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抗TfR-抗体的构建、表达及其体外抗瘤效应研究
[背景及目的]转铁蛋白受体(transferrin receptor,TfR)是细胞摄取铁的主要途径,分为TfR1和TfR2两种。其中TfR1又称为CD71,在正常细胞中表达较低,而在快速增殖的肿瘤细胞表面高表达,且肿瘤...
唐红玲
关键词:转铁蛋白受体
Bt Cry1类毒素广谱检测用抗体及其基因序列与应用
本发明提出了Bt Cry1类毒素广谱检测用抗体及其基因序列与应用,该抗体轻链抗体V<Sub>L</Sub>‑V<Sub>L</Sub>‑2D3,抗体V<Sub>L</Sub>‑V<Sub>L</Sub>‑...
董飒管凌君何康丽冯建国
CD80抗体对降植烷诱导的小鼠狼疮样肾炎模型的免疫干预效应研究被引量:5
2017年
目的 运用CD80抗体抑制CD80/CD28信号通路,研究观察抗体对小鼠狼疮样肾炎的逆转效应并探究其分子机制.方法 运用化学法建立小鼠狼疮样肾炎模型,一次性腹腔注射0.5 ml降植烷(Pristane),4个月时小鼠出现蛋白尿,外周ANA、抗dsDNA抗体水平也明显升高,模型建立成功.取成模小鼠分为2组,CD80抗体干预组:每只小鼠分别于第1、3、5、8、15天尾静脉注射200μg CD80抗体,随后3个月每隔1个月注射1次;模型组注射同型蛋白,给药方式及剂量与抗体干预组相同.同时设立正常对照组.Albustix试纸法监测小鼠尿蛋白动态变化,流式细胞术分析脾脏中免疫相关细胞的活化程度,间接免疫荧光法检测小鼠血清中自身抗体(ANA和抗dsDNA抗体)的表达水平及IFN-γ、IL-4的含量,取肾脏组织进行HE染色分析、免疫复合物(IC)检测.结果 小鼠尿蛋白显示抗体干预组的尿蛋白程度显著低于建模组,差异有统计学意义(P&lt;0.05);流式细胞术分析抗体干预组脾脏中巨噬细胞(CD11b+)、树突状细胞(CD11c+)、中性粒细胞(Gr1+)及B细胞(CD21+)活化程度显著低于模型组(P〈0.05),并且T细胞中CD4+、CD154+细胞数量干预组明显少于模型组(P〈0.05);血清中ANA、dsDNA的阳性率和滴度干预组低于模型组,差异有统计学意义(P〈0.05);干预后小鼠血清中IFN-γ及IL-4的含量与建模组相比出现下降,差异具有统计学意义(P〈0.05);肾脏HE染色和免疫荧光结果显示,肾小球炎症损伤和坏死程度减轻,肾脏免疫复合物沉积情况减少.结论 CD80抗体高效特异地结合抗原提呈细胞表面的CD80分子,阻断了CD80/CD28协同刺激信号,下调机体的免疫应答,对小鼠狼疮样肾炎病理损伤具有缓解和逆转作用.
沈辉盛晗朱玉强郑莹潘欢徐龙生沈建芬邱玉华
关键词:双价抗体CD80协同刺激信号病理损伤
B7-1抗体对Pristane所致小鼠狼疮样肾炎的免疫干预效应及分子机制的研究
B7-1分子是表达于抗原递呈细胞(antigen presenting cell,APC)表面的重要共刺激分子,其受体是表达于T细胞表面的CD28。B7-1分子与CD28结合转导T细胞活化的正性共刺激信号。该信号具有促进...
朱玉强
关键词:狼疮样肾炎免疫干预生物学鉴定
抗人CD86抗体的研制及生物学活性研究
B7分子是表达在抗原递呈细胞表面的协同刺激分子,其中 CD86(又称 B7-2)和CD80(又称B7-1)为B7分子家族重要成员,为T细胞活化提供重要的协同刺激信号。T细胞的活化不但需要TCR识别抗原肽段所介导的特异性信...
