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过氧化氢诱导人卵巢颗粒细胞氧化应激模型的建立与评价
2025年
目的探讨利用过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导人卵巢颗粒细胞COV434建立氧化应激损伤模型的方法。方法将人卵巢颗粒细胞COV434细胞分为对照组及H_(2)O_(2)组,对照组不作处理,H_(2)O_(2)组分别给予200μmol/L、400μmol/L、600μmol/L、800μmol/L、1000μmol/L H_(2)O_(2)进行处理0.5 h、1 h、2 h、4 h、6 h,CCK-8法测定细胞活性,后续实验使用不同浓度H_(2)O_(2)处理1 h;β-半乳糖苷酶染色法测定细胞衰老程度;流式细胞术测定DCFH-DA荧光染色,测定细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;JC-1染色法测定细胞线粒体膜电位;Western blotting法测定细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9的表达水平。建立模型成功后,为验证细胞模型的可用性,使用抗氧化剂维生素E对细胞预处理12 h,随后加入H_(2)O_(2)进行干预,并对ROS水平、线粒体膜电位进行测定。结果与对照组相比,H_(2)O_(2)浓度200μmol/L、400μmol/L组的细胞存活率呈现先下降后上升的趋势,且在干预1 h后趋于稳定,各时间点细胞存活率差异均无统计学意义(均P>0.05);当H_(2)O_(2)浓度增加至600μmol/L时,细胞存活率随处理时间逐渐下降并在1 h后趋于稳定,显著降低且最接近50%(P<0.001);当H_(2)O_(2)浓度继续增加至800μmol/L、1000μmol/L时,细胞存活率随处理时间逐渐下降并在1 h后趋于稳定,且降至10%以下(均P<0.001)。当H_(2)O_(2)浓度分别为200μmol/L、400μmol/L时,处理1 h后的β-半乳糖苷酶阳性细胞比值、相对ROS强度与对照组相比差异均无统计学意义(均P>0.05);当H_(2)O_(2)浓度分别增加至600μmol/L、800μmol/L、1000μmol/L时,β-半乳糖苷酶染色阳性细胞比值、相对ROS强度均显著增高(β-半乳糖苷酶染色:H_(2)O_(2)浓度600μmol/L时P=0.011,800μmol/L时P=0.003,1000μmol/L时P=0.005;相对ROS强度:H_(2)O_(2)浓度600μmol/L时P=0.002,800μmol/L及1000μmol/L时P<0.001)。与对照组相比,使用不同浓度的H_(2)O_(2)干预后,细胞线粒体膜电位逐渐
徐强张曼丽腊晓琳
关键词:颗粒细胞氧化应激损伤细胞模型过氧化氢
一种孕酮非基因抗氧化应激模型的建立方法
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种孕酮非基因抗氧化应激模型的建立方法。该方法包括如下步骤:将离体血液离心;离心后收集下层红细胞沉淀,得到红细胞;取红细胞,用PBS配制成5%体积百分比的红细胞悬液,红细胞悬液中添加孕酮以...
