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干旱胁迫下萝卜种子萌发期蛋白的双向电泳分析被引量：1: 2024年; 种子萌发是植物生长、发育的最初阶段,也是容易遭到包括干旱在内的非生物胁迫的重要时期。蛋白组学是解析植物响应逆境胁迫的主要策略之一,双向电泳分离是蛋白组学的重要手段和环节。本研究以“春不老”萝卜为材料,利用聚乙二醇-6000(PEG-6000)模拟干旱胁迫,对干旱胁迫下萝卜种子萌发早期无子叶胚蛋白进行双向电泳分离和蛋白图谱差异分析。采取直接对萝卜无子叶胚体样品进行裂解和上样的方法,可得到分辨度和重复性较好的双向电泳蛋白图谱;对干旱胁迫下的萝卜种子萌发早期无子叶胚蛋白表达图谱进行差异分析,共检测和匹配265个萝卜蛋白点,响应干旱胁迫的蛋白质点有28个,其中13个显著上调表达,15个显著下调表达。研究结果表明,部分萝卜种子萌发期蛋白响应了干旱胁迫,为后续的蛋白质谱分析和响应蛋白的鉴定工作打下良好基础。本研究采用的对植物样品直接裂解和上样的方法,也为其他植物蛋白的双向电泳分析提供了借鉴。; 崔和馨; 关键词：萝卜干旱胁迫双向电泳

低温胁迫下淡色库蚊体内蛋白表达的双向电泳分析: 2020年; 目的探索低温胁迫对淡色库蚊体内蛋白质表达的影响。方法以室内饲养淡色库蚊为对照,利用双向电泳技术,比较低温处理后淡色库蚊体内蛋白质表达谱的差异。结果处理组和对照组蛋白质浓度分别为8.5μg/μL和4.76μg/μL,二者差异有统计学意义(P<0.05)。经双向电泳分析,共发现2倍差异蛋白点77个,低温处理组表达量上调的蛋白点30个,表达量下调的蛋白点47个;低温处理组特有蛋白点14个,分子量主要在25~60 kDa之间。共鉴定出25个差异表达蛋白质,主要与细胞骨架的重塑、糖代谢、能量代谢以及各种合成酶和代谢酶有关。结论低温处理可诱导淡色库蚊体内蛋白质的表达变化,对差异蛋白的进一步分析有望获得淡色库蚊的抗冻蛋白。; 马荣刘丽娟; 关键词：淡色库蚊低温胁迫双向电泳质谱分析

干旱胁迫下小麦根部蛋白表达变化的双向电泳分析: 2020年; 干旱是影响小麦生长和产量的主要环境因素之一,研究小麦耐旱机制对提高小麦产量保证粮食安全有重要的意义。本研究以耐旱小麦晋麦79为材料,利用双向电泳技术,对其两叶一心期幼苗在16.7%PEG-6000胁迫0、1、6、72 h的根部蛋白质表达谱进行分析,比较不同胁迫时间点的小麦蛋白质表达谱的差异。结果表明,相对于0 h的表达谱,67种蛋白质在不同的胁迫时间点改变了其表达丰度。对其中至少在某一个时间点上调表达2倍以上的20个蛋白质点进行基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)分析,质谱结果中得到了18个阳性蛋白质点的信息,包括9个功能已知的蛋白和9个未鉴定的蛋白。已知功能的蛋白涉及到能量代谢、胁迫耐受性、信号转导和蛋白质合成/代谢等生理生化过程,表明植物在干旱胁迫下调节多种蛋白质的表达,综合调控其耐旱性。同时,干旱胁迫下未鉴定的丰度差异蛋白质点(DAPs)为克隆新的干旱相关基因和进一步研究小麦的耐旱机理提供了有价值的信息。本试验结果为进一步研究小麦耐旱机理奠定了基础。; 邓艳君王聪赵利利连娟宋芳媛刘娜赵宝存; 关键词：小麦耐旱双向电泳 MALDI-TOF-MS

重金属铜胁迫下小珊瑚藻差异蛋白的双向电泳分析被引量：1: 2020年; 本研究以小珊瑚藻为试材,设置不同浓度梯度的Cu^2+(0.25 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L),提取藻体蛋白进行双向电泳,从蛋白质水平研究Cu^2+离子胁迫对小珊瑚藻的影响,为小珊瑚藻抗铜机制的探究及研发海洋环境的监测途径提供一定的理论依据.结果显示:在Cu^2+胁迫下,小珊瑚藻藻体蛋白表达发生变化,体现出明显的“低促高抑”效应,其中0.25 mg/L Cu^2+处理组变化尤为显著,差异大于2.5倍的显著差异蛋白点有49个;进一步选取7个差异蛋白点进行质谱分析,成功鉴定出4个阳性结果,分别为ABC转运蛋白、超氧化物歧化酶、叶绿素外在蛋白及保守假定蛋白.; 王小蓓刘庆王秀静李丽霞; 关键词：重金属铜胁迫双向电泳差异蛋白

