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银连含漱液对脂多糖诱导人牙龈成纤维细胞的作用: 2025年; 目的观察银连含漱液对脂多糖(LPS)诱导人牙龈成纤维细胞(HGFs)炎症反应、氧化应激及细胞凋亡的影响。方法收集临床患者的健康牙龈组织,采用组织块法培养HGFs并采用免疫荧光法进行细胞鉴定。采用CCK-8法检测不同体积分数银连含漱液(2.5%、5%、10%、20%、40%)、不同浓度绿原酸(0.01、0.1、0.5、1、10mg·mL^(-1))及LPS(1、10、20、35、50μg·mL^(-1))分别与HGFs共培养24、48、72h后的增殖变化情况。依据CCK-8检测结果,将HGFs分为4组:DMEM对照组、1μg·mL^(-1) LPS组、1μg·mL^(-1) LPS+20%银连含漱液组、1μg·mL^(-1) LPS+1 mg·mL^(-1)绿原酸组。干预24 h后,采用流式细胞术检测HGFs的凋亡水平;WST-1法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性;ELISA法检测细胞上清液中炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的含量。结果选择对HGFs无明显毒性作用的1 mg·mL^(-1)绿原酸、20%银连含漱液和1μg·mL^(-1) LPS作用24 h。与对照组比较,LPS组的HGFs凋亡率显著升高(P<0.001),SOD活力显著降低(P<0.001),上清液中的IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.001)。与LPS组比较,LPS+20%银连含漱液组及LPS+1 mg·mL^(-1)绿原酸组的HGFs凋亡率显著降低(P<0.001),SOD活力显著升高(P<0.01,P<0.001),上清液中的IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.001)。与LPS+20%银连含漱液组比较,LPS+1 mg·mL^(-1)绿原酸组的HGFs凋亡率显著降低(P<0.001),SOD活力显著升高(P<0.01),上清液中的IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论银连含漱液可抑制LPS诱导的HGFs细胞凋亡,提高其抗氧化能力,降低炎症反应,该作用可能与活性成分绿原酸密切相关。; 齐刘英洪楠锐刘伟南; 关键词：绿原酸人牙龈成纤维细胞脂多糖炎症反应氧化应激

FGF18通过上调BMP2诱导人牙龈成纤维细胞向成骨样细胞分化: 2025年; 目的研究成纤维细胞生长因子18(FGF18)是否能诱导体外分离培养的人牙龈成纤维细胞(HGFs)向成骨样细胞分化,并探究其成骨机制。方法组织块法分离培养HGFs并鉴定。取第3代HGFs,分为实验组和对照组。实验组加入FGF18和L-DMEM、对照组加入L-DMEM。噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度FGF18(0、0.01、0.02、0.04、0.06 mg/L)对HGFs增殖影响;碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色检测成骨能力和矿化能力;RT-PCR、免疫细胞化学染色及Western blot检测成骨相关基因、蛋白和BMP信号通路中BMP2基因和蛋白表达情况。结果与对照组比较,实验组培养3、5、7、9、11 d均可促进HGFs增殖(P<0.05);培养14、21 d ALP活性、矿物盐沉积均增高(P<0.05),ALP、OPN、OCN及BMP信号通路中BMP2 mRNA表达均明显增高(P<0.01)。培养21 d OPN、OCN及BMP2蛋白表达较培养14 d明显增高(P<0.01)。结论FGF18能促进HGFs增殖,诱导HGFs向功能性成骨样细胞分化,其成骨机制与上调BMP2有关。; 侯亚丽刘慧娟张昊孙婧媛宋鹏刘月瑶李荷香; 关键词：人牙龈成纤维细胞成骨细胞分化

