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基于p38MAPK、AMPK探讨杀伤人肝癌细胞的机制被引量:2
2023年
目的 研究对肝癌细胞系SK-Hep1和HepG2细胞凋亡、DNA损伤的影响及作用机制。方法 取对数生长期肝癌细胞,采用不同浓度(5、10、25、50 nmol/L),或干扰p38MAPK/AMPK+(50 nmol/L)处理肝癌细胞,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞性,Western blot法检测凋亡标志蛋白PARP、DNA损伤标志蛋白γ-H2AX以及p-p38MAPK、p-AMPK蛋白表达。结果 与对照组比较,处理后肝癌细胞PARP、γ-H2AX、p-p38MAPK及p-AMPK蛋白表达均呈现剂量和时间依赖性增加(P<0.05),可引起肝癌细胞死亡(P<0.05);下调p38MAPK基因表达后,诱导的肝癌细胞PARP、γ-H2AX蛋白表达均降低(P<0.05),但p-AMPK蛋白表达升高(P<0.05);下调AMPK基因表达后,诱导的肝癌细胞PARP、γ-H2AX以及p-p38MAPK蛋白表达均升高(P<0.05),肝癌细胞死亡率增加(P<0.05)。结论 可同时激活肝癌细胞中p38MAPK和AMPK表达;激活的p38MAPK可促进诱导的肝癌细胞凋亡和DNA损伤;而激活的AMPK可抑制诱导的肝癌细胞凋亡和DNA损伤;人肝癌细胞中激活p38MAPK的力度大于AMPK,最终达到杀伤肿瘤的作用。
曹秀向远彩邓程凤代荣阳刘友平
关键词:华蟾毒精肝癌细胞DNA损伤P38MAPKAMPK
一种负载的仿生普鲁士蓝纳米复合材料及其制备方法和应用
本发明涉及一种负载的仿生普鲁士蓝纳米复合材料,该仿生普鲁士蓝纳米复合材料包括普鲁士蓝、和仿生膜,且粒径为160nm~180nm。制备方法包括用铁氰化钾和聚乙烯吡咯烷酮反应得到介孔普鲁士蓝分散液,将...
欧青刘斌
抑制M2样肿瘤相关巨噬细胞极化对肺癌细胞侵袭、迁移的影响及其机制研究
目的:  阐明(cinobufagin, CB)对A549(人肺腺癌细胞)和LLC(小鼠lewis肺癌细胞)侵袭、迁移的影响,并从影响M2型巨噬细胞极化的角度探讨其分子机制。  方法:  以THP-1为研究对象,...
连云峰
关键词:华蟾毒精细胞侵袭细胞迁移抗肿瘤作用
通过Wnt/β-catenin信号通路抑制人结直肠癌SW-480细胞活性及迁移能力的机制研究被引量:4
2022年
目的探讨抑制人结直肠癌SW-480细胞活性及迁移能力的潜在分子机制。方法使用1.0μmol/L处理后,检测人结直肠癌SW-480细胞的细胞活力和迁徙能力。处理后,通过高通量测序和信号通路富集分析人结直肠癌SW-480细胞中异常的信号通路。通过实时荧光定量PCR、免疫印迹和分子对接分析改变人结直肠癌SW-480细胞活性及迁移能力的潜在分子机制。结果处理后,人结直肠癌SW-480细胞的细胞活力在2、3、4 d时显著下降(P<0.05)。同时,人结直肠癌SW-480细胞的迁移能力显著下降。高通量和信号通路富集分析发现处理人结直肠癌SW-480细胞后Wnt/β-catenin信号通路中的基因被影响最多。处理人结直肠癌SW-480细胞后,发现Wnt/β-catenin信号通路下游的关键基COX2、BIRC5、CCND1、MYC、AXIN2、EPCAM、WISP1的mRNA表达水平均显著下降(P<0.05)。处理人结直肠癌SW-480细胞后,分离细胞的细胞核和细胞浆发现β-catenin在细胞浆中聚集,很少入核。同时,处理人结直肠癌SW-480细胞后,磷酸化的β-catenin的蛋白增加。通过分子对接发现与β-catenin的第332位氨基酸T具有潜在的结合能力。通过CRISPR/CAS9技术敲除人结直肠癌SW-480细胞中的β-catenin,并在敲除了β-catenin的SW-480细胞中分别构建野生型β-catenin和突变型β-catenin T332A持续表达的稳转细胞系。处理具有野生型β-catenin和突变型β-catenin的人结直肠癌SW-480细胞后,发现在野生型β-catenin细胞中Wnt/β-catenin信号通路下游的关键基COX2、BIRC5、CCND1、MYC、AXIN2、EPCAM、WISP1的mRNA表达水平均显著下降(P<0.05),而在突变型β-catenin细胞中Wnt/β-catenin信号通路下游的关键基COX2、BIRC5、CCND1、MYC、AXIN2、EPCAM、WISP1的mRNA表达水平均显著上升(P<0.05)。同时,使用处理突变型β-catenin的人
