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同时检测幽门螺杆菌外排基因的引物、探针和方法
本发明公开了一种同时检测幽门螺杆菌外排基因的引物、探针和方法,属于分子生物检测技术领域,包括SEQ ID No.1~SEQ ID No.6所示的引物和SEQ ID No.7~SEQ ID No.9所示的Tagman探针...
刘国栋
耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌生物膜形成与外排基因AdeABC表达的相关性研究
2024年
目的 研究鲍曼不动杆菌的生物膜形成,以及浮游态和生物膜状态下对外排基因AdeABC的相对表达量作用于碳青霉烯类抗生素耐药机制的影响。方法 将菌株经药物敏感性试验分为碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)组和碳青霉烯类敏感鲍曼不动杆菌(CSAB)组,采用结晶紫染色法检测两组生物膜形成能力;通过微量肉汤稀释法分别测定两组对亚胺培南的MIC、MBIC值,并计算MBIC/MIC的比值进一步比较分析生物膜菌和浮游菌的耐药性;同时提取CRAB组浮游态和生物膜态的RNA,通过RT-qPCR检测外排基因AdeABC相对表达量。结果 35株标本的生物膜阳性率为91.43%,其中CRAB组生物膜的阳性检出率为92%,生物膜阴性、弱阳性、阳性和强阳性分别占8%、48%、36%和8%。MBIC/MIC比值显示,形成生物膜后,鲍曼不动杆菌的耐药能力呈现不同程度的增加,CSAB组的耐药增加幅度以2倍的菌株最多;CRAB组的增加幅度以4倍的菌株最多。同时CRAB组RT-qPCR结果显示,生物膜较浮游态相比,外排基因adeA和adeB的相对表达量明显增高(P<0.01),外排基因adeC相对表达量则无差异(P>0.05)。结论 鲍曼不动杆菌碳青霉烯类耐药与生物膜密切相关,且生物膜态的鲍曼不动杆菌较浮游态可促进外排基因AdeABC的表达从而增强碳青霉烯类抗生素的耐药性。
潘蓓珍刘岩宿建胜杨继飞姜菲菲孙丽媛
关键词:鲍曼不动杆菌亚胺培南生物膜外排泵
临床分离株鲍曼不动杆菌耐药性与AdeABC及AdeIJK外排基因表达相关性研究
2024年
目的 分析鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii, A.baumannii)感染病人分离的A.baumannii外排相关基因的携带情况,探讨其与抗生素的耐药之间的关联,为医院感染防控及临床合理用药提供实验依据。方法 选择2022年1月—2023年9月本院收治的感染A.baumannii的住院患者作为研究对象,共分离A.baumannii菌株55株,采用real-time PCR技术对A.baumannii外排adeA、adeB、adeC、adeI、adeJ、adeK等基因表达水平进行检测;MIC法和K-B法检测各菌株的抗生素敏感性。按美国CLSI2023年版要求对各菌株进行抗生素敏感性判断。结果 与敏感组A.baumannii比较,不敏感组A.baumannii的adeA、adeB、adeC、adeJ基因表达较高,差异具有统计学意义(P<0.05);相对于敏感组,不敏感组adeB表达水平表达上调约3~30倍,差异具有统计学意义(P<0.05),adeJ表达水平表达上调约11~876倍,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 adeB和adeJ在本机构临床株鲍曼不动杆菌抗生素耐药中发挥一定的作用,但多种耐药机制可能参与调节鲍曼不动杆菌耐药,针对AdeABC和AdeIJK外排的深层次耐药机制以及其他耐药因素的分析仍需进一步探讨。
刘辉邱付兰陈小东王玉霞阙荣良
关键词:鲍曼不动杆菌外排泵基因表达耐药
新疆某医院广泛耐药性耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌类消毒剂抗性和外排基因分析
2024年
目的探讨广泛耐药性耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(XDR-CRKP)消毒剂抗性水平,分析耐药性与消毒剂外排基因表达之间可能的联系。方法收集2023年3月至2024年6月新疆医科大学第五附属医院住院患者分离的非重复CRKP菌株,将其分为XDR组和非XDR组,采用VITEK 2 Compact进行复核和药敏试验,PCR检测菌株耐消毒剂基因cepA、qacE、qacE△1、qacE△1-sul1表达情况,微量肉汤稀释法检测碘伏、含氯消毒剂和苯扎溴铵消毒剂对菌株的最低抑菌浓度(MIC),比较两组抗生素耐药性、耐消毒剂基因表达和MIC。筛选两组CRKP耐药率差异较大的药物,比较其耐药菌株和非耐药菌株的外排基因表达差异。结果共收集68株CRKP菌株,包含XDR组20株,非XDR组48株。除替加环素和黏菌素外,两组菌株均有较高耐药性;XDR组和非XDR组基因qacE△1-sul1检出情况比较,差异有统计学意义(P<0.05)。庆大霉素耐药菌株和非耐药菌株qacE△1检出情况比较,差异有统计学意义(P<0.05)。复方新诺明耐药菌株和非耐药菌株qacE△1-sul1检出情况比较,差异有统计学意义(P<0.05)。苯扎溴铵对XDR组CRKP菌株MIC值高于非XDR组(P<0.05)。结论CRKP的耐药性和消毒剂抗性存在一定相关性,临床需制订合理的抗菌药物和消毒剂使用方案,有效控制耐药菌院内传播。
赵可心左秋霞汪晓阿迪拉·买买提牛珂代喆田萍
关键词:耐消毒剂基因最低抑菌浓度
肺炎克雷伯菌生物膜与耐药及外排基因的相关性研究
目的分析我院各科室肺炎克雷伯菌的临床特征及相关的耐药情况,探究肺炎克雷伯菌的生物膜形成强弱能力与抗生素耐药、外排基因的关系,分析生物膜状态下acr B、oqx B、rar A、ram A相对于浮游状态下的表达量,以及外...