miR-17-5p调控TXNIP/NLRP3信号通路对牙龈卟啉单胞菌LPS诱导的人牙龈成纤维细胞炎症反应的影响: 2025年; 目的探讨微小RNA-17-5p(miR-17-5p)调控硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)/NLRP3信号通路对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(PDLF)炎症反应的影响。方法以PDLF细胞为研究对象,随机分为Control组(正常培养)、Pg-LPS组(用1μg/mL的Pg-LPS培养细胞24h)、NC-mimics组(在Pg-LPS诱导的基础上转染NC-mimics)、miR-17-5p-mimics组(在Pg-LPS诱导的基础上转染miR-17-5p-mimics)、miR-17-5p-mimics+pcDNA-NC组(在Pg-LPS诱导的基础上转染miR-17-5p-mimics+pcDNA-NC)、miR-17-5p-mimics+pcDNA-TXNIP组(在Pg-LPS诱导的基础上转染miR-17-5p-mimics+pcDNA-TXNIP)。qRT-PCR法检测各组PDLF细胞中miR-17-5p、TXNIP、NLRP3mRNA的表达;MTT法检测PDLF细胞增殖;流式细胞仪检测PDLF细胞的凋亡;ELISA试剂盒检测PDLF细胞中MMP-1、MMP-9、IL-6、IL-8的表达;WB检测PDLF细胞中TXNIP、NLRP3蛋白的表达;双荧光素酶报告基因实验检验miR-17-5p与TXNIP之间的互作。结果Pg-LPS组A_(490)值、miR-17-5p低于Control组,凋亡率、TXNIPmRNA和蛋白、NLRP3mRNA和蛋白、MMP-1、MMP-9、IL-6、IL-8表达高于Control组(P<0.05);miR-17-5pmimics组A_(490)值、miR-17-5p高于Pg-LPS组、NC-mimics组,凋亡率、TXNIPmRNA和蛋白、NLRP3mRNA和蛋白、MMP-1、MMP-9、IL-6、IL-8表达低于Pg-LPS组、NC-mimics组(P<0.05);与miR-17-5p-mimics组、miR-17-5p-mimics+pcDNA-NC组相比,miR-17-5p-mimics+pcDNA-TXNIP组A_(490)值降低,凋亡率、TXNIPmRNA和蛋白、NLRP3 mRNA和蛋白、MMP-1、MMP-9、IL-6、IL-8表达升高(P<0.05);miR-17-5p可以靶向负调控。结论miR-17-5p可以抑制TXNIP/NLRP3信号通路,抑制Pg-LPS诱导的PDLF细胞的炎症反应。; 王欣束传亮; 关键词：硫氧还蛋白相互作用蛋白 NLRP3 牙龈卟啉单胞菌人牙龈成纤维细胞炎症反应

电化学脱合金Ti6Al4V基台对人牙龈成纤维细胞的影响: 2024年; 目的探讨电化学脱合金Ti6Al4V基台对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)的影响,为种植基台表面改性设计提供实验依据。方法根据试样不同表面进行分组:NC组(阴性对照,光滑表面无其他处理)、NM-1组(纳米网-1,1 mol/L NaOH电化学脱合金处理1 h,电压2 V)、NM-2组(纳米网-2,5 mol/L NaOH电化学脱合金处理1 h,电压2 V)。扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)观察不同试样表面形貌及HGFs在其表面的黏附状态,接触角测量仪测定试样表面亲水性。CCK-8评估HGFs在不同试样表面的增殖情况;qRT-PCR检测HGFs在不同试样表面Ⅰ型胶原(collagenⅠ,COL1A1)、Ⅲ型胶原(collagenⅢ,COL3A1)、纤连蛋白1(fibronectin 1,FN1)、黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、黏着斑蛋白(vinculin,VCL)、整合素α2(integrinα2,ITGA2)、整合素β1(integrinβ1,ITGB1)等黏附相关基因表达水平;免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)观察HGFs在不同试样表面vinculin蛋白表达情况;天狼猩红染色评价HGFs在不同试样表面胶原纤维分泌合成情况。结果SEM观察到NM-1组和NM-2组表面形成有序均一的三维网状结构,网格直径NM-1组约为30 nm,NM-2组约为150 nm;NM-1组和NM-2组对比NC组,水接触角显著下降(P<0.0001);NM-1组细胞增殖能力较NC组显著提高(P<0.01),NM-1组和NM-2组的水接触角及细胞增殖能力差异无统计学意义(P>0.05)。SEM镜下可见HGFs黏附24 h后在各组试样表面均黏附良好,NM-1组和NM-2组细胞与NC组对比伸展面积更大,形态纤长,细胞伪足更发达。qRTPCR结果显示NM-1组中COL1A1、COL3A1、FN1、FAK、VCL等黏附相关基因表达水平显著高于NC组和NM-2组(P<0.01)。vinculin蛋白免疫荧光结果表明,NM-1组vinculin蛋白表达水平最高,单个细胞黏着斑数量最多(P<0.01)。天狼猩红染色结果显示NM-1组胶原纤维分泌合成量最高(P<0.0001)。结论Ti6Al4V经电化学脱合金改性后所构�; 蔡东轩李毅王岚张燕李广文张玉梅; 关键词：TI6AL4V 人牙龈成纤维细胞黏着斑

