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人胚胎干细胞向肺动脉平滑肌细胞分化的研究
2020年
目的肺动脉狭窄是一种常见的先天性心脏病亚型,采用生物材料扩张肺动脉是目前治疗手段之一。含有细胞的生物材料治疗效果最佳,但制备生物材料的肺动脉平滑肌细胞来源是目前亟待解决的问题。本研究采用化学因子诱导方法,探索人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)向肺动脉平滑肌细胞分化的能力。方法常规培养hESC细胞系H9,当细胞融合度为10%时,分别加入侧板中胚层(lateral mesoderm,LM)和神经外胚层(neural ectoderm,NE)的定向分化诱导剂。通过real-time PCR、Western blot、细胞免疫荧光检测对这些诱导分化而来的细胞进行鉴定并检测其向血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)分化的能力。结果 H9细胞呈克隆生长,SOX2、OCT4、NANOG均为阳性表达。经诱导分化后,与对照组相比,ISL-1、NKX2.5、KDR(LM的标志基因),Nesting、PAX6、GBX2(NE细胞的标志基因)表达上调,而hESC的标志基因SOX-2、OCT-4和NANOG表达下调。这两种细胞能进一步分化成α-SMA、CNN1、MYH11、TAGLN、SMTN-A表达阳性的VSMC。结论特定的分化条件能诱导hESC向肺动脉平滑肌细胞分化。
黄兹锐李晓红陈景邱敏何标川欧艳秋周成斌庄建陈寄梅
关键词:胚胎干细胞神经外胚层平滑肌细胞干细胞分化
大鼠骨髓间充质干细胞体外向血管平滑肌细胞的诱导分化被引量:4
2013年
背景:有研究表明,血管外膜成纤维细胞被激活早期参与动脉粥硬化及血管再狭窄的形成,另有研究表明,骨髓间充质干细胞有部分黏附分化参与血管重塑,实验拟从血管外膜成纤维细胞与骨髓间充质干细胞之间相互作用的角度,来探讨动脉硬化及血管损伤后再狭窄过程中的可能机制。目的:观察骨髓间充质干细胞与血管外膜成纤维细胞直接接触培养后,骨髓间充质干细胞形态改变及表达血管平滑肌动蛋白的情况。方法:将骨髓间充质干细胞(DAPI标记细胞核)与外膜成纤维细胞按一定的比例混合培养7d,细胞单独培养作对照,显微镜下观察细胞形态变化,免疫荧光检测骨髓间充质干细胞平滑肌动蛋白表达的情况。结果与结论:骨髓间充质干细胞与血管外膜成纤维细胞共培养后,可见骨髓间充质干细胞细胞核蓝染(DAPI标记细胞核)、胞浆红染(平滑肌动蛋白阳性)的双标细胞出现,且随培养时间的延长,骨髓间充质干细胞平滑肌动蛋白表达阳性率明显增高。结果可见与血管外膜成纤维细胞直接接触有诱导骨髓间充质干细胞向血管平滑肌细胞分化的趋势。
袁文丹李京敏徐芳
关键词:干细胞骨髓干细胞平滑肌肌动蛋白骨髓间充质干细胞血管外膜成纤维细胞诱导分化
内皮细胞诱导新生内膜平滑肌细胞募集机制的研究
研究背景移植物动脉病是目前器官移植发生慢性失功的共同病理变化,也是影响移植物长期存活的一个最重要因素。其主要的病理特征是移植物动脉广泛新生内膜增生,从而致使移植物动脉在移植后的数月至数年间出现管腔狭窄,引起移植器官的缺血...
张陈
关键词:慢性移植物失功RANTES
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一种利用心素诱导间充质干细胞平滑肌细胞分化的方法
本发明涉及一种利用心素诱导间充质干细胞平滑肌细胞分化的方法,诱导人骨髓间充质干细胞平滑肌细胞分化、用含有心素基因的重组真核表达质粒转染间质干细胞细胞,真核表达载体包括是pEGFP、pcDNA或pCMV,包括:...
