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卵泡体外三维培养系统研究进展被引量:1
2023年
卵泡体外培养对癌症治疗导致的卵巢功能下降患者的生育力保护有重要意义,也是研究卵泡发育和卵子发生的一种有效方法。卵泡体外培养需要建立能够较好模拟体内生长环境的体外培养系统,目体外卵泡培养系统大致分为二维培养系统和三维培养系统。卵泡二维培养系统已在啮齿动物模型中成功建立。由于三维培养可以满足卵泡生长所需的空间结构,其培养效果优于二维培养,广泛用于各种动物模型卵泡的培养。三维培养系统可分为支架形式培养系统与无支架形式培养系统,有无支架以及支架材料的选择对卵泡体外发育有直接影响。支架材料根据来源可分为天然材料和合成材料,天然材料如海藻酸盐、胶原蛋白和纤维蛋白等在生物相容性上优于合成材料,但合成材料的可调节性使其具有良好景。综述三维培养系统选择对卵泡体外发育的影响。
李延胡方方陈欢欢张磊张翠莲梁琳琳(审校)
关键词:卵泡卵母细胞细胞培养技术生育力
小鼠卵泡二维体外培养法的优化研究
2020年
目的优化小鼠卵泡二维体外培养体系,探讨卵泡刺激素(FSH)对小鼠卵泡体外发育的影响。方法将分离自14 d雌鼠的初级卵泡(80~100μm)和早期次级卵泡(110~130μm)分别培养在浓度为10、100 mU/ml r-FSH的培养液中,观察并记录卵泡体外生长情况和卵母细胞的成熟情况;检测并分析第10天卵泡的空间生长情况及不同培养液中卵泡的雌二醇(E2)分泌水平;Western blotting检测卵泡中FSH受体(FSHR)、类固醇激素合成限速酶3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)、17α-羟化酶(CYP17)及芳香化酶(CYP19)的表达水平。结果初级卵泡在10、100 mU/ml r-FSH培养液中的成腔率(0.00%±0.00%,36.14%±4.02%)及卵母细胞成熟率(0.00%±0.00%,23.54%±7.62%)明显低于早期次级卵泡成腔率(78.63%±4.13%,92.74%±2.54%)及卵母细胞成熟率(48.55%±3.73%,80.88%±4.02%),差异有统计学意义(P<0.05);在100 mU/ml r-FSH培养液中的早期次级卵泡成腔率(92.74%±2.54%)、卵母细胞成熟率(80.88%±4.02%)明显高于在10 mU/ml r-FSH培养液中的卵泡成腔率(78.63%±4.13%)及成熟率(48.55%±3.73%),差异有统计学意义(P<0.05);早期次级卵泡在10 mU/ml r-FSH的培养液中呈平铺式生长模式,而在100 mU/ml r-FSH培养液中呈立体空间生长模式,后者更接近于体内卵泡的生长模式;早期次级卵泡中FSHR的相对表达水平明显高于初级卵泡(1.86±0.32 vs.1.19±0.28,t=4.94,P<0.05)。100 mU/ml r-FSH培养液中早期次级卵泡卵泡3b-HSD、CYP17及CYP19的表达以及E2的分泌水平明显高于用10 mU/ml r-FSH培养液培养时。结论FSH不仅会影响卵泡的体外发育率,还会改变卵泡的体外发育模式。选择早期次级卵泡培养在含100 mU/ml r-FSH的二维培养液中培养可获得理想的卵泡发育率及发育模式。
王喜艳潘晓燕孙艳美吴迪史沛德王富
关键词:卵泡刺激素卵泡刺激素受体
子宫内膜异位症大鼠卵泡卵泡和凋亡卵泡数目及血清性激素水平变化被引量:2
