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旁分泌效应在唾液腺损伤修复中的研究进展: 2024年; 唾液腺损伤(salivary gland injury,SGI)是临床多发的一种慢性炎症性疾病,头颈肿瘤放射治疗和Sj9gren综合征(Sj9gren’s syndrome,SS)介导的自身免疫失衡机制与唾液腺上皮细胞损伤过程密切相关,是SGI发生发展的不良因素。随着细胞旁分泌组学在组织再生医学领域研究的逐渐深入,其在唾液腺组织损伤修复治疗中的作用受到广泛关注。细胞旁分泌组可通过调控免疫稳态、神经血管形成,细胞凋亡、重塑、招募及干细胞分化、迁移等途径参与唾液腺上皮细胞损伤修复,但具体细胞因子、信号通路及靶向修复机制尚不明确。本文基于旁分泌活性因子和细胞外泌体生物学效应在唾液腺损伤修复的研究进展作一综述,旨在为唾液腺损伤的“无细胞”治疗策略提供新的方向与思路。; 张敏张霓霓黄桂林李壮壮张昊; 关键词：旁分泌效应干细胞分化免疫稳态

胰腺星状细胞通过旁分泌效应促进胰腺癌细胞的PIK3C2A表达及生长: 2024年; 目的研究胰腺星状细胞(PSC)的分泌蛋白对胰腺导管腺癌细胞(PANC-1)的作用及调控机制。方法通过间接共培养的方式,收集PSC的条件培养基(CM),分别培养PANC-1细胞0、2、24 h。CCK-8检测不同刺激时段PANC-1细胞的增殖表型。运用蛋白质组学手段,分析PANC-1细胞在蛋白水平上发生的变化,并用Western blot验证变化最显著的蛋白。结果与对照组相比,经PSC来源的CM刺激后,PANC-1细胞增殖速度加快;蛋白质组学数据分析结果表明,PANC-1细胞在PSC的CM分别培养0、2、24 h后,代谢相关通路的蛋白表达不断升高;基于Western blot验证了PIK3C2A在PANC-1细胞中的升高趋势,表明PSC的CM可能通过上调PIK3C2A的表达从而促进PANC-1细胞的增殖。结论PSC的CM可能通过旁分泌效应上调PIK3C2A的表达从而促进PANC-1细胞的增殖,提升了肿瘤微环境中PSC与胰腺癌细胞之间的交互对话机制的认识。; 岳展甄可妙崔皓哲应万涛; 关键词：胰腺星状细胞条件培养基蛋白质组学

经LED黄光照射的人间充质干细胞旁分泌效应对成纤维细胞光老化的作用研究: 2024年; 目的研究经LED黄光照射的人脂肪间充质干细胞(hADSCs)旁分泌效应对人真皮成纤维细胞(HDFs)光老化的影响。方法利用中波紫外线(UVB)照射HDFs构建光老化模型,并进行细胞增殖、细胞衰老、细胞迁移实验。使用不同能量梯度(2.5、5.0、7.5、10.0 J/cm^(2))LED黄光照射hADSCs进行细胞增殖实验,确定最佳照射能量(10 J/cm^(2))。实验组用LED黄光10 J/cm^(2)照射的hADSCs上清液培养光老化HDFs,对照组用未经照射的hADSCs上清液培养光老化HDFs,用CCK-8法检测2组细胞增殖能力,用β-半乳糖苷酶染色检测2组细胞衰老水平,用微丝绿色荧光探针标记细胞骨架,用流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)含量,并进行转录组测序,对测序发现的显著差异基因进行实时荧光定量聚合酶链反应(qRTPCR)验证、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果与未照射组比较,UVB照射组HDFs增殖能力下降,衰老细胞(蓝染细胞)明显增多,HDFs迁移受到抑制,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,经LED黄光照射的hADSCs上清液干预的实验组光老化HDFs增殖能力较强、蓝染细胞较少、细胞形态较为细长、ROS含量较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。转录组测序发现6个有意义的差异表达基因:驱动蛋白家族成员20B(KIF20B)、异常纺锤体样小头畸形相关蛋白(ASPM)、A型激酶锚定蛋白9(AKAP9)、着丝粒蛋白F(CENPF)、着丝粒蛋白E(CENPE)、RB1的诱导卷曲蛋白1(RB1CC1)。qRTPCR结果显示,实验组KIF20B、ASPM、AKAP9、CENPF、CENPE、RB1CC1 mRNA表达高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),与转录组测序结果一致。KEGG通路富集分析显示,显著差异基因富集在长寿调节通路(longevity regulating pathway)。结论经LED黄光照射的hADSCs旁分泌效应对HDFs的光老化具有抑制作用,可能与激活长寿调节通路有关。; 曹佼佼王金涛蔡宏; 关键词：光老化成纤维细胞紫外线

