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瘦素基因敲除小鼠的银屑病样皮肤炎症程度较轻被引量：1: 2023年; 目的探究瘦素对咪喹莫特(IMQ)诱导的银屑病样皮肤炎症的影响。方法选用敲除瘦素基因(ob/ob)的肥胖小鼠与正常对照(wt)小鼠各8只,各分为2组,共4组:ob/ob-IMQ、ob/ob-凡士林、wt-IMQ、wt-凡士林,每组4只。ob/ob-IMQ、wt-IMQ组连续6 d使用IMQ(62.5 mg/背部,10 mg/耳朵)诱导银屑病样皮肤炎症,ob/ob-凡士林、wt-凡士林组涂抹相同剂量凡士林,使用总体征评分(TSS)评估小鼠皮损严重程度,通过HE染色探究造模小鼠的炎症表达。使用流式细胞术检测真皮内树突状细胞、巨噬细胞、中性粒细胞以及表皮内gdT/朗格汉斯细胞等炎症细胞水平,qRT-PCR检测皮损组织中IL-6、IL-17、TNF-α、IL-23等mRNA表达水平。结果与wt-IMQ组小鼠相比,ob/ob-IMQ组小鼠临床症状较轻,耳厚度差较小,TSS评分较低(均P<0.001)。HE染色结果显示,ob/ob-IMQ组小鼠的组织炎症程度较wt-IMQ组低。流式细胞术结果提示,ob/ob-IMQ组表皮内gdT/朗格汉斯细胞的比例明显大于ob/ob-凡士林组(t=2.78,P=0.032);wt-IMQ组真皮内巨噬细胞(t=2.64,P=0.038)和中性粒细胞浸润(t=4.87,P=0.008)明显多于wt-凡士林组;但ob/ob-IMQ组与wt-IMQ组表皮、真皮炎症细胞比例未见明显差异(均P>0.05)。qRT-PCR结果显示,ob/ob-IMQ组小鼠IL-6、IL-17 mRNA相对表达水平低于wt-IMQ组(均P<0.05)。结论瘦素可能在肥胖和银屑病共患病的发病过程中起加重作用。瘦素的缺乏抵消了IMQ诱导的银屑病样皮肤炎症。; 佘昕妍欧敏李阳林秀球林俊杰谢凯王晓华; 关键词：银屑病瘦素炎症咪喹莫特

脂滴包被蛋白在非酒精性脂肪性肝病小鼠肝组织中的表达谱及瘦素基因敲除对其的影响: 2023年; 目的探讨不同饮食诱导的非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠肝组织中脂滴包被蛋白(Plin)家族的表达谱及瘦素基因敲除对其的影响。方法实验选用8周龄雄性C57BL/6小鼠53只,按照随机数字表法分组:CDAA对照组和模型组(9周组和15周组)、WD对照组和模型组(2周组、6周组和30周组),除CDAA9周对照组为5只,其余每组6只。选用4周龄雄性ob/ob小鼠12只,按照随机数字表法分组:对照组和模型组,每组6只。对照组给予正常饮食喂养;分别采用胆碱缺乏、L-氨基酸替代蛋白饲料(CDAA)和西方饮食(WD)诱导建立野生型C57BL/6小鼠NAFLD模型;采用WD饮食诱导建立瘦素基因敲除小鼠(ob/ob)NAFLD模型。实时荧光定量PCR法检测肝组织中Plin 2,Plin 3,Plin 4,Plin 5 mRNA的表达,比较不同组之间的差异及瘦素敲除对其的影响。结果正常野生型C57BL/6小鼠的肝组织中可检测出Plin 2,Plin 3,Plin 4,Plin 5四种亚型mRNA的表达;其中Plin 2是主要的亚型,其次为Plin 3、Plin 5,Plin 4的表达量最低。在CDAA饮食诱导的NAFLD模型中,Plin 2表达无显著变化;Plin 3表达在造模15周降低(P<0.05);Plin 4表达在造模9周和15周均升高(P<0.05);Plin 5表达在造模9周和15周均降低(P<0.05)。在WD饮食诱导的NAFLD模型中,野生型小鼠肝组织中Plin 2表达在造模30周增加(P<0.05);Plin 3、5表达无显著变化;Plin 4表达在造模2周、6周和30周均升高(P<0.05)。与野生型小鼠不同,在WD饮食诱导的(ob/ob)小鼠NAFLD模型中,肝脏中Plin 2、Plin 3、Plin 5表达降低(P<0.05);而Plin 4表达无显著变化。结论Plins基因表达谱在不同饮食诱导的NAFLD小鼠肝组织中存在显著差异;瘦素基因敲除抑制NAFLD小鼠肝组织中Plins基因的表达。; 于庆红康碧莲孙祥云齐一菲刘琳丛敏王萍刘天会; 关键词：小鼠非酒精性脂肪性肝病瘦素