戴和平
关键词:肺炎克雷伯菌耐药生物膜外排泵基因
鲍曼不动杆菌耐药性与外排基因、外膜孔蛋白基因的相关性研究被引量:3
2022年
目的探讨鲍曼不动杆菌的分子流行病学特征,检测其外排基因及外膜孔蛋白基因的携带情况,进一步研究外排及外膜孔蛋白与菌株耐药性的关系。方法收集广东省中山市西北部区域的鲍曼不动杆菌临床分离株,采用PCR技术扩增鲍曼不动杆菌的外排基因(ade B、ade R、ade S、ade J、abe M)以及外膜孔蛋白carO基因,同时对其进行抗菌药物耐药性检测。结果耐碳青霉烯类抗菌药物的鲍曼不动杆菌(CRABA)耐药性明显高于对碳青霉烯类抗菌药物敏感的鲍曼不动杆菌(CSABA),差异有统计学意义(P<0.05),其中有4株CRABA菌株对替加环素耐药。CRABA菌株中ade B、ade R、ade S以及ade J的检出率明显高于CSABA菌株,差异均具有统计学意义(P<0.05);abe M基因在CRABA与CSABA菌株中的检出率差异无统计学意义(P>0.05)。外膜孔蛋白carO基因在CRABA菌株中的检出率高于CSABA菌株,差异有统计学意义(P<0.05)。结论外膜孔蛋白以及外排系统是该地区CRABA的重要耐药机制之一,其中abe M基因可能与CRABA菌株耐药性无关。
陈荣忠杨子依向蓉
关键词:外排泵基因外膜蛋白碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌
肺炎克雷伯菌外排基因与消毒剂和抗菌药物耐药相关性研究被引量:4
2022年
目的 研究肺炎克雷伯菌临床分离株对常用消毒剂和抗菌药物的敏感性及外排基因携带情况,分析抗性基因与消毒剂抗性和抗菌药物耐药性之间的相关性。方法 从不同地区医院的临床血液标本中分离肺炎克雷伯菌,筛查外排基因qacE△1、qacE、cepA和emrE携带情况。通过肉汤微量稀释法评估受试菌对消毒剂和抗菌药物的敏感性,分析目标基因与细菌对消毒剂和抗菌药物耐药性之间的相关性。结果 cepA基因是分布最广的外排基因,其次是qacE△1、emrE。部分菌株对氧氟沙星等抗菌药物耐药,而多数菌株对美罗培南敏感,所有受试菌株均对多黏菌素B敏感。92.3%携带cepA基因的菌株对醋酸氯己定抗性明显升高,其MIC≥8 mg/L,显著高于未携带cepA的菌株;61.9%携带qacE△1菌株具有多药耐药性,显著高于qacE△1阴性分离株。结论 肺炎克雷伯菌普遍携带cepA和qacE△1基因,携带cepA基因可能与其对醋酸氯己定敏感性降低有关,携带qacE△1基因可能与受试菌多药耐药表型高度相关。
金虹王洪敏武雪冰张建中苏裕心
关键词:肺炎克雷伯菌消毒剂抗菌药物外排泵基因多药耐药性
老年科鲍曼不动杆菌耐药性及外排基因研究被引量:3
2022年
目的观察老年科临床分离鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物的敏感性及外排基因携带情况,为医院感染防控和临床合理用药提供理论依据。方法收集老年科临床分离的非重复鲍曼不动杆菌85株,采用纸片扩散法检测其对临床常用的15种抗菌药物的敏感性,并采用聚合酶链反应(PCR)方法检测adeB、adeG和adeJ基因的携带情况。结果鲍曼不动杆菌对多黏菌素B的敏感率为100.0%,对米诺环素(29.4%)、头孢哌酮-舒巴坦(35.3%)、阿米卡星(38.8%)和庆大霉素(41.2%)的耐药率较低,对其他检测药物的耐药率均超过50.0%,其中多重耐药菌为49株(占57.6%)。PCR结果显示,多重耐药鲍曼不动杆菌adeB、adeG和adeJ外排基因的阳性率分别为73.5%、77.6%和71.4%,高于非多重耐药鲍曼不动杆菌,差异有统计学意义(P<0.05)。结论老年科鲍曼不动杆菌耐药形势较严峻,其多重耐药与携带adeB、adeG和adeJ基因相关。