王楠张同存任光达周臻
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氧化型低密度脂蛋白对骨髓源性平滑肌细胞增殖的影响
目的建立体外诱导骨髓间质干细胞分化的平滑肌细胞模型,探索骨髓间质干细胞分化的平滑肌细胞在动脉粥硬化发生发展过程中的作用。方法采用贴壁法从SD大鼠骨髓中分离骨髓间质干细胞(bone mesenchymal stem ce...
严鹏科段才闻李世煌梅峥嵘司徒冰肖国宏
关键词:氧化型低密度脂蛋白骨髓间质干细胞泡沫细胞血管平滑肌细胞
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氧化型低密度脂蛋白对骨髓源性平滑肌细胞粘附和迁移的影响
目的建立体外诱导骨髓间质干细胞分化的平滑肌细胞模型,探索骨髓间质干细胞分化的平滑肌细胞在动脉粥硬化发生发展过程中的作用。方法采用贴壁法从SD大鼠骨髓中分离骨髓间质干细胞(bone mesenchymal stem ce...
严鹏科段才闻梅峥嵘司徒冰肖国宏
关键词:氧化型低密度脂蛋白骨髓间质干细胞诱导分化
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大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为血管平滑肌细胞的实验研究
目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分离培养以及扩增的方法并鉴定细胞性质。方法取100 g左右雄性SD大鼠后肢股骨、胫骨骨髓,原代全骨髓培养法,多次传代纯化,体外扩增后,观察细胞形态,绘制细胞生长曲线,并利用免疫组...
何凤璞
关键词:骨髓干细胞骨髓间充质干细胞全反式维甲酸
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反义Smad3阻断TGF-β1信号转导对大鼠BMSC分化成平滑肌细胞的影响
2011年
目的研究信号蛋白Smad3在TGF-β1促大鼠骨髓间充质干细胞分化成平滑肌细胞中的作用。方法运用免疫细胞化学、RT—PCR证实BMSC中存在TGF-β1/smad3信号传导通路的基础上,运用反义Smad3进行干预。实验分三组:反义Smad3组(反义Smad3腺病毒转染大鼠BMSC),空载对照组(空载腺病毒转染大鼠BMSC)及未转染组;一组均予10ng/mL浓度的TGF-β1诱导1W。通过免疫细胞化学和实时定量PCR比较反义Smad3干预后各组SMut=actin的表达变化。结果经免疫细胞化学法、RT-PCR检测证明BMSC中存在TGF-β1/smad3表达。运用针对靶基因Smad3的反义技术干预后,经10ng/mLTGF-β1诱导,相比未转染组及空载组,反义smad3腺病毒转染组SMα-actin阳性细胞表达数明显减少。实时定量PCR也显示反义smad3组SMα-actinmRNA的相对含量明显低于未转染组(O.460±0.259VS2.932±0.375,P〈0.01),而空载组与未转染组相比无明显统计学差异。结论TGF-β1促BMSC成平滑肌细胞分化的过程中受Smad3选择性调节,Smad3可能是TGF-β1促BMSC分化成平滑肌细胞细胞内信号途径。
陈谊蔡文玮盛净
关键词:骨髓间充质干细胞TGF-Β1平滑肌样细胞
bFGF和PDGF-BB对内皮祖细胞分化的内皮细胞平滑肌细胞增殖和迁移的影响被引量:4
2011年
