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一种Hobi样病毒实时 荧光 RT-PCR 检测方法 本发明属于生物技术领域。本发明提供了一种Hobi样病毒实时 荧光 RT ‑PCR 检测的引物、试剂盒及检测方法。所述引物的序列为:上游引物F:GGTAGTCGTCAATGGTTC;下游引物R:CCGCTTGAGTTAAGATTC... 罗阿东 周思旋 杨莉 徐景峨 李洁 朱祉聿 陈霄 殷倩鉴定类NADC-30毒株的实时 荧光 RT-PCR 检测引物和探针组 本发明公开了鉴定类NADC‑30毒株的实时 荧光 RT ‑PCR 检测引物和探针组,包括两对引物和探针,分别为N1‑F、N1‑R、N1‑P、N2‑F、N2‑R、N2‑P,本发明根据ORF1b和ORF5基因片段分别设计两对特异性引... 刘建奎 魏春华 徐叶 戴爱玲 杨小燕复合探针实时 荧光 RT-PCR 法检测小儿上呼吸道感染甲型流感病毒的价值 被引量:1 2024年 目的 分析小儿上呼吸道感染甲型流感病毒应用复合探针实时 荧光 反转录聚合酶链反应(RT-PCR )法检测的临床价值。方法选择2023年1月至2023年12月流感监测信息系统两家监测点上呼吸道感染甲型流感病毒感染的患儿80例监测标本进行回顾性分析,均开展复合探针实时 荧光 RT-PCR 法检测,分析其诊断价值。结果 根据监测标本最终诊断结果显示,阳性标本68例、阴性标本12例。经复合探针实时 荧光 RT-PCR 法检出67例,检出率为83.75%,敏感度为95.59%、特异度为83.33%、准确度为93.75%、阳性结果预测值为97.01%、阴性结果预测值为76.92%;批间批内变异系数均小于5%。结论 小儿上呼吸道感染甲型流感病毒应用复合探针实时 荧光 RT-PCR 技术具有较高的敏感度、特异度及准确度,且检查结果快速,可为小儿上呼吸道感染甲型流感病变提供可靠的诊断,有利于制订合理的治疗方案。 杨彬彬 陈秋虾 郭丽清关键词:上呼吸道感染 甲型流感病毒 用于马病毒性动脉炎病毒实时 荧光 RT-PCR 检测的引物、探针、试剂盒、方法及其应用 本发明公开了一种用于马病毒性动脉炎病毒实时 荧光 RT ‑PCR 检测的引物、探针、试剂盒、方法及其应用,涉及病毒检测技术领域,解决了现有技术中缺乏用于检测马病毒性动脉炎病毒核酸的荧光 RT ‑PCR 检测方法的问题。本发明的两套引物... 朱道中 曹志玲 熊文杰 佟铁铸 李明 鱼海琼 罗琼犬呼吸道病毒三重实时 荧光 RT-PCR 引物探针组合 本发明公开了一种犬呼吸道病毒三重实时 荧光 RT ‑PCR 引物探针组合,所述三重实时 荧光 RT ‑PCR 引物探针组合包括用于扩增犬瘟热病毒的引物探针组合、用于扩增犬腺病毒的引物探针组合和用于扩增犬副流感病毒的引物探针组合,基于该试... 韩丽 蔡聪 彭嘉安 张安定 王正果 苗树林一种猪繁殖与呼吸综合征病毒的三重实时 荧光 RT-PCR 检测方法及试剂盒 本发明提供了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒的三重实时 荧光 RT ‑PCR 检测方法及试剂盒,属于病毒PCR 检测技术领域。本发明针对猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性变异株、类NADC30株和类NADC34株设计并合成了特异性引物和探针... 梁文花 秦立廷 陈婷 李晓菲 孙君帅 戴荣莲 沈文慧 韩丽萍 于梦琪 刘希妍 袁霖犬瘟热病毒、犬冠状病毒和犬副流感病毒的三重实时 荧光 RT-PCR 引物探针组合及应用 本发明公开了犬瘟热病毒、犬冠状病毒和犬副流感病毒的三重实时 荧光 RT ‑PCR 引物探针组合及应用,属于生物检测技术领域。