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荷载LASP-1基因siRNA的条件增殖型腺病毒的构建: 2022年; 目的利用腺病毒包装质粒pBHGE3与携带LASP-1 siRNA的穿梭质粒pZD55-LASP-1、pCA13-LASP-1在HEK293细胞内,包装成病毒ZD55-LASP-1和Ad-LASP-1。方法利用Effectene DNA转染试剂将质粒pBHGE3与质粒pZD55-LASP-1、pCA13-LASP-1分别感染HEK293细胞,纯化并扩增病毒。通过PCR鉴定Ad-LASP-1、ZD55-LASP-1是否包含目的基因,E1区是否缺失及有无野生型腺病毒污染。鉴定正确的病毒进行扩增,CsCl梯度离心纯化,TCID50法测病毒滴度。结果PCR鉴定证明ZD55-LASP-1未混杂野生型腺病毒,且包含目的序列LASP-1 siRNA;Ad-LASP-1 E1区缺失,且包含目的序列LASP-1 siRNA。ZD55-LASP-1滴度为4×10^(10) PFU/ml,Ad-LASP-1滴度为2×10^(10)PFU/ml。Western-blot证实ZD55-LASP-1在肿瘤细胞中表达E1A,Ad-LASP-1不表达E1A。结论靶向表达LASP-1 siRNA序列的病毒ZD55-LASP-1重组成功,为肾癌的下一步基因治疗提供了基础。; 孙方浩郑骏年王尚魏晋曹希亮张义静; 关键词：肾细胞癌

荷载LASP--1基因siRNA的条件增殖型腺病毒治疗肾癌研究: 肾细胞癌简称肾癌(Renalcellcarcinoma,RCC),在肾脏恶性肿瘤中排名第一，在泌尿系所有恶性肿瘤中仅次于膀胱癌，位居第二，主要发生于肾小管上皮细胞，约占成年患者所有恶性肿瘤的2％-3％,该病发病机制复杂，...; 孙方浩; 关键词：肾细胞癌

限制增殖型腺病毒: 本发明的目的在于提供一种新型限制增殖型腺病毒及含有其的癌细胞的检测用或癌的诊断用试剂。本发明提供一种依次含有人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子、E1A基因、IRES序列及E1B基因、且含有第一miRNA的靶序列的多核苷...; 水口裕之樱井文教

PSA启动子调控并荷载hTERT-siRNAs的条件增殖型腺病毒的构建及生物学活性被引量：2: 2015年; 目的构建前列腺特异抗原（PSA）启动子调控并荷载hTERT-siRNAs的条件增殖型腺病毒，研究其对前列腺癌的特异性抗肿瘤作用。方法EcoRV和Xba1分别酶切pZD55-hTERT-shRNA和pZXC2-PSA-E1A，将目的片段连接重组，获得质粒pPSA-ZD55-hTERT，将其与质粒pBHGE3共转染293细胞。PCR鉴定正确者即为条件增殖型腺病毒PSA-ZD55-hTERT。结晶紫染色观察其对前列腺癌细胞毒性。RT-PCR、Westernblot检测前列腺癌细胞中hTERT基因沉默效果。Westernblot检测E1A在前列腺癌细胞中的表达。结果成功构建PSA启动子调控并荷载hTERT-siRNAs的条件增殖型腺病毒PSA-ZD55-hTERT，初步证实PSA-ZD55-hTERT复制具有前列腺癌靶向性和特异的hTERT沉默效果。结论成功构建条件增殖型腺病毒PSA-ZD55-hTERT，为进一步体内外研究其对前列腺癌的治疗作用奠定基础。; 孙方浩郑骏年魏晋刘星徐觉见陈伟; 关键词：HTERT基因腺病毒

限制增殖型腺病毒: 本发明的目的在于提供一种新型限制增殖型腺病毒及含有其的癌细胞的检测用或癌的诊断用试剂。本发明提供一种依次含有人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子、E1A基因、IRES序列及E1B基因、且含有第一miRNA的靶序列的多核苷...; 水口裕之樱井文教

表达hTERT基因的重组非增殖型腺病毒及应用: 本发明提供一种表达hTERT基因的重组非增殖型腺病毒。是从质粒pIRES2-EGFP-hTERT中酶切获得目的基因hTERT，插入pSG218穿梭载体中巨细胞病毒启动子的下游，得到携带hTERT基因的重组穿梭载体，再将该...; 张越峰金洁

条件增殖型腺病毒PSA—ZD55-hTERT对人前列腺癌细胞移植瘤的抑制作用被引量：1: 2014年; 目的探讨条件增殖型腺病毒PSA—ZD55-hTERT对人前列腺癌LNCaP细胞移植瘤端粒酶逆转录酶（hTERT）基因表达和肿瘤生长的抑制作用。方法建立人前列腺癌LNCaP细胞裸鼠移植瘤模型，瘤体内注射PSA—ZD55-hTERT，定期测量肿瘤体积，免疫荧光检测移植瘤组织中E1A及hTERT表达，原位末端标记法（TUNEL）检测肿瘤细胞凋亡。结果PSA—ZD55-hTERT能有效沉默hTERT基因，PSA—ZD55-hTERT组hTERT表达水平显著低于Ad—hTERT组、Ad—EGFP组及PBS组，差异显著；Ad—hTERT组、Ad—EGFP组及PBS组细胞凋亡阳性率分别为（49．7±5．1）％、（28．8±4．0）％和（2．8±2．4）％，而PSA—ZD55-hTERT细胞凋亡阳性率为（73．5±6．4）％，表明PSA—ZD55-hTERT能有效诱导肿瘤细胞凋亡；PSA—ZD55-hTERT接种7周后肿瘤体积为（131．5±28．2）mm^3，明显低于Ad—hTERT组[（469．2±74．3）mm^3]、Ad—EGFP组[（583．0±98．5）mm^3]和PBS组[（1547．5±196．4）mm^3]。结论PSA—ZD55-hTERT对裸鼠人前列腺癌LNCaP细胞移植瘤有显著的治疗效果，为治疗前列腺癌提供新的平台。; 孙方浩郑骏年魏晋刘星徐觉见陈伟; 关键词：HTERT基因

Ki67启动子调控、荷载PARP1shRNA的条件增殖型腺病毒的构建及其治疗三阴性乳腺癌的体外实验研究: 目的：构建Ki67启动子调控的荷载PARP1shRNA的条件增殖型腺病毒，研究其在体外对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231和MDA-MB-468的影响。　　方法：1.由公司设计、构建靶向PARP1基因的四个重组质粒pG...; 郑侠; 关键词：三阴性乳腺癌腺病毒

荷载IL-24基因的条件增殖型腺病毒联合替莫唑胺治疗黑色素瘤的实验研究: 目的：研究荷载IL-24基因的条件增殖型腺病毒ZD55-IL-24、KI67-ZD55-IL-24联合烷化剂替莫唑胺对黑色素瘤细胞增殖和凋亡的影响并探讨其可能的协同促凋亡机制。　　方法：腺病毒转染HEK293细胞，扩增，...; 蒋爱军; 关键词：黑色素瘤 IL-24基因替莫唑胺疗效评价

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