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一种胸膜肺炎放线杆菌双重外毒素基因LAMP-LFD检测试剂盒: 本发明公开了一种胸膜肺炎放线杆菌双重外毒素基因LAMP‑LFD检测试剂盒，涉及分子生物检测技术领域。该试剂盒包括一种引物组合；该引物组合包括用于检测靶标apxⅠ基因的LAMP内引物对和用于检测靶标apxⅣ基因的LAMP内...; 周俊明李彬范一聪祝昊丹王丹丹倪艳秀范宝超胡屹屹何孔旺

湖州市某三甲医院住院患者艰难梭菌毒素基因检测及其分子流行病学分析: 2025年; 目的研究地市级医院住院患者艰难梭菌感染的发生情况,并分析艰难梭菌的分子流行病学特征。方法收集湖州市第一人民医院2023年11月—2023年12月住院腹泻患者粪便标本,培养分离艰难梭菌后,采用核酸扩增技术检测毒素基因,菌株经全基因测序后(Whole Genome Sequencing,WGS)进行分子流行病学分析。结果从500份住院患者腹泻样本中分离得到49株艰难梭菌,其中产毒型艰难梭菌40株,艰难梭菌感染(Clostridium difficile infections,CDI)阳性率为8.00%;PCR检测的毒素基因主要为tcdA(+)/tcdB(+),双毒素基因阴性(A+B+CDT-),占97.50%(39/40),1株携带双毒素基因(A+B+CDT+);CDI阳性率最高的科室是消化内科,其次为ICU;MLST分型中,共有13种ST型别,其中ST2型为优势型别,占30.00%;结合WGS数据分析,未发现艰难梭菌菌株在研究期间发生流行和传播。结论本院CDI在住院腹泻患者中的发生率较低,未发生院内感染传播和暴发流行现象,但不排除存在未知感染源可能性,应重点关注重点科室,如ICU患者发生CDI情况。; 郑莉莉强鑫华嵇龙飞; 关键词：住院患者艰难梭菌毒素基因分子分型

鸽源金黄色葡萄球菌外毒素基因与细菌分子分型相关性研究: 2025年; 旨在对鸽源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的毒素基因与agr、spa基因型进行研究,并分析其分型与毒素基因之间的相关性。利用多重PCR检测分离菌株的辅助基因调节子并对其进行蛋白A测序。检测表明,毒素基因中hla、hlb基因检出率较高;其次为sec、seg、seh检出率均为16.00%;sea、seb、sed、see、tst检出率最低,均为2.00%;MRSA菌株携带4种及以上毒素基因。分型显示,S.aureus的agr分型中,agrⅠ型为鸽源S.aureus优势菌株,占分离率的70.00%;agrⅡ和agrⅢ检出率分别为12.00%、18.00%;agrⅣ未检出。spa共有9种分型,t011 S.aureus是鸽源主要的流行菌株,占68.00%,其次为t127、t502均为10.00%。agrⅡ和agrⅢS.aureus更具有携带多种毒素基因的潜力,而agrⅠ型毒素基因携带能力较弱;t011型S.aureus均携带hla基因,t502和t1710中的MRSA菌株均携带7种毒素基因;说明同种分型携带毒素基因情况具有一致性。t011均携带agrⅠ,t127均携带agrⅢ,t502均携带agrⅢ,说明spa与agr有一定相关性。研究通过S.aureus分型检测,分析其潜在携带毒素基因的能力,为鸽源S.aureus感染性疾病的监控及分子流行病学的研究提供科学依据。; 赵世芳王金泉陈伟丽阮志栋彭斌; 关键词：金黄色葡萄球菌毒素基因蛋白A