陈丹李晓武张伟斌吴敏华
关键词:华蟾毒精WNTΒ-CATENIN结直肠癌SW-480
靶向KATNB1抑制肿瘤细胞微管形成和有丝分裂被引量:1
2022年
素是临床广泛应用的抗肿瘤中药,但其抗肿瘤分子机制尚未完全清楚。本研究旨在阐明素活性成分(cinobufagin,CBG)抑制肿瘤细胞有丝分裂的靶标及分子机制。应用碘化丙啶(PI)DNA染色法分析CBG对肿瘤细胞周期的作用;通过胸苷同步化细胞至有丝分裂时期,微管及中心粒染色法表征CBG对肿瘤细胞有丝分裂的影响;采用体外微管聚合实验、微管单体/聚体分离实验及微管α-tubulin荧光标记法从分子和细胞水平评价CBG对微管聚合的作用;通过基因编辑技术CRISPR/Cas9建立微管切割蛋白Katanin调节亚基B1(KATNB1)敲除的肿瘤细胞,CCK-8法考察CBG对野生型和敲除细胞抑制作用的差异;利用化学生物学的技术方法研究CBG和KATNB1的结合;采用Western blot及实时定量PCR检测CBG对KATNB1蛋白和mRNA的调控。结果发现,CBG阻滞结肠癌HCT116细胞周期于G2/M期;诱导中心粒异常增生,抑制肿瘤细胞的有丝分裂;体内外的微管形成实验表明CBG显著抑制微管蛋白聚合;KATNB1敲除后缓解了CBG对HCT116细胞的抑制作用,表明KATNB1是CBG抗肿瘤的重要靶标;进一步发现CBG与KATNB1结合并减少其蛋白水平,KATNB1突变能阻断两者结合及CBG的这种作用。以上结果表明,CBG靶向微管切割蛋白KATNB1抑制微管聚合从而抑制肿瘤细胞有丝分裂。
张琦王甜甜汪磊柯细松屈祎张雪
关键词:华蟾毒精有丝分裂微管
乙酰及其在制备治疗肿瘤药物中的应用
本发明公开了一种乙酰在制备抗肿瘤药物中的应用,所述的乙酰的结构如式(I)所示。该乙酰可以抑制TNBC细胞BT‑549、MDA‑MB‑231、MDA‑MB‑468的增殖,诱导TNBC细胞的凋亡,抑制...
杨乐和赵承光戴璇璇赵承伟项友群尹畅甜胡万乐周斌周潮辉梁广
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所致DNA氧化损伤与ATM抑制剂在癌细胞中的协同致死作用及其机理研究
癌症是一种由于体细胞遗传基因的改变而导致的疾病,目前的治疗方法以化、放疗及手术为主。然而,尽管化、放疗在癌症治疗方面有显著疗效,它们给患者带来的副作用也极其严重,且多数患者不能治愈。除放、化疗和手术外,针对特定基因或信号...
牛家婧
关键词:细胞周期阻滞DNA损伤
抗肿瘤分子靶标研究
【目的】是临床常用传统中药酥的主要有效成分之一,但是目前的抗肿瘤分子靶标仍不明确。本研究利用Drug Target Seq策略来发现在结肠癌细胞中的分子靶标,并通过多种鉴定方法和功能实验进行靶标...
汪磊
关键词:华蟾毒精蟾酥转录组测序
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作品数:89被引量:342H指数:10
供职机构:南京中医药大学
研究主题:蟾蜍 蟾酥 蟾毒灵 华蟾毒精 蟾毒
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作品数:439被引量:4,143H指数:34
供职机构:南京中医药大学
研究主题:化学成分 当归 川芎 四物汤 配伍
马宏跃
作品数:107被引量:406H指数:13
供职机构:南京中医药大学药学院
研究主题:蟾酥 蟾蜍 六神丸 蟾毒灵 多肽
段金廒
作品数:1,653被引量:11,752H指数:46
供职机构:南京中医药大学
研究主题:化学成分 当归 中药资源 中药 药材
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作品数:309被引量:3,659H指数:35
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研究主题:化学成分 中药 化学成分研究 GC-MS分析 肠吸收