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利拉鲁肽抑制高糖环境诱导的人肝星状细胞(LX-2) 增殖作用: 2025年; 目的:研究利拉鲁肽对人肝星状细胞(LX-2)增殖的作用。方法:用不同浓度利拉鲁肽(31.25、62.5、125、250、500 nmol/L)处理高糖诱导的LX-2细胞,采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术分析细胞凋亡率,免疫印迹法检测LX-2细胞内肝纤维化(HF)标志蛋白CollagenⅠ和α-SMA的表达水平。结果:CCK-8实验结果显示,高糖可诱导LX-2细胞增殖(P<0.01),利拉鲁肽作用12、24、48 h可降低高糖环境下LX-2细胞增殖率(P<0.05);流式细胞术检测结果证明利拉鲁肽可诱导细胞发生凋亡(P<0.05);免疫印迹结果表明利拉鲁肽可下调LX-2细胞中CollagenⅠ和α-SMA蛋白表达(P<0.05)。结论:利拉鲁肽可减弱高糖诱导的LX-2活化,增加其凋亡,抑制HF标志物表达。; 谢加力章圣朋陶云松; 关键词：利拉鲁肽肝脏星状细胞

SHP2过表达抑制人肝星状细胞LX-2凋亡: 2024年; 目的探讨含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP2)过表达对人肝星状细胞LX-2凋亡的影响。方法将表达绿色荧光蛋白(GFP)的空病毒Ad-GFP、表达野生型SHP2及GFP的腺病毒Ad-SHP2转染LX-2细胞。实验分为3组:(1)Control组,以DMEM代替腺病毒转染LX-2细胞;(2)Ad-GFP组,转染空病毒Ad-GFP;(3)Ad-SHP2组,转染重组腺病毒Ad-SHP2。Western blotting检测3组LX-2细胞的SHP2、Bax、Bcl-2蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测3组LX-2细胞的SHP2 mRNA表达;TUNEL及膜联蛋白-V/碘化丙啶双标记流式细胞术检测3组LX-2细胞凋亡情况。结果Ad-SHP2组LX-2细胞的SHP2蛋白及mRNA相对表达量高于Control组及Ad-GFP组(P<0.05);Ad-GFP组与Control组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。TUNEL及膜联蛋白-V/碘化丙啶双标记流式细胞术检测结果显示,与Control组LX-2细胞凋亡率(3.08±0.73)%、(9.44±0.80)%及Ad-GFP组(3.25±0.85)%、(8.89±1.98)%比较,Ad-SHP2组(1.52±0.26)%、(2.44±0.93)%降低(P<0.05);Ad-GFP组与Control组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3组LX-2细胞的Bax及Bcl-2蛋白相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05);Ad-SHP2组LX-2细胞的Bax蛋白相对表达量(1.55±0.21)低于Control组(1.99±0.15)及Ad-GFP组(2.00±0.16)(P<0.05);而Bcl-2蛋白相对表达量(2.13±0.25)则高于Control组(1.71±0.15)及Ad-GFP组(1.52±0.14)(P<0.05);但Ad-GFP组与Control组Bax及Bcl-2蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论SHP2过表达通过升高Bcl-2/Bax抑制体外人肝星状细胞LX-2凋亡。; 郝礼森苗笑佳宋洁蒋美钰何宇潘恩亮莫艳波王静; 关键词：肝纤维化肝星状细胞