羟基积雪草苷对脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞的生物学行为的影响: 研究目的:本研究就羟基积雪草苷(Madecassoside)对人牙龈成纤维细胞(Human gingival fibroblasts,HGFs)的生物活性作用进行讨论,探究其对HGFs的增殖特性,并进一步采用脂多糖(Li...; 李聪聪; 关键词：羟基积雪草苷牙龈成纤维细胞脂多糖

灯盏花素对牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞损伤的影响: 2024年; 目的探讨灯盏花素(breviscapine,BVP)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(porphyromonas gingivalis,Pg-LPS,简称LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)损伤的影响。方法体外培养HGFs细胞,分为对照组、LPS组、LPS+BVP低、中、高剂量组。CCK-8法检测细胞增殖;ELISA法检测细胞上清液中IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、IL-6水平及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;蛋白质印迹法检测细胞中细胞周期素D1(Cyclin D1)、细胞周期素B1(Cyclin B1)及凋亡相关B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、BCL-2相关X蛋白(BCL-2-associated X protein,Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达水平;TBA比色法检测细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;二氢荧光素二乙酸酯(dichloro-dihydro-fluorescein diacetate,DCFH-DA)法测定细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果与对照组比较,LPS组HGFs细胞存活率、细胞迁移率、Cyclin B1、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平及SOD活性显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达水平、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平及MDA、ROS水平显著升高(P<0.05);与LPS组比较,LPS+BVP低、中、高剂量组细胞存活率、细胞迁移率、Cyclin B1、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平及SOD活性显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平及MDA、ROS水平显著降低(P<0.05)。结论BVP可通过抗炎、抗氧化作用减轻LPS诱导的HGFs细胞损伤。; 晁晓芹赵国廷董振耀马民英姚毅章; 关键词：灯盏花素人牙龈成纤维细胞细胞损伤

下调G蛋白偶联受体C家族5A表达抑制脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞炎症反应: 2024年; 目的探究下调G蛋白偶联受体C家族5A(GPRC5A)表达对脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞(GFs)炎症反应的影响并探索其机制,为深入探讨G蛋白偶联受体(GPCR)在牙周炎中的调控作用及其机制奠定基础。方法于2022年12月至2023年2月在山东大学口腔医学院·口腔医院口腔颌面外科、牙周科收集3名牙周健康者(牙周健康组)和3例牙周炎患者(牙周炎组)的牙龈组织,采用免疫组化染色检测两组牙龈组织中GPRC5A的表达。收集健康牙龈组织提取GFs,健康牙龈组织来自2022年12月至2023年2月在山东大学齐鲁医学院口腔医学院·口腔医院口腔颌面外科招募的6例16~20岁需拔除埋伏阻生齿的患者。应用胶原酶消化法提取并培养GFs,设置30、50和80μmol/L浓度转染GPRC5A小干扰RNA(siGPRC5A)的实验组和阴性对照小干扰RNA(siNC),利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测siGPRC5A的沉默效率;设置阴性对照、脂多糖、siGPRC5A+脂多糖和siGPRC5A 4个组,通过RT-qPCR和蛋白质印迹法分别验证应用siGPRC5A对1 mg/L脂多糖诱导的GFs炎症状态下GPRC5A在基因和蛋白水平的表达;下调GPRC5A表达后,RT-qPCR检测脂多糖诱导的GFs白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)基因的表达;通过蛋白质印迹法、免疫荧光染色检测核因子-κB(NF-κB)信号通路的激活情况。结果免疫组化结果显示,牙周炎组牙龈组织中GPRC5A表达(0.132±0.006)显著高于牙周健康组(0.036±0.019)(t=8.24,P=0.001)。RT-qPCR结果显示,在脂多糖作用2、6、12和24 h时,脂多糖组GPRC5A基因水平表达量(分别为0.026±0.002、0.042±0.005、0.004±0.000、0.016±0.000)均分别显著高于阴性对照组(分别为0.004±0.000、0.004±0.000、0.002±0.000、0.007±0.000)(均P<0.001),且6 h时达峰值。50μmol/L siGPRC5A(31.16±3.29)与siNC组(100.00±4.88)相比能有效沉默GFs中GPRC5A的表达(F=297.98,P<0.001)。RT-qPCR和蛋白质印; 胡芋含商玲玲葛少华; 关键词：G蛋白偶联受体核因子ΚB 牙龈成纤维细胞