2019年
目的探讨子宫内膜异位症大鼠血清性激素水平和卵泡发育及凋亡情况。方法取36只雌性SD大鼠,随机分为对照组(未进行处理)、假手术组(开腹后用丝线缝扎)和实验组(建立子宫内膜异位症模型),三组各12只。造模3周后,取实验组大鼠病灶组织,行苏木精-伊红染色,评价病理学改变,判断模型是否成功。取三组大鼠腹主动脉血,采用放射免疫法检测大鼠血清性激素的水平;取大鼠双侧卵巢组织,行TUNEL染色,并比较三组卵泡卵泡和凋亡卵泡数目。结果实验组成功建立子宫内膜异位症模型,成模率为100.00%。实验组血清雌二醇水平较对照组和假手术组明显下降(P<0.05);而三组血清孕酮、促黄体生成激素(LH)和促卵泡生成激素(FSH)比较,均无显著性差异(P>0.05)。实验组卵泡卵泡数较对照组和假手术组明显减少,凋亡卵泡数较对照组和假手术组明显增多(P<0.05);而对照组与假手术组卵泡卵泡和凋亡卵泡数比较,均无显著性差异(P>0.05)。结论通过建立子宫内膜异位症大鼠模型可知,子宫内膜异位症可导致雌二醇水平降低,对孕酮、LH和FSH水平无显著影响,可促使大鼠卵泡卵泡数减少,诱导大鼠卵泡凋亡,对其卵泡发育造成极大的影响。
宋丽华俞梦春冯艳红师帅李勤
关键词:子宫内膜异位症性激素卵泡发育
BMSCs在卵泡体外培养中的作用研究及3D培养体系的构建
第一部分:BMSCs在卵泡体外培养中的作用研究  【目的】:观察 BMSCs 在卵泡体外培养中的作用。  【方法】:获取2周龄小鼠卵泡,和 BMSCs 在 transwell 小室内体外共培养为BMSCs共培...
陈礼
关键词:窦前卵泡化学发光免疫分析法
牛卵巢组织卵泡的冻存方法及不同培养体系对始基卵泡活性的影响
随着癌症早期诊疗水平的提高以及放化疗技术的进步,年轻女性癌症患者的生存率显著增加。但放化疗可能造成女性生育能力的下降甚至丧失,故在放化疗保存生育能力的问题变得尤为重要。卵巢组织冷冻保存并移植已经被认为是保存生育能力的有...
贾琪
关键词:卵巢组织窦前卵泡冻存方法
两种冷冻方法对牛卵巢组织卵泡活性的影响
2017年
目的:探讨两种冷冻方法对牛卵巢组织卵泡活性的影响。方法:取新鲜的牛卵巢组织随机分为新鲜对照组、程序化冷冻组和玻璃化冷冻组,分别加入Liberase DH酶消化,然后挑取卵泡并分类计数,用calcein AM以及ethidium homodimer对卵泡进行荧光染色,鉴定卵泡的活性。结果:3组各级卵泡的数量及分布差异无统计学意义(P=0.765);与新鲜对照组(91%)相比,程序化冷冻组和玻璃化冷冻组卵泡中未受损卵泡所占比例(80%和78%)略有降低(P=0.012)。3组中所占比例占优势的始基卵泡中未受损卵泡率差异无统计学意义(P=0.079);与新鲜对照组相比,两冷冻组初级卵泡中未受损卵泡率有所降低(P<0.05),但两冷冻组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:程序化冷冻法和玻璃化冷冻法均能较好地保存卵巢组织卵泡的活性。
王兴玲贾琪刘艳丽刘景郝大勇申春艳赵文杰
关键词:玻璃化冷冻窦前卵泡活性
腺病毒介导Foxo3a基因对顺铂所致的大鼠卵巢颗粒细胞及卵泡损伤的研究
目的:卵巢早衰(Premature Ovarian Failure,POF)是指女性在40岁以发生的以闭经、不育、雌激素缺乏及促性腺激素水平升高为特征的一种疾病。1.克隆大鼠Foxo3a基因并构建大鼠Foxo3a基因腺...