铁死亡参与无机砷致人肝星状细胞活化的研究被引量：1: 2024年; 目的研究亚砷酸钠(NaAsO 2)对人肝星状细胞(LX-2)铁死亡的影响。方法体外培养LX-2细胞,采用成组设计将不同浓度NaAsO 2(5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L)染毒LX-2细胞24h,构建体外NaAsO 2致LX-2活化模型,同时设立对照组;透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)观察NaAsO 2处理LX-2细胞线粒体结构变化情况;荧光显微镜和荧光酶标仪检测细胞Fe 2+水平;比色法检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;蛋白免疫印迹法检测溶质载体家族7号成员11(solute carrier family number 7member 11,SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平。结果TEM结果显示,NaAsO 2组细胞线粒体膜完整性破损,线粒体嵴减少和消失;此外,与对照组比较,NaAsO 2处理组Fe 2+水平均升高(P<0.05);不同剂量NaAsO 2组MDA含量差异均有统计学意义(F=7.18,P均<0.05)。其中,与对照组比较,5、15μmol/L NaAsO 2组LX-2细胞MDA含量均高于对照组(P<0.05);在翻译水平上,纤维化指标α-SMA蛋白表达水平随着NaAsO 2剂量的升高而表达上调(P<0.05),铁死亡指标SLC7A11和GPX4蛋白表达水平随着NaAsO 2剂量的升高而减少(P<0.05)。结论铁死亡参与NaAsO 2致LX-2细胞活化过程。; 迪丽娜尔·亚尔麦麦提黄菲丁关鑫赵丽君吴顺华; 关键词：亚砷酸钠人肝星状细胞

荔枝核总黄酮对活化的人肝星状细胞的作用机制: 2024年; 研究荔枝核总黄酮(Total flavonoids of semen litchi, TFL)对活化的人肝星状细胞(human hepatic stellate cell,HSC-LX2)的作用机制。方法 ELISA法检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α) 、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)的表达。流式细胞仪检测细胞周期和凋亡。结果 TFL可减少活化的HSC-LX2中TNF-α、IL-6的表达,阻滞细胞于G0/G1期,促进细胞凋亡。结论 TFL可减少活化的HSC-LX2细胞炎症因子的产生,促进其凋亡,从而达到抗肝纤维化的效果。; 曹杰覃桂金李息友全冬梅赵永忠; 关键词：荔枝核总黄酮肝星状细胞

日本血吸虫胞外囊泡的提取、鉴定及对人肝星状细胞影响的初探: 2024年; 旨在探讨日本血吸虫(Schistosoma japonicum)胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)的提取方法及特性。本研究利用尺寸排阻法收集Sj EVs,通过透射电镜、蛋白质谱对Sj EVs的形态学、蛋白谱进行解析并对鉴定到的蛋白进行生物信息学分析。将PKH67绿色荧光标记的Sj EVs与人肝星状细胞LX-2共孵育,观察细胞摄取Sj EVs的情况,并对细胞中虫源miRNAs及细胞内纤维化因子进行检测,初步探讨Sj EVs对肝星状细胞的影响。结果表明:Sj EVs呈圆形或椭圆形囊泡结构,内含EVs标志蛋白。生物信息学分析结果显示,Sj EVs蛋白可能与细胞进程、代谢等途径密切相关。Sj EVs与人肝星状细胞LX-2共孵育结果显示,LX-2细胞可成功摄取Sj EVs,且定量反转录PCR(RT-qPCR)结果显示LX-2细胞中部分虫源miRNAs显著升高,纤维化因子α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原纤维α1(Collagen typeⅠalpha 1,Col1α1)和Ⅲ型胶原纤维α1(Collagen typeⅢalpha 1,Col3α1)极显著升高,提示肝星状细胞活化。综上,本研究为解析Sj EVs在宿主肝纤维化中的作用提供了依据,为进一步探究Sj EVs的潜在功能奠定了基础。; 钟昊然朱丹霖董博文陆珂李浩傅志强刘金明金亚美; 关键词：日本血吸虫 MICRORNA 人肝星状细胞