低能量冲击波预处理对BMSC在大鼠R-UUO模型肾脏中旁分泌效应的影响: 2023年; 研究低能量冲击波(LESW)预处理对骨髓间充质干细胞(BMSCs)在体外、体内的分泌作用的影响。方法以LESW对BMSCs分别进行0、500、1000、1500次预处理后进行表型鉴定,传代后取细胞上清测VEGFA表达。建立左侧可复性单侧输尿管梗阻模型,解除梗阻时以胰岛素注射器移植BMSCs,解除梗阻后1h、1d、7d、14d收取患肾测VEGFA表达。以两因素方差分析对两因素多水平资料的均数进行比较,不同组间及组内的两两比较使用Tukey’s多重比较检验,以SPSS 21.0进行分析。检验水准取α=0.05,P<0.05则认为差异有统计学意义。结果 (1)表型CD29、CD90、CD34表达阳性率符合干细胞表型标准,CD45表达阳性率稍高于标准;(2)预处理次数从0增至1500的过程中,上清液中VEGFA表达水平有上升趋势(P<0.05);(3)患肾中,SW1000组、SW1500组VEGFA表达水平均高于其他组(P<0.05)。结论 LESW预处理可增强BMSCs在R-UUO肾脏中的旁分泌效应。; 王国任王锐锋汪智峰李东辉; 关键词：干细胞肾脏保护作用旁分泌效应

旁分泌效应在子宫内膜异位症中的研究进展被引量：3: 2023年; 子宫内膜异位症(EMs)是育龄期妇女的常见病、多发病,目前其发病机制尚不明确。因具有激素依赖性、侵袭强和复发率高等特点,在临床诊疗过程中有一定的难度和挑战。近年来旁分泌成为EMs的研究热点。旁分泌效应产生的各种生物活性分子和外泌体参与EMs的形成,具体可能通过介导炎症与免疫反应,促细胞增殖与抑制凋亡,促血管新生,分化或转化,细胞外基质的合成等途径参与EMs的发生发展。本文综述了近年来常见的旁分泌因子及外泌体在EMs发病机制中的作用及研究进展,为EMs的防治提供新的切入点。; 夏璐万贵平张真真; 关键词：子宫内膜异位症外泌体发病机制

补肾化瘀生新方优化缺血缺氧微环境对间充质干细胞旁分泌效应及分化率的影响被引量：7: 2021年; 目的观察补肾化瘀生新方优化缺血缺氧微环境对间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)旁分泌效应调控作用,探讨其对MSCs增值分化能力的影响。方法采用无血清的1640培养基和低氧细胞工作站培养24 h建立缺血缺氧微环境细胞体外模型。随机分为:正常组:以完全培养基培养(L-DMEM+10%FBS);对照组:加入生理盐水血清培养基,放入低氧细胞工作站培养24 h;模型组:以完全培养基培养(L-DMEM+10%FBS),低氧细胞工作站培养24 h;治疗组:加入含有补肾化瘀生新方含药血清培养基,低氧细胞工作站培养24 h。采用液相色谱-串联质谱技术分析鉴定补肾化瘀生新方大鼠体内吸收入血成分。采用流式细胞仪检测MSCs细胞周期、ELISA法检测VEGF、bFGF、SDF-1、IL-10和TNF-α含量变化;免疫细胞化学染色检测NF-κBp65的细胞核转位;实时荧光PCR技术检测microRNA-124a-mRNA表达情况;Western blot检测microRNA-124a蛋白表达;免疫荧光技术检测MSCs向内皮细胞、神经元、神经胶质分化情况。结果与正常组比较,模型组S期细胞数增多,G0/G1期明显降低(P<0.05),与模型组比较,治疗组、对照组S期细胞数减少,G0/G1期比例逐渐升高(P<0.05),与对照组相比,治疗组S期细胞数减少,G0/G1期比例逐渐升高(P<0.05)。与正常组比较,模型组VEGF、bFGF、SDF-1、IL-10降低明显(P<0.05),与模型组比较,治疗组VEGF、bFGF、SDF-1、IL-10增多明显(P<0.05),与治疗组相比,对照组VEGF、bFGF、SDF-1、IL-10减少(P<0.05)。随缺血缺氧时间延长VEGF、bFGF、SDF-1、IL-10呈减少动态变化。与正常组比较,模型组NF-κBp65、TNF-α、microRNA-124a-mRNA和蛋白表达增多明显(P<0.05),与模型组比较,治疗组NF-κBp65、TNF-α、microRNA-124a-mRNA和蛋白表达降低明显(P<0.05),与治疗组相比,对照组NF-κBp65、TNF-α、microRNA-124a-mRNA和蛋白表达增多(P<0.05)。随缺血缺氧时间延长NF-κBp65、TNF-α、microRNA-124a-mRNA和蛋白表达呈升高�; 张金生张宝霞刘雪曼; 关键词：间充质干细胞旁分泌效应增殖分化