张利彬张悦王天磊王璐江林华
慢性心理应激模型小鼠中医证型变化规律研究
2025年
目的 研究慢性心理应激模型小鼠在造模过程中的证型变化规律及其可能的物质基础。方法采用慢性温和不可预知应激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)方法制备慢性心理应激小鼠模型,造模2周后在造模同时使用逍遥散(XYS组)和四逆散(SNS组)治疗,比较造模小鼠(M4组和M6组)和给药2周(S4组和X4组)、4周(S6组和X6组)后慢性心理应激小鼠的一般情况、行为学和生化指标。结果 与M4组小鼠比较,S4组和X4组小鼠体质量、旷场实验总路程和中央路程、血清去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)浓度、胃部Ghrelin表达均升高;S4组小鼠糖水偏好率、血清D-木糖浓度均升高;与X4组比较,S4组小鼠旷场实验总路程、血清D-木糖浓度均升高;与M6组小鼠比较,S6组和X6组小鼠体质量、血清NE浓度、血清D-木糖浓度、胃部Ghrelin表达均升高;X6组小鼠糖水偏好率、旷场实验总路程、穿梭箱实验主动逃避次数均升高,血清皮质酮(cortisol, CORT)浓度降低;与S6组相比,X6组小鼠体质量、旷场实验总路程、血清D-木糖浓度、胃部Ghrelin表达均升高。结论 慢性心理应激小鼠造模过程中中医证型由肝郁气滞证演变为肝郁脾虚证,其证候变化生物学基础可能是血清CORT和NE浓度组合变化及胃中Ghrelin水平下降。
薛茜尹吴淑雅许婧余张怡张铭珈敖海清
关键词:慢性心理应激情志致病中医证型辨证论治
九制多花黄精对雌性大鼠慢性不可预知应激模型的预防效果
2025年
目的:观察九制多花黄精对慢性不可预知应激模型(CUMS)造模进行中雌性大鼠的抑郁预防控制效果。方法:将40只SPF级SD雌性大鼠根据随机数字表法分为正常组,模型组,九制黄精低、中、高浓度预防组,每组8只。采用CUMS造模法,通过体质量、旷场实验、强迫游泳实验、神经递质[多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、乙酰胆碱(ACh)]、血清性相关激素[促性腺激素释放激素(GnRH)、睾酮(T)、雌二醇(E_(2))]、血清炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)]、脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶受体B(TRKB)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)通路mRNA蛋白表达等各项指标评价九制多花黄精对预防雌性大鼠CUMS抑郁模型的影响。结果:从大鼠体质量、旷场实验、强迫游泳实验等开始造模前后行为的比较推测模型组大鼠抑郁已建立,通过对各处理组间行为学、神经递质、性相关激素、炎症因子和神经通路的比较,可以得出药物应用对预防雌性大鼠抑郁症进展均有不同程度的作用效果。采用SPSS 25软件进行误差和显著性统计分析,组间用t检验,与模型组比较,各处理组作用效果明显(P<0.05)。九制黄精显著提升雌性大鼠脑组织5-TH水平(P<0.01),显著降低DA、ACh水平(P<0.01),明显降低大鼠血清GnRH、T、E_(2)、TNF-α、IL-6水平(P<0.05),提高大鼠大脑BDNF、TRKB mRNA表达。结论:九制多花黄精对大鼠CUMS抑郁模型有非亢进性预防效果,为将九制多花黄精开发成功能性食品提供了理论依据。
邓欣雨马春花王梓萌唐漫李昕燃喻录容何先元
关键词:抑郁症雌性大鼠
小鼠乳腺上皮细胞热应激模型的建立
2025年
为构建乳腺上皮细胞系(HCⅡ)的热应激模型,将HCⅡ细胞分为常温组(Con组)、热应激组(HS组)和热应激缓和组(HS-组),用CCK-8法测定细胞活性,微板法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)活性和活性氧(ROS)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量,流式细胞仪测定细胞凋亡比例和细胞周期。结果发现:与Con组相比,HS组和HS-组细胞活力显著下降,LDH活性及细胞内ROS、MDA、NO含量显著增加,SOD、GSH、T-AOC和CAT活性显著下降,细胞凋亡显著上升,细胞周期发生阻滞。与HS组相比,HS-组MDA、NO含量显著增加,SOD和GSH活性显著下降,细胞凋亡上升。综上得出,42℃热应激处理小鼠乳腺上皮细胞3h,而后37℃缓和6h,可构建小鼠乳腺上皮细胞的热应激模型
