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慢性心力衰竭患者尿液双向凝胶电泳技术的优化: 2017年; 目的:分析慢性心力衰竭患者尿液双向电泳技术的影响因素以提高其分辨率及稳定性.方法:采用超滤法富集并浓缩尿液蛋白,Bradford法测浓度后进行双向电泳,凝胶经银染显色后,用Melanie 4软件分析双向电泳图谱.分别对蛋白上样量,聚焦参数等步骤进行优化.结果:超滤浓缩法,150μg的上样量,60 KVh的聚焦总伏特数,进行的双向电泳图谱分辨率高,稳定性好.结论:对上样量和聚焦总伏特数优化后可获得稳定性高和重复性好的慢性心力衰竭患者尿液双向电泳图谱,以便开展后续研究.; 侯丽娜刘炜烨贾小平李亮李小溪; 关键词：慢性心力衰竭尿液双向凝胶电泳蛋白质组

绵羊血清蛋白双向凝胶电泳技术的建立被引量：3: 2017年; 【目的】建立和优化绵羊血清蛋白双向电泳体系(2-DE)。【方法】从样品提取及处理、IPG胶条的选择、SDS-PAGE浓度的选择等多个方面对双向电泳分离条件进行比较。【结果】采用10%TCA/丙酮沉淀法处理血清蛋白质,18 cm p H 4~7的IPG胶条2.5 mg上样量,10%SDS-PAGE,获得的2-DE图谱效果较好。【结论】获得良好的绵羊血清蛋白双向电泳图谱,建立并优化了绵羊蛋白质组学的双向电泳技术体系,为转基因绵羊生物安全性评价提供了重要的技术条件。; 张译元唐红郭延华王新华王立民周平; 关键词：绵羊血清蛋白质组双向电泳

基于双向凝胶电泳技术的中医寒、热体大鼠蛋白质组表达谱研究被引量：3: 2015年; 目的:利用双向凝胶电泳技术对中医寒、热体大鼠进行蛋白质组表达谱研究,以期寻找与寒热体相关的蛋白质,并探讨中医寒、热体形成的生物学基础。方法:提取大鼠肝脏细胞的总蛋白,采用双向凝胶电泳(2-DE)及MALDI-TOF-MS质谱技术筛选并鉴定寒热体表达差异的蛋白质群。结果:经过筛选和质谱技术共获得10个具有统计学意义的蛋白表达差异点:氨甲酰磷酸合成酶、二硫键异构酶、过氧化氢酶、过氧化氢异构酶、细胞质氨肽酶、谷氨酸脱氢酶、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶、热休克蛋白前体、同型半胱氨酸、葡萄糖调节蛋白前体。结论:中医寒热体大鼠在蛋白质组表达方面存在一定的差异性,酶类蛋白代谢异常可能是寒热体形成的物质基础之一。; 张伟妃李福凤孙祝美张瑞义郭春荣张伟荣; 关键词：寒体差异蛋白质双向凝胶电泳质谱分析

脾虚证小鼠脾脏蛋白质双向凝胶电泳技术的建立: ：通过双向凝胶电泳建立脾虚证小鼠与正常小鼠脾脏蛋白质分辨率高,重复性好蛋白质表达图谱,并分析其差异表达蛋白质.方法：通过改良固相PH梯度双向凝胶电泳环节的条件,获得分辨率高的脾虚证小鼠与正常小鼠脾脏蛋白质图谱,PDque...; 张帆雷英; 关键词：脾虚证中医病机动物模型脾脏组织双向凝胶电泳

利用双向凝胶电泳技术研究清化饮治疗慢性胃炎脾胃湿热证: 目的:1、采用清化饮治疗慢性胃炎脾胃湿热证患者,进一步观察清化饮的临床疗效.2、通过分析健康对照组、慢性胃炎脾胃湿热证清化饮治疗前组(治疗前组)、清化饮治疗后组(治疗后组)胃黏膜蛋白的双向凝胶电泳图谱,找出慢性胃炎脾胃湿...; 付肖岩陈小玲; 关键词：慢性胃炎脾胃湿热证清化饮双向凝胶电泳技术

双向凝胶电泳技术在食管癌差异蛋白表达检测中的应用被引量：1: 2014年; 目的寻找食管鳞癌早期诊断、疗效评估、预后监测的生物学标记物。方法应用双向凝胶电泳分析10例患者食管鳞癌组织和相应癌旁组织的蛋白表达谱,并对差异表达蛋白质进行质谱鉴定。结果共鉴定出29个差异表达蛋白,包括核不均一核糖核蛋白F等12个上调蛋白和人类蛋白酶体激活剂PA28β等17个下调蛋白。结论食管鳞癌组织与相应癌旁组织的蛋白表达谱的表达具有显著差异性,表达差异的蛋白有可能成为食管鳞癌潜在的肿瘤标志物。; 陈金烟韩俊永薛士杰金静君王坤徐丽方卫民; 关键词：食管鳞癌双向凝胶电泳肿瘤标志物