华支睾吸虫lncRNA EV19对人肝星状细胞纤维化相关基因的调控研究: 2024年; 为探究华支睾吸虫长链非编码RNA(lncRNA),对人肝星状细胞(LX-2细胞)纤维化相关因子的影响,通过生物信息学分析初步筛选出8种可能与纤维化相关的华支睾吸虫lncRNA,进一步利用RT-qPCR证明其中lncRNA EV1、EV17、EV19在华支睾吸虫成虫及其胞外囊泡中均表达。随后构建pcDNA3.1-lncRNA EV19、pcDNA3.1-lncRNA EV17、pcDNA3.1-lncRNA EV1过表达载体,转染LX-2细胞;收集转染后的细胞,通过RT-q PCR和Western-blot分别检测α-SMA、Col1、Col3基因的转录和蛋白表达水平;并利用CCK-8检测lncRNA对LX-2细胞增殖的影响。最后,利用RT-qPCR及双荧光素酶报告基因试验验证lncRNA EV19作用靶标。结果显示,与对照组相比,lncRNAEV19过表达组中α-SMA、Col1、Col3在转录水平和蛋白水平均显著升高(P<0.05),且能促进LX-2细胞的增殖。RT-qPCR结果显示,过表达lncRNA EV19的LX-2细胞中miR-19b-1-5p、miR-29b-1-5p、miR-940表达量降低;双荧光素酶报告基因试验证实lncRNA EV19靶向miR-19b-1-5p。以上结果表明,华支睾吸虫lncRNA EV19可能通过负调控miR-19b-1-5p促进LX-2细胞的增殖,进而引起纤维化的发生。; 王晶唐斌王兴洋司光泉刘志娜丁静刘明远刘晓雷王洋; 关键词：华支睾吸虫人肝星状细胞肝纤维化长链非编码RNA

吡非尼酮对人肝星状细胞LX2增殖、活化以及糖酵解途径的影响: 2024年; 目的探讨吡非尼酮(PFD)对人肝星状细胞LX2增殖、活化以及糖酵解途径的影响,分析其抗肝纤维化的作用途径。方法用10μg/L转化生长因子-β1(TGF-β1)激活LX2细胞,将LX2细胞分为正常组[0.1%二甲基亚砜(DMSO)]、对照组(10μg/L TGF-β1+0.1%DMSO)及实验组(10μg/L TGF-β1+2、4、6及8 mmol/L PFD);用CCK-8法和平板克隆实验评价LX2细胞增殖能力,试剂盒检测细胞培养上清中的葡萄糖及乳酸水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(COL1A1)、葡萄糖转运蛋白1(Glut1)、己糖激酶2(HK2)、血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)、M2型-丙酮酸激酶(PKM2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)以及单羧酸转运蛋白1(MCT1)蛋白表达,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测α-SMA、COL1A1、Glut1、HK2、PKM2、LDHA mRNA表达。结果与正常组比较,对照组LX2细胞的增殖能力增强,α-SMA、COL1A1蛋白及mRNA表达增加(P<0.05),葡萄糖消耗及胞外乳酸积累增多,Glut1、HK2、PFKP、PKM2、LDHA、MCT1蛋白及Glut1、HK2、PKM2、LDHA mRNA水平升高;与对照组比较,实验组LX2细胞增殖受到抑制,α-SMA、COL1A1蛋白表达降低,细胞葡萄糖消耗及胞外乳酸积累减少,LX2细胞Glut1、HK2、PFKP、PKM2、LDHA、MCT1的蛋白及Glut1、HK2、PKM2、LDHA mRNA水平下降(P<0.05)。结论 PFD能抑制LX2细胞的增殖及活化,减少细胞外基质分泌,其抗纤维化能力可能与糖酵解水平下调、细胞能量代谢受扰有关。; 李雪莹姜虹羽张帅周石段庆红; 关键词：吡非尼酮肝星状细胞糖酵解肝纤维化转化生长因子Β1 葡萄糖