新疆褐牛瘦素基因在不同部位中表达水平与肉质指标的关联性被引量：2: 2022年; 【目的】肉品质与物种的遗传因素具有一定的关联性。新疆褐牛瘦素基因在不同部位中表达水平与肉质指标的关联性,为牛肉属性差异的品质标识提供参考。【方法】选取新疆褐牛为研究对象,采用荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术测定新疆褐牛皮下、肌间、肾周、心周4个部位脂肪组织中的瘦素基因(leptin)的表达水平,检测活重、胴体指标、剪切力、蒸煮损失等肉质性状,分析新疆褐牛在这4个部位脂肪组织中leptin基因表达水平与所测肉品质指标的关联性。【结果】新疆褐牛不同部位leptin基因相对表达量由低到高依次为心周脂肪、肾周脂肪、皮下脂肪和肌间脂肪。皮下脂肪组织中leptin表达水平与其背最长肌组织中的剪切力、蒸煮损失、肌内脂肪含量显著正相关,相关系数分别为0.555、0.479、0.474(P<0.05)。【结论】瘦素蛋白在新疆褐牛脂肪组织中内普遍存在,leptin基因可能参与新疆褐牛肉质形成过程,可作为研究新疆褐牛肉质的一个候选基因。; 李红波李娜李娜闫向民崔繁荣张杨; 关键词：瘦素基因新疆褐牛关联性分析肉质

短链菊粉与高脂日粮对瘦素基因敲除小鼠肥胖及肠道微生物区系的影响: 目的:本论文旨在研究短链菊粉与高脂日粮对不同基因型小鼠的生长速率,肥胖、糖代谢能力和盲肠内微生物区系的影响。方法:将8周龄24只雄性瘦素基因敲除小鼠与24只野生型C57BL/6J雄性小鼠分为8组,每组6只同基因型,分别给...; 冯江浩; 关键词：瘦素基因高脂饲料盲肠菌群肥胖

瘦素基因启动的新型脂肪细胞表达Cre工具小鼠的构建被引量：2: 2022年; 脂肪组织是发挥能量储存与内分泌功能的重要代谢组织。脂肪细胞的发育、稳态与病理生理功能是重要的研究方向。空间转录组学研究表明脂肪细胞至少存在3种不同亚型,其标记基因包括瘦素(leptin,LEP)、脂联素(adiponectin,ADIPOQ)、围脂滴蛋白(perilipin-1/4,PLIN)和血清淀粉样蛋白(serum amyloid A,SAA)等。瘦素基因与脂联素基因分别标记了不同亚型的脂肪细胞。目前通常用脂联素基因Adipoq-Cre工具小鼠研究成熟脂肪细胞的生理功能,但缺乏瘦素基因启动的Cre工具小鼠以追踪LEP+亚型脂肪细胞的发育与稳态。本研究通过CRISPR-Cas9技术编辑小鼠Lep基因,形成Lep-P2A-Cre融合基因,其产物通过P2A肽的自剪切作用,解离为LEP与CRE蛋白,从而实现内源Lep基因启动的Cre表达(Lep-Cre)。本研究通过tdTomato示踪工具,分析Lep-Cre在不同脂肪组织与非脂肪组织的活性,结果发现Lep-Cre在白色脂肪和米色脂肪组织中活性最强,其次是棕色脂肪,在下丘脑核团不表达,但在多个外周器官存在不同程度的活性。本研究构建了瘦素基因启动的Lep-Cre工具小鼠,为深入研究LEP+亚型脂肪细胞的发育与功能提供新工具。; 曾帆王澜万小勤黄荣凤张志辉李旻典; 关键词：瘦素脂肪细胞 CRE-LOXP 脂肪组织