杨玥
关键词:卵巢早衰腺病毒顺铂卵巢颗粒细胞
骨髓间充质干细胞对顺铂所致的大鼠卵泡损伤的保护作用被引量:3
2015年
目的:观察大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)对顺铂(DDP)所致的体外培养大鼠卵泡损伤的保护作用。方法:实验分为3组,每组为30个卵泡。实验组:取第3代MSCs,贴壁生长后,将大鼠卵泡移入培养板内共培养24小时后换液,加入1μg/ml DDP,作用24小时后换新鲜基础培养液;实验对照组:未行MSCs共培养,直接将大鼠卵泡移入培养液中培养,后面方法同实验组;空白对照组:大鼠卵泡移入培养液中培养,不加入DDP。光镜下观察3组卵泡的形态学变化,采用化学发光法分别检测加药后第3、5、7天各组培养液中雌二醇(E2)的浓度。结果:1实验组卵泡第3、5天均存活,第7天仅少数卵泡变黑,但卵母细胞清晰可见;实验对照组卵泡第3天出现退化现象,第7天则完全退化;空白对照组卵泡第3天形态尚规整,但第7天大多数卵泡出现退化现象。2实验组中E2含量随着时间的变化逐渐升高(P<0.05);空白对照组E2含量随着时间的变化逐渐下降(P<0.05);实验对照组E2含量最低,变化不大,3个时间点比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3组间大鼠卵泡培养液中E2含量间有主效应(P<0.05),时间和组别之间存在交互效应(P<0.05)。结论:MSCs对DDP引起的卵泡的损伤可能有保护作用,可恢复并促进卵泡的内分泌功能。
张芍何援利杨宏英
关键词:骨髓间充质干细胞顺铂窦前卵泡雌二醇
小鼠卵泡卵泡膜间质细胞的3种共培养方法比较被引量:2
2014年
目的:探索小鼠卵泡卵泡膜间质细胞体外共培养的最佳模型。方法:分别从14~16日龄和21~25日龄C57BL/6小鼠中分离得到卵泡卵泡膜间质细胞,采用海藻酸钠凝胶法、Transwell间接、直接接触法体外共培养6天,比较各组卵泡形态、生长发育、激素分泌、存活率、卵母细胞成熟阶段。结果:海藻酸钠凝胶中培养的卵泡能够维持其三维结构,观察更清晰,而Transwell中培养的卵泡更有利于颗粒细胞的增殖,第5天时卵泡直径超过三维培养,雌二醇分泌水平与卵泡的生长模式相一致。第5天时海藻酸钠凝胶法(77.3%)和Transwell直接接触法(76.5%)的卵泡存活率要明显高于Transwell间接接触法(57.4%),P〈0.05。3种方法的卵母细胞减数分裂恢复能力间无明显差异。结论:短期(5天内)的体外共培养可以选择Transwell直接接触法,而更长时间的共培养则推荐海藻酸钠凝胶法。
陈原沈薇罗爱月王世宣
关键词:卵泡共培养海藻酸盐TRANSWELL
小鼠卵泡卵泡膜间质细胞的三种共培养方法比较
目的比较小鼠卵泡卵泡膜间质细胞体外共培养的三种模型,通过对卵泡的形态观察、生长发育、存活率、激素分泌和减数分裂恢复能力方面进行评价,探索一种有效、经济、简便的培养系统用于对卵泡卵泡膜间质细胞间相互作用的相关研究。...
陈原
关键词:卵泡共培养TRANSWELL
文献传递

相关作者

张芍
作品数:17被引量:26H指数:3
供职机构:昆明医科大学
研究主题:宫颈癌 窦前卵泡 基因多态性 多态性 顺铂
何援利
作品数:278被引量:1,839H指数:22
供职机构:南方医科大学珠江医院
研究主题:子宫内膜异位症 宫腔粘连 卵巢早衰 腹腔镜 子宫内膜
庄广伦
作品数:343被引量:2,443H指数:24
供职机构:中山大学附属第一医院
研究主题:体外受精 胚胎移植 多囊卵巢综合征 植入前遗传学诊断 卵母细胞
周灿权
作品数:483被引量:2,593H指数:23
供职机构:中山大学
研究主题:体外受精 体外受精-胚胎移植 植入前遗传学诊断 胚胎移植 胚胎
申春艳
作品数:17被引量:39H指数:3
供职机构:郑州大学第三附属医院
研究主题:玻璃化冷冻 胚胎移植 子代 胚胎 卵母细胞