干细胞旁分泌效应在缺血性心脏病中的研究进展被引量：1: 2021年; 干细胞被认为是治疗缺血性心脏病的有效策略,但其定向心脏谱系分化潜能较低。而干细胞来源的外泌体作为其发挥生物学效应的关键介质,可通过其内含的多种细胞因子、miRNA、脂质及蛋白质,促进血管新生、细胞增殖,抑制细胞凋亡,从而间接发挥心肌保护效应。这种干细胞旁分泌效应是修复受损心肌、改善心功能的重要方式。促使干细胞在靶部位高效保留并持续分泌上述效应物质仍是其转化应用的关键,各类生物工程技术的发展及新型生物材料的开发或许可为干细胞通过旁分泌效应治疗缺血性心脏病提供重要支撑。; 向祖金张静杨简; 关键词：干细胞旁分泌缺血性心脏病外泌体

水凝胶三维培养对人羊膜间充质干细胞特性及旁分泌效应的影响被引量：4: 2020年; 背景:研究表明间充质干细胞在创面愈合中具有减轻炎症反应、促进创面愈合、减轻瘢痕形成的作用,然而以往的普通二维培养环境由于存在细胞间接触性抑制,可能导致细胞的基因表达、信号传导和形态学存在差异。目的:观察人羊膜间充质干细胞旁分泌创面愈合相关因子的能力是否受二维培养环境与三维培养环境的影响。方法:利用传统酶消化法获得人羊膜间充质干细胞后,分别接种于普通细胞培养瓶(二维培养)与ShakeGelTM3D水凝胶中(三维培养),将水凝胶中的人羊膜间充质干细胞分别进行成脂、成骨、成软骨诱导分化,免疫荧光染色确定细胞分化方向;待两种培养环境中的人羊膜间充质干细胞融合至70%-80%,于倒置相差显微镜和激光共聚焦显微镜下观察细胞的生长特点及形态;培养24 h后,应用RT-qPCR技术测定细胞旁分泌创面愈合相关因子的mRNA相对表达量;培养48 h后,利用ELISA试剂盒检测细胞旁分泌创面愈合相关因子的蛋白表达量。结果与结论:①二维培养组人羊膜间充质干细胞呈扁平状,为典型间充质样细胞形态;三维培养组人羊膜间充质干细胞呈圆形,均匀分散于水凝胶的每一层;②三维培养中的人羊膜间充质干细胞具有3系诱导分化潜能;③三维培养组白细胞介素6、白细胞介素8、表皮生长因子、碱性成纤维细胞因子、透明质酸、肝细胞生长因子、血管内皮生长因子mRNA相对表达量高于二维培养组(P<0.001,P<0.05),两组白细胞介素4、白细胞介素10、金属蛋白酶组织抑制因子、基质金属蛋白酶、转化生长因子、角化细胞生长因子mRNA相对表达量比较差异无显著性意义(P>0.05);④三维培养组白细胞介素6、白细胞介素10、表皮生长因子、碱性成纤维细胞因子、白细胞介素8、肝细胞生长因子、转化生长因子β1、血管内皮生长因子蛋白表达量高于二维培养组(P<0.001,P<0.01,P; 王旗杨晓双王达利; 关键词：水凝胶羊膜间充质干细胞创面修复旁分泌效应

子宫内膜上皮细胞SGLT3a激活诱导基质细胞蜕膜化相关旁分泌效应及机制研究: 子宫内膜蜕膜化是围着床期内膜基质细胞增殖和分化形成蜕膜组织的过程。蜕膜化对胚胎植入及妊娠成功建立与维持起着非常重要的作用。　　子宫内膜上皮细胞（endometrial epithelial cells，EECs）与基质细...; 刘敏; 关键词：子宫内膜上皮细胞旁分泌效应

应用干细胞旁分泌效应治疗膝部骨关节炎的研究进展被引量：7: 2019年; 目的综述现阶段应用干细胞旁分泌效应治疗膝部骨关节炎(osteoarthritis,OA)的研究进展。方法查阅近年来干细胞来源条件培养液、细胞外基质、外泌体及微囊泡在膝部OA及软骨修复领域的相关基础研究,并进行总结分析。结果干细胞旁分泌效应对膝部OA及关节软骨损伤的治疗效果,在不同层面的多项研究中已有所彰显。其作用机制包括对关节腔内炎性反应、软骨细胞凋亡、软骨基质水解的有效抑制,以及促进软骨基质合成、原位固有干细胞向软骨细胞定向分化、并向损伤部位定向迁移等修复过程。结合组织工程学方法或基因修饰等手段能进一步提升疗效。结论相较传统干细胞疗法,应用干细胞旁分泌效应产物治疗膝部OA更为安全且经济,具有较高的临床转化价值。; 陈闻波蔡江瑜孙亚英陈俊陈世益; 关键词：骨关节炎干细胞治疗旁分泌细胞外基质

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