本发明根据目前犬瘟热病毒、犬冠状病毒和犬副流感病毒的特点,设计出一组检测犬瘟热病毒、犬冠状病毒和犬副流感... 韩丽 蔡聪 彭嘉安 张安定 叶贵珊 和魁静鸽A群轮状病毒实时 荧光 RT-PCR 检测方法的建立及应用 2023年 鸽A群轮状病毒(group A rotavirus,RVA)是影响养鸽业健康发展的主要病原之一。为实现鸽RVA的高通量快速检测,根据目前国内外流行的鸽RVA VP6基因保守区域设计特异性引物与探针,建立了一种可以特异性检测鸽RVA的实时 荧光 RT-PCR 方法,并对该方法的灵敏度、特异性和重复性进行了评估。结果显示,该方法灵敏度高,最低检测限为7.22×10^(2)copies/μL;特异性强,与鸽群其他常见病毒无交叉反应;重复性好,组内与组间重复变异系数均小于1.5%。利用该方法和普通RT-PCR 方法对200份临床样品进行检测,发现荧光 RT-PCR 方法的病毒阳性检出率高于普通RT-PCR 方法,二者符合率为94.00%。结果表明,本研究建立的实时 荧光 RT-PCR 方法敏感、特异、准确,重复性好,可为开展鸽RVA的临床检测及流行病学调查提供技术支持。 邢安琪 彭真奇 蒋文明 克军宏 李阳 陈璐 王静静 许立华 于晓慧 刘华雷关键词:实时荧光RT-PCR 同时检测PDCoV、TGEV、PoRV和PEDV的四重实时 荧光 RT-PCR 方法的建立及应用 被引量:6 2023年 为实现对猪德尔塔冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)、猪传染性胃肠炎(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)、猪轮状病毒(porcine rotavirus,PoRV)和猪流性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的同时鉴别检测,根据PDCoV M基因、TGEV S基因、PoRV VP6基因和TGEV N基因保守区域序列合成特异性引物和TaqMan探针,通过优化反应条件,成功建立了一种可同时检测PDCoV、TGEV、PoRV和PEDV的实时 荧光 RT-PCR 方法。结果显示,所建立的四重实时 荧光 RT-PCR 方法仅对PDCoV、TGEV、PoRV和PEDV出现阳性扩增,与PRV、PPV、PRRSV、CSFV、PCV2等猪常见病原无交叉反应;对PDCoV、TGEV、PoRV和PEDV的最低检出限分别为1.17×10^(3),1.13×10^(3),1.31×10^(2)和1.18×10^(2)拷贝;重复性好,组内和组间试验变异系数均小于4.5%。进一步应用所建立的同时检测PDCoV、TGEV、PoRV和PEDV的实时 荧光 RT-PCR 方法对199份采集自河北省不同地区腹泻猪的临床样品进行检测,结果检出23份PoRV阳性(11.56%)、12份PEDV阳性(6.03%)和1份TGEV阳性(0.50%),均为单一感染;未检出PDCoV阳性。本研究所建立的四重实时 荧光 RT-PCR 检测方法可实现对PDCoV、TGEV、PoRV和PEDV的同时鉴别检测,为实验室快速鉴别诊断猪病毒性腹泻提供了有效的技术支持。 高艺祥 王金凤 张倩 孙晓霞 刘立兵 顾文源 马宏伟 韩庆安 马增军 王建昌关键词:猪传染性胃肠炎 猪轮状病毒 不同基因型PRRSV实时 荧光 RT-PCR 诊断方法的建立及应用 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)俗称蓝耳病,主要以妊娠母猪繁殖障碍和仔猪呼系统症状为特征。此病病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒(Po... 龚帮俊关键词:猪繁殖与呼吸综合征 病毒载量