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一种亮氨酸氨基肽酶的测定试剂盒
本发明提供了一种亮氨酸氨基肽酶的测定试剂盒,包括R1试剂和R2试剂,R1试剂包括:10~100mmol/L的两性离子缓冲液、1~10mmol/L的金属螯合剂、1~10g/L的非离子表面活性剂、10~100g/L的NaCl...
汪顺丽
一种多房棘球绦虫亮氨酸氨基肽酶体外荧光底物酶活性检测方法
2025年
目的构建多房棘球绦虫亮氨酸氨基肽酶(leucyl aminopeptidase,LAP)体外荧光酶活性检测方法,并与化学发色底物酶活性检测方法进行对比。方法确立荧光底物体外酶活性检测方法的反应条件,并通过分子对接、抑制率、精密度对比荧光底物L-亮氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素盐酸盐(Leu-AMC)与化学发色底物L-亮氨酸-4-硝基苯氨(Leu-pNA)之间的差异。结果分子对接结果显示荧光底物Leu-AMC与蛋白的亲和力大于化学发色底物Leu-pNA。通过观察改变反应条件对荧光强度的影响,确立荧光酶活性检测方法在反应温度为37℃、反应pH为9.0、蛋白浓度为800 nmol/L、反应时长60 min的情况下该检测方法反应效果明显。Leu-AMC在5μmol/L的底物浓度和底物浓度变化的情况下有明显的反应效果和反应差异,通过加入不同抑制剂,荧光底物检测方法相较于化学发色底物检测方法存在组间差异。结论本研究构建了以Leu-AMC为底物的多房棘球蚴亮氨酸氨基肽酶体外荧光酶活性检测方法,与化学发色底物相比该方法灵敏度更高。
陈嘉瑀戴瑶王顺娟肖杨闫鑫宗刘通袁智浩史凯丽李润乐汤锋
关键词:多房棘球蚴LAP酶活性
一种亮氨酸氨基肽酶检测试剂盒和检测方法
本发明公开了一种亮氨酸氨基肽酶检测试剂盒和检测方法,所述试剂盒包括R1试剂和R2试剂,R1试剂包括缓冲液、无机盐、酶促进剂、表面活性剂和防腐剂,R2试剂包括缓冲液、辅助溶剂、助溶剂、底物和防腐剂,其中助溶剂为甲醇或二甲亚...
龚婷华权高彭彬尚莹梁艳赵畅
一种亮氨酸氨基肽酶化学发光检测试剂的合成及应用
本发明属于小分子化学发光探针技术领域,具体为检测亮氨酸氨基肽酶(LAP)的化学发光探针及其合成方法与应用。本发明包括可被LAP特异性水解的氨基酸底物L‑Leu、1,2‑二氧杂环丁烷类化学发光团以及可自断裂的连接基团。本发...
程魁郑艳君王保取夏苏平
亮氨酸氨基肽酶近红外荧光探针的构建及其应用研究
亮氨酸氨基肽酶(LAP)作为生物体内一种重要的锌金属肽酶,其表达异常与肝损伤、肾损伤以及肿瘤的发生和进展密切相关。因此,LAP常被视为一种有潜力的生物标志物,用于相关疾病的诊断和研究。荧光探针成像技术凭借其非侵入性、高时...