瘦素基因多态性对复发性自然流产风险的影响被引量：1: 2021年; 目的:探究瘦素基因多态性与复发性自然流产(RSA)风险的潜在关联性。方法:选取2016年5月-2019年4月来本院就诊的138例复发性流产的患者作为RSA组,选择同期于本院产检的142例正常妊娠妇女为对照组。所有入组研究对象禁饮食,取5 mL外周静脉血,利用高效液相色谱(DHPLC)法测定所有基因型,采用ELISA法测定血清瘦素水平。结果:在Leptin rs7799039 G/A的基因型的多态性中,RSA组的GA+AA型、AA型频率以及A等位基因型频率均高于对照组,GG型频率低于对照组(P<0.05)。在Leptin rs7799039 G/A基因多态性中,RSA组中含有A等位基因和不含非A等位基因的患者,两者的临床表现不同,携带GG基因型患者的严重妊娠反应、妊娠期流产时间(≥3个月)、流产≥3次、与下一次妊娠时间间隔(≥6个月)的发生率均高于GA+AA基因型,差异均有统计学意义(P<0.05)。在对照组中,GG基因型妊娠者的血浆瘦素水平为(4.87±0.36)ng/mL,虽略低于GA+AA基因型的(5.01±0.39)ng/mL,但差异无统计学意义(P=0.101);在RSA组中,携带GG基因型RSA患者的瘦素水平为(6.38±0.45)ng/mL,低于基因型为GA+AA型的(6.77±0.56)ng/mL,差异有统计学意义(P=0.026)。结论:Leptin rs7799039 G/A的A基因突变可以增加RSA的发病风险。; 王春艳王曙光王佳丽; 关键词：高效液相色谱法瘦素基因多态性复发性自然流产

水牛瘦素基因的真核表达及生物学特性分析被引量：1: 2021年; 为研究水牛瘦素(Leptin)的功能,构建leptin基因真核表达载体EGFP-leptin,检测leptin在NIH/3T3细胞中的表达并分析其生物学特性。根据水牛leptin基因序列设计引物,并在上下游引物分别添加HindⅢ和BamHⅠ酶切位点,以pMD18-T-leptin载体为模板,PCR扩增leptin基因,并亚克隆至载体pEGFP-N1,以双酶切和DNA测序鉴定EGFP-leptin重组质粒;然后采用脂质体2000将重组质粒转染到NIH/3T3细胞,经G418筛选,获得稳定转染的细胞株,RT-PCR及Western blot检测EGFP-Leptin融合蛋白表达。动物试验分3组,处理组从小鼠尾静脉注入重组质粒1μg/只,对照组和禁食组注射等体积生理盐水,3 d后称其体质量,采用ELISA法测定小鼠血清中Leptin水平。结果显示,成功构建真核表达载体EGFP-leptin,转染NIH/3T3细胞后出现绿色荧光;RT-PCR和Western blot进一步证实了Leptin表达。动物试验显示,处理组和禁食组小鼠体质量下降速率高于对照组,差异显著(P<0.05),处理组血清Leptin水平高于对照组,差异显著(P<0.05)。以上结果表明,EGFP-leptin能够在NIH/3T3细胞中稳定表达,产生的融合蛋白具有良好的生物学活性。; 李恭贺陈秋玉吴文德郑喜邦; 关键词：水牛瘦素基因真核表达细胞株生物学活性