双重核酸纸条快速检测单核细胞增生李斯特菌的prfA和hly毒素基因: 2025年; 目的基于聚合酶链反应和胶体金技术相结合的双重核酸试纸条方法快速检测单核细胞增生李斯特菌prfA和hly两种毒素基因。方法采用加热煮沸法提取单核细胞增生李斯特菌DNA,以单核细胞增生李斯特菌的prfA和hly为靶基因,分别用6-FAM标记prfA上游引物5'端,Biotin标记prfA下游引物5'端,Digoxin标记hly上游引物5'端和Biotin标记hly下游引物5'端,建立单核细胞增生李斯特菌的毒素基因检测方法,通过克隆转化、测序分析,克隆阳性对照品,研发试剂盒并对试剂盒特异性、灵敏度、复现性及稳定性进行评价,并通过样品检测对试剂盒进行验证。结果水煮法提取的单核细胞增生李斯特菌浓度为148.81±0.97ng/μL,A_(260)/A_(280)在1.8~2.0范围内;PCR产物经克隆转化、测序对比,与GenBank数据库中基因序列的同源性均为100%;特异性检测,仅单核细胞增生李斯特菌为阳性结果,与金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、蜡样芽胞杆菌无交叉反应;灵敏度检测,最低检测限为10^(-2)ng/μL,比琼脂糖凝胶电泳高10倍;复现性检测,不同实验室不同人员分别对核酸试纸条进行验证,结果一致;稳定性检测,在第6、9、12月对核酸试纸条进行验证,稳定性较好。样品检测结果显示,本试剂盒可准确快速的检出样品中单核细胞增生李斯特菌。结论本剂盒可同时检测单核细胞增生李斯特菌的prfA和hly毒素基因,具有特异性强、灵敏度高、复现性好、稳定性好等优点,对保障食品安全具有现实意义。; 刘岩杨建宇周钰娇丁文博张先宇高林然潘蓓珍杨继飞赵云冬; 关键词：单核细胞增生李斯特菌

蜡样芽孢杆菌cytK和nhe毒素基因双重核酸试纸条快速检测方法的建立及其评价: 2025年; 目的:采用聚合酶链式反应(PCR)和胶体金技术建立1种蜡样芽孢杆菌cytK和nhe2种毒素基因双重核酸试纸条快速检测方法,并对其特异性、灵敏度、重复性和稳定性进行评价。方法:采用煮沸法提取蜡样芽孢杆菌DNA,以蜡样芽孢杆菌细胞毒素cytK和非溶血性肠毒素nhe为靶基因设计特异性引物,通过克隆转化鉴定PCR产物,确定胶体金标记链霉亲和素、质量控制线(C线)、cytK检测线(T_(1))和nhe检测线(T_(2))最佳标记量,组装核酸试纸条并对其特异性、灵敏度、重复性和稳定性进行评价。结果:蜡样芽孢杆菌DNA浓度为248 mg·L^(-1),纯度为1.8~2.0;经克隆转化和测序比对,PCR产物与GenBank数据库中已登记的蜡样芽孢杆菌cytK和nhe相似性均为100%。在pH为7.0的条件下,每200μL胶体金溶液中链霉亲和素最佳标记量为6.0μL;质量控制线(C线)最佳标记量为2.00 g·L^(-1),cytK基因检测线(T1)最佳标记量为0.550 g·L^(-1),nhe基因检测线(T_(2))最佳标记量为0.2 g·L^(-1)。特异性检测,仅蜡样芽孢杆菌组显示阳性结果,试纸条与金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌无交叉反应,与电泳结果一致;灵敏度检测,当双重核酸试纸条中蜡样芽孢杆菌DNA浓度降至10^(-2)mg·L^(-1)时,可观察到C线、T1线和T_(2)线3个条带,检测限为琼脂糖凝胶电泳(10^(-1)mg·L^(-1))的1/10;重复性检测,由不同实验室不同人员对试纸条进行验证,结果一致;稳定性检测,在第6、9和12个月进行试纸条稳定性验证,稳定性良好。结论:本研究建立的双重核酸试纸条法可以同时检测蜡样芽孢杆菌cytK和nhe毒素基因,灵敏度高,特异性强,可实现快速可视化检测。; 杨继飞潘蓓珍刘岩周钰娇杨建宇张先宇丁文博李昊宇孙丽媛; 关键词：蜡样芽孢杆菌 NHE

苏云金芽孢杆菌Cry毒素基因及其人工嵌合毒素杀虫活性与应用: 本发明涉及苏云金芽孢杆菌Cry毒素基因及其人工嵌合毒素杀虫活性与应用。本发明涉及四种苏云金芽孢杆菌Cry类杀虫毒素基因Cry1I‑like、Cry2Ab‑like、Cry9Eb‑like、Cry9Ee‑like，以及五种...; 张文飞冯骁杨越姜安艳杜雅萱周士隽席佳琪吴慧

苏云金芽孢杆菌Cry毒素基因及其人工嵌合毒素杀虫活性与应用: 本发明涉及苏云金芽孢杆菌Cry毒素基因及其人工嵌合毒素杀虫活性与应用。本发明涉及四种苏云金芽孢杆菌Cry类杀虫毒素基因Cry1I‑like、Cry2Ab‑like、Cry9Eb‑like、Cry9Ee‑like，以及五种...; 张文飞冯骁杨越姜安艳杜雅萱周士隽席佳琪吴慧