冉晓威
关键词:乳腺上皮细胞细胞活力抗氧化性能细胞凋亡
H_(2)O_(2)诱导的犊牛睾丸支持细胞氧化应激模型的建立及其效果
2025年
雄性家畜睾丸中的氧化应激会导致其繁殖能力下降。为了建立睾丸支持细胞的氧化应激模型,为研究睾丸的氧化应激机制奠定基础,试验使用50,100,300μmol/L过氧化氢(H_(2)O_(2))处理犊牛睾丸支持细胞,建立睾丸支持细胞氧化应激模型,以未处理细胞作对照,通过检测细胞活力和丙二醛(MDA)含量筛选最佳H_(2)O_(2)处理浓度,然后检测最佳H_(2)O_(2)处理浓度下细胞的活性氧(ROS)含量及谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,并利用实时定量PCR分析核因子相关因子2(Nrf2)、Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)、血红素加氧酶-1(HO-1)、NADPH醌脱氢酶1(NQO1)基因表达水平。结果表明:与对照相比,用300μmol/L H_(2)O_(2)处理的细胞活力显著降低(P<0.05),且显著低于50,100μmol/L H_(2)O_(2)处理的细胞(P<0.05);MDA含量显著增加(P<0.05),且显著高于50,100μmol/L H_(2)O_(2)处理的细胞,说明300μmol/L H_(2)O_(2)处理浓度为最佳浓度。与对照相比,300μmol/L H_(2)O_(2)处理的细胞中ROS含量显著增加(P<0.05),GSH、SOD活性显著降低(P<0.05),Nrf2、Keap1、HO-1和NQO1基因的mRNA表达量显著降低(P<0.05)。说明300μmol/LH_(2)O_(2)能够诱导犊牛睾丸支持细胞的氧化应激模型
唐颖王子铭王皓陈艳茹РОТАРЬЛюбовьНиколаевна郑鹏
关键词:犊牛支持细胞氧化应激
社会击败应激模型及其关键评价指标
2025年
焦虑和抑郁等严重精神障碍疾病发生率的增加与人类在社会生活中经历的社交失败高度相关,为探讨两者之间的内在联系,社会击败应激模型被广泛应用于临床前研究。概述了社会击败应激模型的建模方法,总结了有助于社会击败应激模型建模标准制定的关键行为指标,为精神类疾病的社会击败动物模型研究提供系统参考。
毛佳铭沈璐刘婉茹邓欢庆潘永良
关键词:焦虑抑郁
一种蛋鸡慢性不可预测温和应激模型的构建方法
本发明公开一种蛋鸡慢性不可预测温和应激模型的构建方法,属于畜牧技术领域。为了提供一种蛋鸡慢性不可预测温和应激模型的构建方法。本发明提供一种蛋鸡慢性不可预测温和应激模型的构建方法,选取1日龄蛋鸡300数只,随机分为2组,为...
张润祥常青青张浩然李剑虹李想刘洪贵包军
熊胆粉调节慢性不可预知应激模型小鼠肠⁃脑轴抗抑郁作用和机制研究
2025年
目的:探索熊胆粉(BBP)对慢性不可预知应激(CUMS)模型小鼠的抗抑郁效果及作用机制。方法:将小鼠分为对照组、模型组、阳性药组和不同剂量BBP组,CUMS刺激3周后,建立慢性不可预知应激模型,灌胃药物干预21 d,进行行为学测试、海马神经递质检测、粪菌16S rDNA测序和粪菌移植实验。结果:BBP显著提升小鼠糖水偏好率(P<0.001),减少游泳和悬尾不动时间(P<0.05,P<0.01),增加海马5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量(P<0.05),改善肠道菌群多样性,提高毛螺菌科(Lachnospiraceae)丰度,降低产碱杆菌科(Alcaligenaceae)丰度。并且BBP粪菌移植能明显减轻CUMS小鼠抑郁症状,并提升海马5-HT水平。结论:BBP通过调节肠-脑轴发挥抗抑郁作用。
王慧珍李子康郑方黄菲吴晓俊
关键词:熊胆粉抑郁5-羟色胺肠道菌群
一种用于构建慢性应激模型的实验装置
本实用新型涉及动物实验装置技术领域。一种用于构建慢性应激模型的实验装置,包括实验箱,实验箱包括顶盖以及上端开口的箱体,顶盖呈网状结构,顶盖上设置有用于放置供给装置的V形下凹结构,还包括空间缩小模拟件;空间缩小模拟件的顶部...
付择虞淦军

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图娅
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