广州管圆线虫Ⅴ期幼虫蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立和优化被引量：2: 2012年; 目的优化双向凝胶电泳的条件,建立适合广州管圆线虫Ⅴ期幼虫的最适二维电泳模型。方法经研磨、反复冻融提取广州管圆线虫Ⅴ期幼虫蛋白质,测定其浓度后分别用pH3～10和pH4～7的固相胶条进行双向凝胶电泳,同时对双向电泳的条件进行调节和优化,银染后进行凝胶图像比较。结果采用pH3～10的胶条分离蛋白时,蛋白质点分布较集中,各蛋白点间间距较小;pH4～7的胶条分辨率较高,蛋白分布均一,获得719个蛋白点,各蛋白点间距相对较大,避免了高丰度掩盖低丰度蛋白点,在相同的pH范围内,检测到的蛋白点更多,灵敏度更高。结论建立和优化适合广州管圆线虫的二维电泳模型,其重复性好、分辨率高,为广州管圆线虫的蛋白质组学研究奠定了基础。; 宋增梅黄慧聪潘长旺; 关键词：广州管圆线虫蛋白质组学双向凝胶电泳

血清蛋白质组双向凝胶电泳技术优化被引量：1: 2011年; 蛋白质组学已成为生命科学研究的重点，是寻求疾病标志物的重要源泉。通过血清蛋白质组学研究，寻找特定疾病的血清特异蛋白质标志物或发现新的疾病相关蛋白质，能为疾病的诊断或治疗提供新的依据，也可能进一步阐明一些复杂疾病的发病机制。自1975年O’Fan＇ell提出高分辨率双向电泳技术以来，该技术有了长足的发展，并与质谱技术、生物信息学技术成为蛋白质组学研究的三大核心技术。; 董红王世鑫罗来龙栾大伟; 关键词：血清蛋白质组学双向凝胶电泳技术生物信息学技术双向电泳技术相关蛋白质

姜黄素逆转人结肠癌细胞HCT-8/VCR的双向凝胶电泳技术的建立及优化: 2011年; 目的建立并优化姜黄素逆转人结肠癌细胞HCT-8/VCR蛋白质组的双向电泳技术。方法姜黄素作用于人结肠癌细胞HCT-8/VCR,提取蛋白质。对双向凝胶电泳中蛋白质样品的处理,蛋白上样量,IPG胶条的选择,以及聚焦条件等进行调整和优化。结果采用瓶内刮取的方法裂解细胞,pH3-10NL的胶条,上样量200 ug,延长除盐时间,聚焦60 000伏小时,可以得到分辨率较高、重复性较好的双向电泳图谱。结论初步建立了分辨率较高且重复性较好的姜黄素逆转人结肠癌细胞HCT-8/VCR蛋白质双向凝胶电泳图谱。; 李雷傅仲学覃勇卢伟东吴星烨汤为学; 关键词：蛋白质组学双向凝胶电泳姜黄素多药耐药结肠癌

应用超高分辨双向凝胶电泳技术进行正常人类肝脏蛋白质组研究被引量：1: 2010年; 肝脏是人体最大的实质器官,承担着人体许多关键的生理功能,在生命活动中占有重要地位.根据人类肝脏蛋白质组计划,本实验旨在构建人肝脏蛋白质双向凝胶电泳表达谱,尽可能分离和鉴定更多的蛋白.在双向凝胶电泳第一向等电聚焦水平上,从上样方式、水化液配方、聚焦时间等方面优化了碱性蛋白的分离条件,利用超放大胶分离技术搭建了高分辨的双向凝胶电泳分离平台,构建了人类肝脏蛋白质2-DE参考谱,检测到5481个蛋白质点.这是目前国际上最为全面的人体器官蛋白质组2-DE参考谱,为其他肝病的研究提供了较好的参照系.成功鉴定了429个非冗余蛋白,对pH4.0～7.0,5.0～6.0,5.5～6.7,6.0～9.0部分蛋白质点在胶上进行了注释,由此构建了人肝2-DE蛋白质表达谱数据库.对蛋白质的理化性质、功能及亚细胞定位进行了全面分析.研究中构建的人类肝脏蛋白质2-DE图谱将为肝脏比较蛋白质组学研究提供参考.; 米薇刘新贾伟李蕾蔡耘应万涛钱小红; 关键词：双向凝胶电泳质谱

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