侯盼飞余九峰周素芹
关键词:鲍曼不动杆菌耐药性外排泵老年科多重耐药
多重耐药铜绿假单胞菌RND外排基因调控研究进展被引量:4
2022年
铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是一种革兰氏阴性非发酵菌,在自然界中广泛存在并能耐受恶劣环境,可引起各种医院获得性感染,包括肺炎、血流感染和囊性纤维化患者的感染,同时也是囊性纤维化患者的主要致死原因。目前,多重耐药铜绿假单胞菌感染增加,给临床治疗带来困难,所以迫切需要新的抗生素进行防治。铜绿假单胞菌的耐药机制十分复杂,其中外排的过度表达促使抗生素从细胞内排出是导致抗生素抗菌活性降低的重要原因。
刘莹费冰任彦颖郭梦雨刘心伟刘冬梅李永伟
关键词:多重耐药铜绿假单胞菌囊性纤维化医院获得性感染非发酵菌致死原因基因调控
基于全基因组测序对双重耐药幽门螺杆菌外排基因变异的研究
2021年
背景世界上50%以上的人口感染幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori).随着抗生素的广泛使用,抗生素耐药成为H.pylori感染患者根除失败的主要原因.目前有不少研究报道外排基因过表达和耐药的产生相关.目的为了未来的H.pylori感染治疗有更多方法,探索外排基因的变异与双重耐药菌株耐药性产生的内在联系.方法使用^(13)C呼气试验及药物敏感试验进行双重耐药菌株及敏感菌株的筛选,用特异性PCR的常规方法进行耐药基因突变位点的验证,基于MiSeq平台,对10例临床菌株进行全基因组测序,以鉴定双重耐药表型与敏感表型的外排基因的单核苷酸变体(single nucleotide variants,SNV)并分析,参考菌株使用ATCC26695.结果H.pylori药敏试验结果显示,丽水地区H.pylori对克拉霉素及左氧氟沙星都具有较高的耐药率.采用特异性PCR法在5株临床双重耐药菌株中检测到23S rRNA基因及gyrA的点突变,在5株临床敏感菌株中未检测到.全基因测序检测了涉及多耐药性的TolC同源物的四个基因簇(HP0605-HP0607,HP0971-HP0969,HP1327-HP1329和HP1489-HP1487)的遗传变异.在双重耐药性H.pylori菌株中发现一个突变的SNV.结论丽水地区抗生素使用应严格监控,避免滥用.TolC同源基因基因簇与H.pylori菌株的抗生素耐药性相关.全基因组测序对基因型与表型的关系有了新的认识.
叶淑芳张剑美代飞蓝陈菊章小君周丽珍汤清清孟飞
关键词:幽门螺杆菌全基因组测序外排泵基因

相关作者

孙静娜
作品数:91被引量:286H指数:8
供职机构:河北医科大学第一医院
研究主题:鲍曼不动杆菌 多重耐药 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 外排泵 多重耐药鲍曼不动杆菌
王国欣
作品数:29被引量:107H指数:7
供职机构:河北医科大学第一医院
研究主题:鲍曼不动杆菌 多重耐药 外排泵 多重耐药鲍曼不动杆菌 外排泵基因
糜祖煌
作品数:460被引量:3,048H指数:32
供职机构:无锡市克隆遗传技术研究所
研究主题:耐药基因 基因研究 铜绿假单胞菌 分离株 鲍曼不动杆菌
翁幸鐾
作品数:100被引量:473H指数:13
供职机构:宁波市第一医院
研究主题:大肠埃希菌 可移动遗传元件 肺炎克雷伯菌 分离株 耐药
刘健华
作品数:86被引量:525H指数:14
供职机构:华南农业大学
研究主题:大肠杆菌 耐药性 动物源 耐药 耐药性调查