SLC7A11调控铁死亡在亚砷酸钠致人肝星状细胞活化中的作用机制研究: 赵丽君

木犀草素、欧当归内酯A和黄芪皂苷Ⅰ单用及联用对人肝星状细胞株LX-2增殖、活化的影响: 2024年; 目的探讨木犀草素(Lut)、欧当归内酯A(Lev)和黄芪皂苷Ⅰ(Ast)单用及联用对人肝星状细胞株LX-2增殖、活化的影响。方法取对数生长期的LX-2细胞,采用噻唑蓝(MTT)法考察Lut、Lev和Ast对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的LX-2细胞增殖的影响、联用比例确定及Lut、Lev和Ast联用对TGF-β1诱导LX-2细胞增殖的影响;应用CalcuSyn软件计算Lut、Lev及Ast联用抑制LX-2细胞增殖的联合指数(CI),分析3者联用类型;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测3者对LX-2细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和TGF-β1蛋白表达的影响。结果 MTT结果显示,Lut、Lev和Ast联用摩尔比为1∶1∶10,3者单用及联用对TGF-β1诱导的LX-2细胞增殖均具有抑制作用(P<0.05),并呈浓度依赖性;CalcuSyn软件分析结果显示,3者联用对LX-2细胞的增殖抑制率>15%时CI<1,说明3者联用具有协同增效的作用;Western blot结果显示,Lut、Lev及Ast联用能够显著降低TGF-β1诱导的LX-2细胞中α-SMA蛋白的表达(P<0.01),降低LX-2细胞中TGF-β1蛋白的表达(P<0.05)。结论 Lut、Lev和Ast单用及联用均能抑制LX-2细胞的增殖、活化,3者联用作用更强、具有协同增效的作用,该作用可能与下调肝星状细胞TGF-β1蛋白表达有关。; 陆倩张金娟蒋先慧国小利廖尚高; 关键词：木犀草素

都匀毛尖茶浸提液对人肝星状细胞增殖的影响及其机制: 2023年; 目的探讨都匀毛尖茶浸提液对人肝星状细胞增殖的影响及其机制。方法体外培养人肝星状细胞LX-2,分别予0、5、10、20、40、80、160、320、640μg/mL都匀毛尖茶浸提液处理24 h,收集细胞,采用CCK-8法检测细胞活性,选择低于LX-2细胞半数抑制活性(IC50)时都匀毛尖茶浸提液浓度进行后续实验。另取LX-2细胞,随机分为空白对照组、模型组以及茶浸提液低、中、高浓度组和阳性对照组,空白对照组不予任何处理,常规培养26 h;模型组予0.5μg/mL脂多糖(LPS)预处理2 h后常规培养24 h;茶浸提液低、中、高浓度组予0.5μg/mL LPS预处理2 h后分别加入低、中、高浓度都匀毛尖茶浸提液处理24 h;阳性对照组予0.5μg/mL LPS预处理2 h后加入5μmol/L水飞蓟宾处理24 h。收集各组细胞,采用RT-qPCR法检测炎症因子IL-6、TNF-α、COX-2 mRNA表达,采用Western blotting法检测炎症因子IL-6、TNF-α、COX-2及NF-κB信号通路NF-κB p65、p-NF-κB p65、IκBα、p-IκBα蛋白表达。结果0、5、10、20、40、80、160、320、640μg/mL都匀毛尖茶浸提液呈浓度依赖性抑制LX-2细胞活性(F=60.160,P<0.01)。LX-2细胞IC_(50)时都匀毛尖茶浸提液浓度为170.9μg/mL。5、10、20μg/mL都匀毛尖茶浸提液干预时LX-2细胞活性虽然呈下降趋势,但与0μg/mL都匀毛尖茶浸提液干预时比较P均>0.05。因此,选择40、80、160μg/mL都匀毛尖茶浸提液分别作为茶浸提液低、中、高浓度组进行后续实验。与空白对照组比较,模型组炎症因子IL-6、TNF-α、COX-2 mRNA和蛋白表达显著升高(P均<0.05);与模型组比较,茶浸提液低、中、高浓度组炎症因子IL-6、TNF-α、COX-2 mRNA和蛋白表达显著降低(P均<0.05)。与空白对照组比较,模型组NF-κB信号通路p-NF-κB p65、p-IκBα蛋白表达显著升高(P均<0.05);与模型组比较,茶浸提液低、中、高浓度组p-NF-κB p65、p-IκBα蛋白表达显著降低(P均<0.05)。结论都匀毛尖茶浸提液能够抑�; 张迪王应辉薛瑾陈应强; 关键词：肝纤维化肝星状细胞 NF-ΚB信号通路炎症因子

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