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一种适用于指状青霉菌W03的CRISPR/Cas9基因敲除载体及其构建方法和应用: 本发明公开一种适用于指状青霉菌W03的CRISPR/Cas9基因敲除载体及其构建方法和应用，包括单基因敲除载体和双基因敲除载体；本发明还提供了指状青霉菌W03突变菌株鉴定方法。本发明通过利用病原真菌内源的启动子和tRNA...; 王明爽张晶阮若昕曹文倩刘玉娇

Rv1815作为靶点在制备用于抗结核菌制剂的应用及构建其基因敲除载体和基因敲除突变体的构建方法: 本发明提出了一种Rv1815作为靶点在制备用于抗结核菌制剂的应用及构建其基因敲除载体和基因敲除突变体的构建方法、属于生物医药技术领域，所述Rv1815作为靶点在制备用于抗结核菌制剂的应用，本发明通过功能性实验，证实了该R...; 冯起顺张国良许慧刘文齐彭武建

甜菜BvNLP2-like基因敲除载体构建与拟南芥中模拟敲除: 2025年; 【目的】为研究此前自甜菜中发现的BvNLP2-like基因的功能,需要观察其过表达与基因敲除对性状的影响。本研究旨在构建该基因的敲除载体,同时构建拟南芥中同源基因敲除载体并进行模拟敲除。【方法】以甜菜BvNLP2-like基因为研究对象,利用CRISPR/Cas9基因编辑基础载体,设计构建BvNLP2-like基因的敲除载体;同时寻找拟南芥中与之同源的基因,构建该拟南芥基因的敲除载体,最后利用农杆菌介导法将拟南芥基因敲除载体转化拟南芥以验证敲除效果。【结果】设计并构建了BvNLP2-like基因的敲除载体pHK2-Cas9-U6-BV,拟南芥中同源基因的敲除载体pHK2-Cas9-U6-AT,通过模拟敲除得到了基因组中目的基因发生缺失突变的植株,表明使用CRISPR/Cas9基因编辑技术可以成功实现该NLP基因的敲除。【结论】本研究得到了2种可用于NLP基因基因敲除的载体,为此基因在甜菜中的功能研究奠定了基础。; 王希王希张西宁张琦张琦赵春雷; 关键词：甜菜基因敲除

一种毕赤酵母高效无痕基因敲除载体及其应用: 本发明公开了一种毕赤酵母高效无痕基因敲除载体及其应用，属于微生物基因工程领域。本发明毕赤酵母高效无痕基因敲除载体包括两个不同条件诱导的压力基因表达盒、筛选基因表达盒、待敲除片段的上、下游同源序列及该片段内部同源序列；本发...; 闫云君焦梁成赵国威李云翀张后今

一种基于CRISPR/Cas9技术的银杏基因敲除载体及其应用: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9技术的银杏基因敲除载体及其应用，所述银杏基因敲除载体为CRISPR/Cas9敲除载体pYLCRISPR‑AtU3d‑AtU3b‑AtU6‑1‑Cas9载体，该载体以多元载体pYL...; 刘思安褚伊萱张瀚月万鹏王莉

基因敲除载体在调节林木生长及木质部发育中的应用: 本发明公开了基因敲除载体在调节林木生长及木质部发育中的应用，涉及林木育种技术领域。基因敲除载体为PagHsfB4亚家族4个基因PagHsfB4a、PagHsfB4b、Pag...; 张进王睿洋吴逵卢孟柱

基因敲除载体在调节林木生长及木质部发育中的应用: 本发明公开了基因敲除载体在调节林木生长及木质部发育中的应用，涉及林木育种技术领域。基因敲除载体为PagHsfB4亚家族4个基因PagHsfB4a、PagHsfB4b、PagHsfB4c、PagHsfB4d的敲除载体pYL...; 张进王睿洋吴逵卢孟柱

亚麻纤维素合成酶基因敲除载体及其构建方法和应用: 本发明公开了亚麻纤维素合成酶基因敲除载体及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明以亚麻纤维素合成酶基因LusCESA4和LusCESA8为目标基因，利用CRISPR/Cas9编辑系统，分别构建了LusCESA4和...; 郭媛肖青梅温岚

利用FvePILS5基因的CRISPR/Cas9基因敲除载体获得再生效率高的草莓新种质的方法及应用: 本发明涉及一种利用FvePILS5基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体获得再生效率高的草莓新种质的方法及应用，包括：根据草莓FvePILS5的DNA序列，设计并合成包含目的基因靶点的sgRNA序列；用Bsa I酶将合...; 顾婷婷菅宝霞李宪杨吴旭婷刘德才丁静

小立碗藓PpCAD4基因敲除载体的构建及功能研究: 2023年; 木质素是植物抵御外界环境的重要成分,肉桂醇脱氢酶(cinnamic alcohol dehydrogenase,CAD)是木质素合成途径中的关键酶和限速酶之一。前期数据表明,在灰霉菌侵染下,PpCAD4基因上调表达,但PpCAD4功能尚未明确。本次研究利用同源重组原理构建PpCAD4.1-PTN182-PpCAD4.2敲除载体,从而破坏PpCAD4的alcohol dehydrogenase GroES-like domain(ADH_N)和zinc-binding dehydrogenase(ADH_zinc_N)结构域。利用PGE 6000介导小立碗藓原生质体转化,筛选并鉴定得到敲除PpCAD4突变体植株。qRT-PCR表明,敲除型植株中PpCAD4的表达量相对野生型减少了84%。通过对配子体的形态观察发现,PpCAD4突变株通过增加配子体中拟叶的数量,使得植株生物量增加,这表明CAD4在早期陆生植物的生长发育中起着重要作用。用灰霉菌侵染小立碗藓发现,0.5 d后野生型配子体菌丝入侵率为15%,cad4-ko菌丝入侵率为40%。侵染1 d后,Ppcad4-ko配子体菌丝侵入率是野生型的2倍。表明PpCAD4能够增加小立碗藓对真菌病原菌的抗性。; 田旭闫慧清刘露谢丽成亮姜山; 关键词：木质素肉桂醇脱氢酶小立碗藓基因敲除灰霉菌

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