葛根素调节Nrf2/HO-1信号通路对脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞炎症反应的影响: 2024年; 目的:探讨葛根素(GGS)调节核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(HGFs)炎症反应的影响。方法:体外培养HGFs细胞,将HGFs细胞分为空白对照(CK)组(0.9%氯化钠)、LPS组(100 nM LPS)、LPS+GGS低剂量(LPS+GGS-L)组(100 nM LPS+50μM GGS)、LPS+GGS高剂量(LPS+GGS-H)组(100 nM LPS+100μM GGS)、LPS+GGS-H+ML385(Nrf2/HO-1信号通路抑制剂)组(100 nM LPS+100μM GGS+10μM ML385)。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞增殖能力;酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素(IL)-6、乳酸脱氢酶(LDH)、IL-10、IL-1β水平;试剂盒检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;流式细胞术检测HGFs细胞凋亡率;碘化丙啶(PI)染色法检测细胞膜孔的形成;Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、Nrf2、HO-1蛋白表达。结果:与CK组相比,LPS组HGFs细胞OD_(450)(24、48 h)值、IL-10水平、GSH-Px和SOD活性、Bcl-2、Nrf2和HO-1蛋白表达显著降低,IL-6、LDH、IL-1β水平、MDA含量、细胞凋亡率、细胞PI染色阳性率、Bax和NLRP3蛋白表达显著升高(P<0.05);与LPS组相比,LPS+GGS-L组和LPS+GGS-H组HGFs细胞OD_(450)(24、48 h)值、IL-10水平、GSH-Px和SOD活性、Bcl-2、Nrf2和HO-1蛋白表达显著升高,IL-6、LDH、IL-1β水平、MDA含量、细胞凋亡率、细胞PI染色阳性率、Bax和NLRP3蛋白表达显著降低(P<0.05);ML385可减轻GGS对LPS诱导的HGFs细胞炎症损伤的改善作用(P<0.05)。结论:GGS可能通过激活Nrf2/HO-1信号通路减轻LPS诱导的HGFs细胞炎症和氧化应激反应,降低细胞凋亡。; 曹倩王鹏来姜艳秋李娜倪哲; 关键词：葛根素人牙龈成纤维细胞炎症反应

车前草苷通过抑制NF-κB/IL-6信号通路减弱LPS诱导的人牙龈成纤维细胞的炎症反应: 2024年; 目的:探究车前草苷(PMS)通过抑制核因子-κB(NF-κB)/白细胞介素-6(IL-6)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞的炎症反应的影响。方法:将培养的人牙龈成纤维细胞(HGnF)随机分为:对照组、模型组(10mg/L LPS)、PMS低、高剂量组(50、100μg/mL PMS+10mg/L LPS)、激活剂组(10μM BAY11-7085+10mg/L LPS)、PMS高剂量+激活剂组(10μM BAY11-7085+100μg/mL+10mg/L LPS)。CCK-8法检测HGnF细胞活力,ELISA法检测HGnF细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素18(IL-18)含量,Western blot法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IL-1β及NF-κB/IL-6信号通道相关蛋白表达水平。结果:低、高剂量PMS可升高LPS诱导的HGnF细胞活力,降低上清液IL-1β、IL-6、IL-18含量、细胞IL-1β、iNOS及p-NF-κB/NF-κB、IL-6表达水平(P<0.05);激活剂BAY11-7085逆转了高剂量PMS对LPS诱导的HGnF细胞的上述指标的作用(P<0.05)。结论:PMS可能通过抑制NF-κB/IL-6信号通路改善由LPS诱导HGnF细胞的炎症。; 宋雪陆慧高庆玲崔岳卢丽先刘晓燕李蕾郭娇娇刘英奇; 关键词：人牙龈成纤维细胞

臭氧水对人牙龈成纤维细胞的细胞毒性: 2023年; 目的:探讨不同浓度臭氧水(OW)对人牙龈成纤维细胞(HGFs)的细胞毒性。方法:体外培养HGFs,按干预臭氧水浓度分为5组:1、2、4、6 mg/L和空白对照组,在作用的不同时点(1、5、10、20 min)采用倒置相差显微镜观察各组细胞的形态变化,MTT法测定细胞的相对增殖率,采用SPSS软件进行统计分析。结果:浓度为1和2 mg/L的OW在20 min内对HGFs的细胞毒性为1级,4 mg/L作用1 min,细胞毒性为1级,作用5~20 min,细胞毒性为2级;6 mg/L作用1~20 min,细胞毒性为2~3级。结论:臭氧水的细胞毒性与其浓度和作用时间有关,低浓度臭氧水(≤2 mg/L)可应用于临床治疗和消毒中,在保证作用效果的情况下,应尽量减小臭氧水的作用时间和浓度。; 徐超何亚兰张娜娜陈新民; 关键词：臭氧水人牙龈成纤维细胞四甲基偶氮唑盐

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