率(10.47%,9/86)。PocMMP2可能参与了绵羊兔亚种发育和入侵宿主过程,且所建立的rPocMMP2-iELISA有良好的敏感性、特异性和较高的重复性,可用于兔病的血清抗体检测。
葛优郑晶蒲善秋周宇黄翠锐杨光友谢跃何冉徐璟古小彬
关键词:MMP2转录水平间接ELISA
绵羊两种热休克蛋白(PsoHSP20和PsoHSP60)的组织定位及其重组蛋白的间接ELISA方法建立
病是由绵羊(Psoroptesovis)寄生于家养(以兔、绵羊和水牛最常见)和野生动物体表的一种重要外寄生虫病,患病动物以脱毛、消瘦、结痂和剧为主要特征,给养殖业带来巨大的经济损失,同时严重损害动物健康影响生存...
蒲善秋
关键词:绵羊痒螨HSP60重组蛋白间接ELISA
绵羊病临床症状与防治措施被引量:1
2021年
绵羊病是养殖绵羊过程中主要病害种类之一,对于绵羊养殖以及绵羊健康产生不利影响。因此,在绵羊养殖过程中,应该注重对绵羊病进行有效的预防和治疗,确保绵羊养殖更加健康。本文分析绵羊病疾病临床症状,发病病因,并提出绵羊病预防和治疗措施。
杨鹏
关键词:绵羊痒螨病临床症状

相关作者

陈志蓉
作品数:54被引量:97H指数:6
供职机构:新疆农垦科学院
研究主题:绵羊 绵羊痒螨 绵羊痒螨病 痒螨病 寄生
古小彬
作品数:203被引量:322H指数:9
供职机构:四川农业大学动物医学院
研究主题:蛔虫 原核表达 大熊猫 绵羊痒螨 细粒棘球绦虫
杨光友
作品数:470被引量:1,053H指数:15
供职机构:四川农业大学动物医学院
研究主题:大熊猫 细粒棘球绦虫 反应原性 蛔虫 原核表达
谢跃
作品数:115被引量:94H指数:5
供职机构:四川农业大学动物医学院
研究主题:蛔虫 大熊猫 反应原性 绵羊痒螨 高敏感性
徐雪萍
作品数:39被引量:87H指数:5
供职机构:新疆农垦科学院
研究主题:绵羊 绵羊痒螨 药浴 弓形虫病 弓形虫