勃氏甜龙竹笋蛋白的提取及双向电泳分析被引量：1: 2019年; 为建立一套适于勃氏甜龙竹笋蛋白的双向电泳体系,分别采用TCA/丙酮法和改良TCA-酚法提取竹笋总蛋白,pH 3~10和pH 4~7的IPG胶条进行蛋白双向电泳研究。结果表明,TCA/丙酮法更适合勃氏甜龙笋总蛋白的提取,不仅具有更高的提取率,而且还能提取更多的蛋白种类;采用24 cm,pH 4~7线性IPG胶条,共分离出约1 196个蛋白点,比pH 3~10胶条获得更多的蛋白点数量,且蛋白点清晰可见,分辨率更高,分离效果更好。勃氏甜龙竹的竹笋蛋白主要是以等电点在pH 4~7,分子量集中在10~40 kDa范围内的低分子量酸性蛋白为主。; 杨慧敏吴良如杨金来潘雁红郑友苗; 关键词：勃氏甜龙竹竹笋蛋白提取双向电泳

大豆叶片蛋白响应干旱胁迫的双向电泳分析被引量：3: 2019年; 大豆是我国重要的农作物之一,蛋白质组学技术是解析植物响应逆境胁迫的重要工具之一。为进一步推进对响应干旱胁迫的大豆叶片蛋白的鉴定工作,以大豆幼苗的叶片为研究对象,用甘露醇溶液模拟干旱胁迫,处理24 h后提取叶片蛋白粉进行双向电泳分离和图谱差异分析。结果表明:采取三氯醋酸(TCA)-丙酮沉淀法提取的叶片蛋白进行双向电泳分离能够得到稳定清晰的双向电泳蛋白图谱。采取PD-Quest软件对干旱胁迫下的大豆叶片蛋白表达图谱进行差异分析,共检测和匹配425个大豆叶片蛋白点,其中差异表达的蛋白点有101个,60个表达量上调,41个表达量下调。本研究结果表明有一部分大豆叶片蛋白响应了干旱胁迫。; 甄文轩杨晓桐郭歌扬宋颖赵雨薇臧新; 关键词：大豆干旱胁迫双向电泳

适用于双向电泳分析的链格孢菌体蛋白提取方法的筛选被引量：1: 2019年; 为筛选出一套适用于双向电泳分析的链格孢菌蛋白的提取方法,以该菌为研究材料,首先采用TCA-丙酮法、磷酸-TCA-丙酮法、SDS提取法和TCA/丙酮-SDS/酚抽提法分别提取菌丝蛋白质,然后进行蛋白质浓度的测定和单向SDS-PAGE试验,并建立双向电泳体系。结果表明:TCA/丙酮-SDS/酚抽提法所获得的蛋白质浓度为15.9 mg/mL,分别是其他三种方法所得蛋白浓度的2.64、4.61和1.43倍;SDS-PAGE图谱中形成的条带数目最多、丰度最好;所获得的2-DE图谱背景清晰干净,无明显的横纵条纹,分辨率高,可辨别的蛋白质点数为1 138个,是TCA-丙酮法所分离蛋白点数的1.89倍。由此可知,TCA/丙酮-SDS/酚抽提法为链格孢菌蛋白提取的最优方法,该方法所提取的蛋白质适用于双向电泳分析及后续的蛋白质组学研究。; 李贞彪王军节王鹏; 关键词：链格孢采后病害蛋白质提取双向电泳

一种排硫硫杆菌蛋白质双向电泳分析方法: 本发明涉及一种排硫硫杆菌细胞蛋白的电泳分析方法，其具体步骤如下：A.排硫硫杆菌细胞蛋白的提取，B.SDS‑PAGE凝胶的制备，C.双向凝胶电泳，D.染色处理及图像扫描。本方法操作流程清晰简单，分析效果较好，能够较好分离辨...; 胡永红刘鑫鑫夏宇成杨文革徐强李海涛孔京王晓宁郝爱香

建瓯白笋及其竹叶蛋白双向电泳分析: 2018年; 建瓯白笋属于毛竹笋,其肉质鲜嫩、通体洁白、口感脆甜。以建瓯白笋及其竹叶为原料,采用酚抽提法提取竹笋总蛋白,得到了2个质量浓度为11.13和9.98 mg·mL^(-1)的蛋白样品,并进行了总蛋白的双向电泳实验(pH=3～10)。结果表明,建瓯白笋及其竹叶中蛋白种类丰富,其蛋白点数分别为1 626个和900个,竹笋多于竹叶,也多于杭州余杭毛竹冬笋(1 024个);等电点主要集中在pH=5～7,建瓯白笋及其竹叶蛋白点分别为1 102个和589个,占总蛋白点数的67.8%和65.4%;建瓯白笋及其竹叶蛋白的分子量均主要分布在18～66 kDa,蛋白点个数分别为1 083(66.6%)和672(74.7%),以35～45 kDa范围最为集中。因此,建瓯白笋及其竹叶是一种潜在的天然优质植物蛋白源。; 杨金来吴良如吴良如杨慧敏潘雁红修诚明; 关键词：竹叶蛋白双向电泳分析

油茶种仁总蛋白提取及双向电泳分析被引量：2: 2018年; 以油茶种仁为实验材料,用不同方法提取油茶种仁总蛋白,同时对双向电泳条件进行了探索与优化,建立了一套适合油茶种仁总蛋白双向电泳分析的优化体系。结果表明:改良后的TCA-丙酮法可以有效提取出油茶种仁总蛋白,得到了816个蛋白点,蛋白点主要集中在等电点p H 4.0~6.0之间;选用17 cm p H 4~7 IPG胶条,优化的等电聚焦程序为250 V 0.5 h、1 000 V 2 h、8 000 V5 h、8 000 V 60 000 Vh和500 V 24 h,可获得背景清晰、分辨率较高的双向电泳图谱。; 吴波阮成江杜维闫蕊刘祾悦; 关键词：油茶双向电泳

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