马鞍山市临床来源金黄色葡萄球菌的耐药性和肠毒素基因特征分析: 2024年; 目的分析马鞍山市临床检验中心临床培养分离的金黄色葡萄球菌的标本来源、耐药性及毒力基因的特征。方法以马鞍山市临床检验中心2022年收集的98株金黄色葡萄球菌作为研究对象,使用VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定药敏分析仪检测耐药表型;使用聚合酶链反应扩增法检测肠毒素基因,对13株多药耐药菌株进行全基因组测序并分析耐药相关基因。结果98株金黄色葡萄球菌主要来源于分泌物标本(40.82%),其次是痰液(36.73%)、脓液(6株,6.12%)和血液(6株,6.12%)。药敏试验结果表明,金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药率最高(98.97%),其次是红霉素(53.06%)和克林霉素(46.94%),而对庆大霉素、复方磺胺甲噁唑、环丙沙星、左氧氟沙星和莫西沙星的耐药率相对较低,对喹努普汀/达福普汀、利福平、利奈唑胺、万古霉素表现出完全敏感。29株金黄色葡萄球菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),占总分离株数的29.59%。肠毒素基因分布显示,SEA基因最为常见(95.92%),其次是SEC(71.43%)和SEF(31.63%),SEE(5.10%)检出率较低。13株多药耐药金黄色葡萄球菌基因组的耐药基因预测,共发现了26个耐药基因,可以分为11个大类。所有菌株均含有氟喹诺酮类、氨基嘧啶类、消毒剂和防腐剂类、四环素类抗菌药物耐药基因及多药耐药基因。结论该中心分离的98株金黄色葡萄球菌表现出明显的耐药性,以SEA、SEC和SEF肠毒素基因为主。全基因组测序分析进一步揭示了其耐药和致病力背后的复杂机制,为制订有效的预防和治疗策略提供了依据。; 王芳刘晓任小东汪永禄晏世园胡金桓武倩郑娟王多春; 关键词：金黄色葡萄球菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肠毒素基因耐药性全基因组测序耐药基因

上海市嘉定区腹泻患者中金黄色葡萄球菌感染及肠毒素基因携带情况分析: 2024年; 【目的】了解上海市嘉定区腹泻患者中金黄色葡萄球菌的感染状况,分析腹泻患者菌株中肠毒素基因携带情况。【方法】于2021—2023年对上海市嘉定区1家哨点医院肠道门诊和9个不同街镇的社区卫生服务中心的腹泻患者的肛拭子样本进行金黄色葡萄球菌检测,并检测5种肠毒素(SE)毒力基因SEA、SEB、SEC、SED、SEE。【结果】共收集到1080份肛拭样品,81份样品中检出金黄色葡萄球菌,检出率为7.50%,2021—2023年腹泻患者中金黄色葡萄球菌检出率相近。男女金黄色葡萄球菌检出率差异无统计学意义(χ^(2)=0.821,P=0.365)。婴幼儿腹泻患者的金黄色葡萄球菌检出率最高(29.51%),4~<31岁人群检出率为14.06%,年龄≥31岁人群金黄色葡萄球菌检出率为2.99%。嘉定区不同街镇间患者金黄色葡萄球菌检出率差异有统计学意义(χ^(2)=66.134,P<0.05)。SEA、SEB、SEC、SED、SEE基因携带率分别为13.58%、14.81%、11.11%、7.41%、0。【结论】嘉定区腹泻患者金黄色葡萄球菌的流行率较稳定且有明显的地域特征,儿童和青少年是高风险人群。以SEB基因为主,其次为SEA。; 陈培超黄强程芳洲陈慧娟马智琪孙攀彭谦; 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素腹泻

BP005毒素基因及其使用方法: 提供了赋予细菌、植物、植物细胞、组织和种子杀有害生物活性的组合物和方法。提供了包含毒素多肽的编码序列的组合物。编码序列可在用于在植物和细菌中转化和表达的DNA构建体或表达盒中使用。组合物还包含转化的细菌、植物、植物细胞、...; G·米勒E·邓恩J·多洛加齐D·莱赫蒂宁L·肖滕A·德布雷希特J·吉贝尔D·瓦克宁X·郑K·皮切尔

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