目的探讨内皮祖细胞分化的内皮平滑肌细胞在碱性成纤维生长因子和血小板源生长因子BB作用下的增殖和迁移能力。方法将分离、培养及纯化的内皮祖细胞培养5天后进行分组:对照组、碱性成纤维生长因子组和血小板源长因子BB组。对照组使用20%胎牛血清的DMEM培养基;碱性成纤维生长因子组和血小板源生因子BB组在20%胎牛血清的DMEM培养基中分别添加碱性成纤维生长因子(30μg/L)和血小板源生长因子BB(40μg/L)。免疫荧光染色鉴定内皮祖细胞以及检测内皮祖细胞内皮方向分化标记物CD31和vWF,及平滑肌方向分化标记物α-SMA和Calponin。将分化的内皮细胞平滑肌细胞用MTT法和Transwell小室分别检测其增殖活性和迁移能力。结果与对照组比较,内皮祖细胞经碱性成纤维生长因子或血小板源生长因子BB诱导后呈现较强的内皮细胞(CD31,vWF)或平滑肌细胞(α-SMA,Calponin)的荧光染色,被诱导细胞分别称为内皮细胞平滑肌细胞;碱性成纤维生长因子促进内皮细胞和血小板源生长因子BB促进平滑肌细胞增殖的作用在一定范围内具有时间(0~48 h)和浓度(碱性成纤维生长因子:0~16μg/L;血小板源生长因子BB:0~18μg/L)依赖效应。结论碱性成纤维生长因子和血小板源生长因子BB分别可以促进内皮祖细胞分化成内皮细胞平滑肌细胞,并且在碱性成纤维生长因子和血小板源生长因子BB作用下具有明显的增殖和迁移能力。
郭素芬杨向红
关键词:内皮祖细胞内皮样细胞平滑肌样细胞
大鼠骨髓间充质干细胞体外向血管平滑肌细胞诱导分化过程中Periostin的表达及其作用被引量:3
2011年
目的探讨血小板源性生长因子(Platelet derived growth factor,PDGF)-BB诱导骨髓间充质干细胞(Bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)向血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle-like cells,VSMLCs)分化过程中Periostin的表达及其在促VSMLCs分化中的作用。方法采用全骨髓贴壁培养法分离和培养大鼠BMSCs,取第2代BMSCs分为2组:诱导Ⅰ组(用50 ng/ml PDGF-BB单独向VSMLCs诱导)和诱导Ⅱ组(加入地塞米松1μmol/L、胰岛素1μmol/L、吲哚美辛1μmol/L、3-异丁基-1甲基黄嘌呤0.5 mmol/L,向脂肪细胞诱导),以大鼠胸大动脉平滑肌细胞作为阳性对照。分别于诱导后7 d和14 d,采用RT-PCR检测细胞平滑肌动蛋白(SMα-actin)、平滑肌球蛋白重链(SM MHC)、平滑肌钙结合蛋白(SM Calponin)和Periostin mRNA的转录水平,Western blot检测Periostin蛋白的表达水平。结果诱导Ⅰ组细胞的SMα-actin、SM MHC、SMCalponin和Periostin基因mRNA及Periostin蛋白的表达水平14 d比7 d显著增强,且差异有统计学意义(P<0.05);14 d与阳性细胞相比,差异无统计学意义(P>0.05);未诱导组及诱导Ⅱ组在14 d均无表达。结论 PDGF-BB(50 ng/ml)能够单独诱导BMSCs向VSMCs分化,Periostin在此过程中起重要作用。
田雨杨燕江德鹏蒋幼凡
关键词:间质干细胞细胞分化

相关作者

段才闻
作品数:20被引量:36H指数:4
供职机构:南华大学
研究主题:骨髓源性 氧化型低密度脂蛋白 骨髓间质干细胞 平滑肌样细胞 巨噬细胞源性泡沫细胞
何惠华
作品数:109被引量:271H指数:8
供职机构:武汉大学人民医院
研究主题:临床病理分析 文献复习 临床病理观察 临床病理特征 病理特征
严鹏科
作品数:191被引量:833H指数:14
供职机构:广州医科大学
研究主题:泡沫细胞 动脉粥样硬化 巨噬细胞源性泡沫细胞 适配子 替米沙坦
葛晓娜
作品数:20被引量:49H指数:4
供职机构:华中科技大学同济医学院
研究主题:转化生长因子-Α 转分化 平滑肌样细胞 低氧诱导 MYOCARDIN
朱朋成
作品数:28被引量:83H指数:5
供职机构:华中科技大学同济医学院
研究主题:低氧诱导 转分化 平滑肌样细胞 临床病理观察 MYOCARDIN