新疆褐牛瘦素基因第2外显子多态性与肉品质性状的相关性被引量：3: 2021年; 探索Leptin基因多态性与新疆褐牛肉品质的相关性,旨在寻找与新疆褐牛肉品质性状相关分子标记,为新疆褐牛的选育提供分子遗传学理论依据。利用PCR-RFLP方法检测新疆褐牛Leptin基因第2外显子多态性,并分析其与肉质性状的相关性。结果表明,Leptin基因第2外显子E2JW位点存在AA、AT和TT 3种基因型,处于中度多态,E2FB位点有CT和TT 2种基因型,处于低度多态,均为Hardy-Weinberg非平衡状态。相关分析表明:Leptin基因第2外显子E2JW位点与肌纤维直径呈正相关,且相关关系极显著(r=0.435),与胱氨酸含量正相关,且相关关系显著(r=0.410),与蛋氨酸含量呈弱负相关趋势(r=-0.308)。E2FB位点与硬脂酸含量呈正相关趋势(r=0.425)。结果提示E2JW位点有可能成为影响新疆褐牛肉品质性状的分子遗传标记位点。; 孙亚伟加依娜古丽·吐尔逊拜张永鹏闫向民李宏波王金泉姚刚张杨; 关键词：新疆褐牛 LEPTIN基因外显子2 多态性肉品质性状

瘦素基因-2548 G/A位点多态性与糖尿病肾脏疾病相关性的研究: 2020年; 目的分析瘦素(LP)基因-2548 G/A位点多态性及其血清LP水平与DKD患者的相关性。方法选取2016年1月至2017年10月于胜利油田糖尿病医院内分泌科门诊及住院治疗的200例单纯T2DM患者(T2DM组)及200例DKD患者(DKD组),利用聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术评估各组LP-2548G/A基因型分布,并检测血糖、脂质谱、肾功能、FIns和LP水平。结果AA基因型患者LP和UAER水平高于其他基因型患者(P<0.05)。DKD组LP与血肌酐、BUN、UAER及FIns呈正相关(P<0.05)。GA、AA基因型患者患DKD风险较其他患者增加2~3倍(P=0.032、0.009)。Logistic多因素回归分析显示,AA基因型是DKD发生的危险因素(OR=1.584,95%CI 1.30~8.32,P=0.037)。结论LP-2548G/A多态性与DKD发病有关,多态性可能影响LP水平。; 刘红艳肖强; 关键词：单核苷酸多态性糖尿病肾脏疾病瘦素

宁夏回族原发性膝骨性关节炎与瘦素基因多态性的相关性被引量：1: 2020年; 目的:通过对瘦素(LEP)基因多态性与宁夏回族人群膝骨性关节炎(OA)的相关性研究,探讨LEP基因与膝OA易感的关系,以进一步了解膝OA发病机制并提供防治相关理论依据。方法:本研究收集148例兼具原发症状和影像证据、不相关的宁夏回族膝OA患者和155例性别、年龄及体质量指数相匹配的对照人群,通过聚合酶链反应和限制性酶切技术,对LEP G2548A位点行单核苷酸多态性(SNP)检测,对基因型分布和等位基因频率分别行拟和优度χ~2检验,并行Hardy-Weinberg平衡检验,Logistic回归分析两个位点不同基因型对膝OA发生风险率的影响。结果:两组间的性别及年龄构成均无统计学差异。经拟合优度χ~2检验结果发现LEP G2548A位点的P>0.05,均符合Hardy-Weinberg遗传平衡。膝OA组LEP G2548A位点AG/GA+AA基因型和A等位基因的分布频率明显高于对照组,LEPR A668G位点AG/GA+GG基因型和G等位基因的分布频率和对照组存在差异(P=0.047和P=0.017)。结论:LEP G2548A位点的多态性与宁夏回族人群中膝OA易感性相关,有利于宁夏回族膝OA发病的危险预测和早期防治。; 马晓军马晓军沈佳罗小军金群华; 关键词：瘦素病例对照研究骨性关节炎回族

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