王志强
关键词:真核表达生物学活性B7分子
抗人CD86抗体的表达及与抗原的结合特性
2012年
目的:用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达抗人CD86抗体(CD86-diabody),鉴定该抗体对表达CD86分子肿瘤细胞的识别及介导的生物学效应。方法:从分泌抗人CD86小鼠源抗体的杂交瘤1D1中克隆抗体重、轻链可变区基因VH及VL。SOE-PCR构建VH-(GGGGS)-VL抗体基因,整合到真核表达载体pIRES2-EGFP中,脂质体法转染CHO细胞,FCM筛选G418加压培养的阳性克隆。IMAC纯化并定量抗体。免疫荧光法分析抗体对人B系淋巴瘤细胞株Raji及Daudi膜型CD86分子的阳性结合率,将抗体加入到Raji细胞的培养体系中,培养72 h,MTT法分析抗体对细胞体外增殖的影响。结果:获得了稳定分泌抗人CD86-diabody的CHO细胞株。培养上清中抗体纯品的得率为5.24 mg/L。抗体与Raji及Daudi细胞的阳性结合率分别为77.2%及70.6%。经抗体孵育72 h,Raji细胞体外增殖抑制率为37%。结论:成功制备了抗人CD86-diabody,可特异性结合细胞膜型CD86分子,并对表达该分子的肿瘤细胞体外增殖具有抑制效应。
王志强安萌朱华亭孔永王婧韩莲花夏永洁邱玉华
关键词:CHO细胞双价抗体抑制增殖
人源性抗bFGF单链抗体抗体在毕赤酵母中的表达、纯化及鉴定
目的:为了提高人源性抗bFGF抗体的表达量,构建抗bFGF单链抗体ScFv、抗体Diabody的酵母表达载体,利用毕赤酵母表达系统表达人源性的抗bFGF ScFv及Diabody并研究其生物学活性。 方法:从噬菌体抗...
吕卫东
关键词:抗体片段毕赤酵母
抗人CD80单链抗体(ScFv)及抗体(diabody)的研制及生物学功能初步研究
CD80/(也称B7-1/)是B7家族重要的共刺激分子。人CD80分子编码基因定位于人类染色体3q13.3-q21区内,含有1491bp。CD80是分子量约为44-54kD的Ⅰ型跨膜糖蛋白,主要表达在专职性抗原提呈细胞/...
陈昌友
关键词:CD80单链抗体双价抗体真核表达
抗人CD80抗体及其应用
本发明公开了一种抗人CD80抗体,所述抗体由重链可变区和轻链可变区组成,其特征在于,两者间由连接肽Gly<Sub>4</Sub>Ser相连,所述重链可变区核苷酸序列如SEQIDNO.1所示;所述轻链可变区核苷酸序...
邱玉华陈昌友陈永井朱华亭郭静雅
抗人CD80抗体的构建、表达及生物学功能初步研究被引量:2
2011年
构建及表达抗人CD80抗体(dimeric antibody fragment,diabody),并初步研究其生物学功能。PCR法获得轻重链可变区基因,构建表达载体pIRES2-EGFP/diabody。将pIRES2-EGFP/diabody转染中华仓鼠卵巢细胞(CHO),G418加压,筛选稳定高表达细胞株,扩大培养并收集上清,经镍柱纯化,并经变性及非变性SDS-PAGE电泳对抗体分子的体性进行鉴定。采用免疫荧光及流式细胞术(FCM)分析抗体与细胞膜型CD80分子的结合活性及与鼠源性亲本抗体4E5的竞争抑制效应;MTT法分析该抗体对天然高表达CD80的Raji细胞体外增殖的影响。结果:成功构建抗人CD80-diabody表达载体并含有编码信号肽和Gly4Ser连接肽的序列。获得了稳定分泌抗体的细胞株(命名为SA-Ⅲ),培养上清中纯化抗体的得率为50 mg/L,PAGE结果显示其为一个二聚体,Mr约为53 000(抗人CD80-ScFv Mr约为27 000)。抗CD80-diabody与L929-CD80、Raji及Daudi的阳性结合率分别为96.5%、98.1%及93.0%;该抗体对鼠源亲本抗体4E5与抗原结合的抑制率为97.11%,对Raji细胞体外增殖的抑制率达31.27%。与单链抗体相比,亲和活性明显提高。成功建立了抗CD80-diabody CHO细胞的表达株,其分泌的抗体具有良好的生物学活性。
陈昌友朱华亭郭静雅黄莉张彦军黄赛男邱玉华
关键词:CD80双价抗体真核表达

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肖代雯
作品数:126被引量:155H指数:6
供职机构:四川省人民医院
研究主题:PSM MEC SCCMEC 耐甲氧西林表皮葡萄球菌 血液来源
朱华亭
作品数:50被引量:135H指数:6
供职机构:苏州大学医学部免疫学系
研究主题:单克隆抗体 IL-8 CD80 D-半乳糖 中性粒细胞
陈昌友
作品数:15被引量:37H指数:5
供职机构:苏州大学医学部免疫学系
研究主题:基因转染 CD80 基因转染细胞株 趋化因子 CXCR3
黄宇
作品数:41被引量:115H指数:6
供职机构:厦门大学附属第一医院
研究主题:单链抗体 EBV DNA载量 转铁蛋白受体 双价抗体
邢薇
作品数:10被引量:13H指数:2
供职机构:武汉大学人民医院
研究主题:单链抗体 转铁蛋白受体 双价抗体 次级淋巴组织趋化因子 PBMC