夏小峰
关键词:亮氨酸氨基肽酶荧光探针疾病诊断
亮氨酸氨基肽酶3在癌症发生及诊治中的研究进展
2024年
亮氨酸氨基肽酶3(leucine aminopeptidase 3, LAP3)是一种可以通过催化蛋白质或肽底物氨基亮氨酸残基水解而完成蛋白质转化和新陈代谢的酶,对细胞的生长发育至关重要。LAP3的异常表达往往会导致疾病的发生,目前已发现LAP3在包括乳腺癌、肝细胞癌、卵巢癌和胶质瘤在内的多种癌症中表达升高。进一步研究表明,LAP3可以通过调控癌细胞间信号传导、上皮-间充质转化、细胞自噬、细胞周期和细胞精氨酸合成与代谢来影响肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力,进而促进恶性肿瘤的发生。当前,针对LAP3的靶向治疗药物也正成为新的研究方向。本综述总结了LAP3的最新进展,分析LAP3在恶性肿瘤诊断和预后中的临床价值及其致癌作用和潜在的分子机制,以期为恶性肿瘤诊断和治疗提供新的启示。
梁巧雷连成黄晶
关键词:恶性肿瘤生物标志物
抗多房棘球蚴亮氨酸氨基肽酶纳米抗体筛选及原核表达纯化
2024年
目的筛选抗多房棘球蚴亮氨酸氨基肽酶(Em-LAP)纳米抗体并构建该纳米抗体原核表达系统,表达纯化纳米抗体蛋白,获得高特异性抗多房棘球蚴亮氨酸氨基肽酶的纳米抗体。方法利用噬菌体文库展示技术(phage library display technology)筛选亮氨酸氨基肽酶纳米抗体,应用phage-ELISA法检测纳米抗体与靶蛋白的亲和力。将亲和力高的抗体测序后,串联目的序列并优化密码子,合成后接入表达载体pET30a做酶切鉴定。将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白表达,表达的蛋白经金属螯合亲和层析纯化获得目的蛋白LAPNb。结果筛选出抗Em-LAP纳米抗体,构建了重组pET30a-LAPNb质粒,得到了一个大小约为28KD的LAPNb蛋白。结论本研究成功筛选获得了抗Em-LAP纳米抗体,构建了LAPNb原核表达系统,表达纯化了LAPNb蛋白。
戴瑶刘文婧肖杨李润乐汤锋
关键词:多房棘球蚴纳米抗体亮氨酸氨基肽酶
半定量检测亮氨酸氨基肽酶的试纸及方法
本申请实施例属于检测技术领域,涉及一种半定量检测亮氨酸氨基肽酶的试纸及方法,包括亮氨酸氨基肽酶试纸、空白滤纸以及聚对苯二甲酸乙二醇酯基片;其中,所述亮氨酸氨基肽酶试纸、空白滤纸并列设置在所述聚对苯二甲酸乙二醇酯基片上;所...
齐文闯吴润锋蒋析文简俊兴芦迪
多房棘球蚴亮氨酸氨基肽酶的纳米抗体筛选及中和作用评价
戴瑶
一种亮氨酸氨基肽酶检测试剂盒
本发明公开了一种亮氨酸氨基肽酶检测试剂盒,涉及临床体外检测试剂技术领域。所述检测试剂盒试剂成分如下:缓冲液、L‑亮氨酸对硝基苯胺、NaCl、单十二烷基磷酸酯钾、甲酰胺、磺基甜菜碱、防腐剂。本发明具有稳定性好、重复性强的特...
张洁慧胡晓飞谢清华董雯周东

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汤锋
作品数:79被引量:90H指数:6
供职机构:青海大学
研究主题:多房棘球蚴 棘球蚴 多表位疫苗 体液免疫应答 幽门螺旋杆菌
李润乐
作品数:49被引量:45H指数:5
供职机构:青海大学
研究主题:多房棘球蚴 棘球蚴 体液免疫应答 包虫病 多表位疫苗
张少华
作品数:105被引量:104H指数:6
供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所
研究主题:猪带绦虫 豆状囊尾蚴 猪囊尾蚴 囊尾蚴 原核表达
才学鹏
作品数:716被引量:1,686H指数:17
供职机构:中国兽医药品监察所
研究主题:猪带绦虫 克隆 原核表达 猪囊尾蚴 疫苗
胡芳
作品数:58被引量:250H指数:8
供职机构:湖北理工学院
研究主题:蛋白尿 灵芝酸 肾损伤 亮氨酸氨基肽酶 肿瘤标志物